زیست فناوری میکروبی
سال:1389 | دوره:2 | شماره:6 |تعداد مقالات:8

زمینه و هدف: سالمونلا تیفی موریوم یکی از گونه های شایع جنس سالمونلا است که در انسان و حیوانات ایجاد عفونت های مختلف می نماید. یکی از ارگان هایی که این باکتری پس از ایجاد سپتسمی مورد حمله قرار می دهد کبد است که تولید ندول های پاراتیفوییدی در کبد می نمایند، از این رو انسان همیشه در تلاش برای پیشگیری و درمان سالمونلوز در حیوانات بوده است. با توجه به اینکه مصرف آنتی بیوتیک ها نیز محدودیت های خاص خود را دارد توجه به استفاده از پروبیوتیک ها جلب شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر ساکارومایسز بولاردی بر میزان ضایعات پاتولوژیک ناشی از عفونت تجربی با سالمونلا تیفی موریوم در رت به عنوان مدل تجربی، به منظور ارزیابی خواص سالمونلا در پیشگیری از ضایعات کبدی ناشی از سالمونلا تیفی موریوم می باشد.روش بررسی: در این مطالعه تعداد 30 عدد رت نر به سه گروه A,B,C تقسیم شدند. قبل از القا ساکارومایسز، آنزیم های کبدی ALT و AST اندازه گیری شد. رتهای گروه B وC  هر کدام به ترتیب 107 و 108 cfu/ml مخمر ساکارومایسز بولاردی به مدت 5 روز به صورت دهانی دریافت کردند. گروه A به عنوان گروه کنترل، 1 سی سی سالین نرمال دریافت نمودند. در روز پنجم یک میلی لیتر سوسپانسیون میکروبی حاوی 107 cfu/ml باکتری سالمونلا تیفی موریوم به هر سه گروه تجویز شد. در روز دهم بعد از تجویز باکتری مجددا آنزیمهای ALT و AST به منظور ارزیابی عملکرد کبد اندازه گیری شدند. در پایان، نتایج حاصل از بررسی های سرمی گروههای مختلف با استفاده از آزمون آماری T-TEST مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.یافته ها: در گروه A یعنی گروه کنترل، آنزیمهای ALT و AST به طور معناداری افزایش یافته بود (P<0.001). اما در گروه های آزمایش B و C چنین افزایشی مشاهده نگردید، که این خود موید اثرات حفاظتی مخمر می باشد. همچنین اختلافات معنی داری در افزایش آنزیمهای ALT و AST بین گروههای B و C مشاهده نگردید که نشان می دهد 107 cfu/ml مخمر با 108 cfu/ml مخمر در پیشگیری از ضایعات سالمونلا اختلاف چندانی ندارند.نتیجه گیری: این مطالعه نشان می دهد که ساکارومایسز بولاردی در جلوگیری از افزایش آنزیم های کبدی تحت مواجه با سالمونلا تیفی موریوم ایفا نقش می کند.

زمینه و هدف: شیوع بیماری های ناشی از مصرف مواد غذایی آلوده همواره یکی از مشکلات موجود در سراسر جهان بوده است و هر ساله هزینه های زیادی صرف بهبود این بیماری ها می گردد. شیرینی های تر به علت مواد تشکیل دهنده و شرایط ساخت و نگهداریشان امکان زیادی برای آلوده شدن به انواع میکرب ها را دارا می باشند. هدف از بررسی حاضر به منظور تعیین آلودگی میکروبی در شیرینی های تر مصرفی در جنوب شهر تهران می باشد.روش بررسی: 121 نمونه شیرینی تر از واحدهای قنادی جنوب شهر تهران بصورت کاملا تصادفی تهیه شد و طبق استاندارد ملی ایران به بررسی میزان و نوع آلودگی احتمالی میکروبی انجام گرفت.یافته ها: در این تحقیق مشخص گردید که 72.7 درصد از کل نمونه های شیرینی تر جنوب شهر تهران به میکرب های مختلف آلوده و غیر قابل مصرف می باشند. این امر نشان دهنده شرایط غیر بهداشتی کارگاه های تولید کننده این ماده غذایی و عدم رعایت نکات بهداشتی در هنگام کار و نگهداری این محصول است. بیشترین آلودگی مربوط به باکتری های آنتروباکتریاسه و مخمرها بوده است. نمونه های مورد بررسی به سایر باکتری ها نیز آلوده بودند، بطوریکه 100% نمونه های غیر قابل مصرف، به بیش از یک نوع میکروارگانیسم آلودگی داشتند. خوشبختانه در این مطالعه هیچ موردی از سالمونلا در شیرینی های تر جدا نگردید. همچنین بررسی ماهانه شیرینی های تر نشان داد که بیشترین میزان آلودگی مربوط به فصل تابستان (تیرماه با میانگین آلودگی 86%) و کمترین میزان آلودگی مربوط به فصل زمستان (آذرماه با میانگین آلودگی 50%) بوده است.نتیجه گیری: آموزش و نظارت بیشتر در خصوص تهیه و نگهداری شیرینی تر توسط مراکز بهداشتی از ضروریات سلامت جامعه می باشد.

زمینه و هدف: یکی از راه کارهای جبران کمبود مواد مغذی در خوراک دام استفاده از پروبیوتیک ها جهت فرآوری خوراک می باشد. از آنجایی که ضایعات مرکبات از ارزش پروتئینی پایینی برخوردار هستند لذا می توان با فرآوری آن ها توسط مخمرها و قارچ ها به نحو بهتری از آنها در تغذیه دام استفاده نمود.روش بررسی: در این آزمایش از ضایعات میوه لیموترش حاصل از کارخانه آبلیموگیری استفاده گردید و از مخمر ساکارومایسز سرویسیا به منظور عمل آوری و افزایش غلظت مواد مغذی آنها استفاده شد.یافته ها: نتایج نشان داد که عمل آوری تفاله لیمو با مخمر باعث افزایش معنی داری در محتوای پروتئین خام (P<0.01) و دیواره سلولی بدون همی سلولز ( (P<0.05تفاله لیمو گردید ولی درصد دیواره سلولی ( (P<0.01و ماده آلی ( (P<0.05آن کاهش یافت. نتایج حاصل از تجزیه پذیری آزمایشگاهی نشان داد که در طی عمل آوری قابلیت هضم ماده آلی قابل هضم در ماده خشک به طور معنی داری ( (P<0.05کاهش یافت در حالی که قابلیت هضم ماده خشک و همچنین قابلیت هضم ماده آلی تغییر معنی داری نداشت. علاوه بر این انرژی قابل متابولیسم نیز به طور معنی داری ( (P<0.05کاهش یافت.نتیجه گیری: می توان نتیجه گرفت که عمل آوری تفاله لیمو با مخمر ساکارومایسزسرویسیا باعث افزایش بهره وری این محصول می شود.

زمینه و هدف: هدف از این مطالعه ردیابی باکتری های مسوول عفونت های مجاری صفراوی و بررسی حساسیت روش RFLP- DGGE به عنوان یک روش کمکی جهت تمایز جدایه های مختلف باکتریایی در سطح سویه می باشد.روش بررسی: تعداد 60 نمونه مایع صفراوی به روش ERCP Cholangiopancreatography) (Endoscopic Retrograde از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان طالقانی جمع آوری گردید. ایزوله های باکتریایی مرتبط پس از تعیین هویت و بررسی مقاومت دارویی، به منظور ردیابی تنوع ترادفی نواحی ژنی به کمک روش فنل- کلروفرم مورد استخراج DNA ژنومی قرار داده شدند. تمایز این جدایه ها بر اساس آزمون RFLP- DGGE بر روی محصول واکنش PCR قطعه ژنی 16 s rRNA صورت گرفت. در پایان بر اساس مقایسه الگوی باندی نمونه ها با الگوی باندی سویه استاندارد و نتایج آنتی بیوگرام، کارآیی این روش مورد تفسیر قرار گرفت.یافته ها: از 60 نمونه جمع آوری شده مایع صفراوی تعداد 38 جدایه باکتریایی از میان 26 نمونه جدا گردید. در سایر نمونه ها نتایج کشت باکتریایی منفی بود. از این 38 جدایه 16 جدایه اشریشیا کلی، 10 نمونه کلبسیلا پنومونیه، 8 نمونه انتروکوکوس فکالیس، و 4 نمونه سودوموناس ائروژینوزا بدست آمد. بیشترین میزان مقاومت در میان این جدایه مربوط به داروهای آموکسی سیلین (100%) و آمپی سیلین (75%) بود. نتایج آزمون  RFLP- DGGEموید تفاوت در الگوهای باندی جدایه های تحت مطالعه بود؛ این اختلاف ها توسط تنوع الگوی مقاومتی حاصله از آنتی بیوگرام مورد تایید بیشتر قرار گرفت.نتیجه گیری: نتایج این بررسی نشان داد که روش RFLP –DGGE بر روی نواحی ژنی طویل از 16 S rRNA روش مناسبی جهت بررسی تفاوت سویه های باکتری هایی جدا شده از نمونه های بالینی می باشد. این روش توانست چهار تیپ شایع از جدایه های مقاوم اشریشیا کلی را بخوبی از یکدیگر تمایز دهد، از اینرو بنظر می رسد روش حاضر بتواند به عنوان یک روش فرعی در غربالگری مولکولی جدایه های اشریشیا کلی مورد استفاده قرار گیرد. برای بالا بردن اختصاصیت و حساسیت این روش به عنوان یک روش استاندارد برای تیپ بندی انجام مطالعات مقایسه ای با سایر روش های تیپ بندی مولکولی و همچنین مطالعه بر روی طیف وسیعتری از باکتری ها نیاز است.

زمینه و هدف: کاپوسی سارکوما یکی از سرطانهای بدخیم مربوط به بافت پیوندی است که در بیماران مبتلا به ایدز و بیمارانی که سیستم ایمنی تضعیف شده دارند شیوع دارد. این مطالعه بمنظور تعیین و بررسی اپیدمیولوژی سرطان کاپوسی ناشی از هرپس ویروس انسانی تیپ 8 برای مراجعین به بیمارستانهای تهران انجام شد.روش بررسی: از تابستان 1387 تا پایان تابستان 1388 جمعا تعداد 42 نمونه با تشخیص کاپوسی یا مشکوک به آن، بصورت بافت پارافینه از بیمارانی که بین سالهای 1379 تا 1389 به بیمارستانهای لقمان – شهدا – رازی و انستیتو کانسر مراجعه نموده اند جمع آوری گردید. پس از استخراج نمونه ها، با بکارگیری پرایمرهای اختصاصی برای قطعه ORF26 و با روش Nested PCR ویروس هرپس انسانی تیپ 8 شناسایی شد.یافته ها: از تعداد 42 نمونه بافت پارافینه، 30 نمونه از نظر ویروس هرپس انسانی تیپ 8 مثبت شدند. میانگین سنی موارد مثبت 61.6 سال گزارش گردید که تعداد موارد مثبت در مردان 23 مورد و در زنان 7 مورد گزارش گردید.نتیجه گیری: در این مطالعه ویروس هرپس تیپ 8 در 30 مورد از تعداد کل 42 نمونه پارافینه جداسازی گردید. با در نظر گرفتن 4 بیمار که مبتلا به بیماری سودوکاپوسی بودند، ویروس هرپس تیپ 8 در 78.9% از بیماران جداسازی گردید. این مطالعه بیانگر حساسیت بالای روش Nested PCR برای تشخیص این ویروس می باشد.

زمینه و هدف: سالمونلوز یکی از بیماری های مهم عفونی مشترک بین انسان و حیوانات است. مواد غذایی تهیه شده گوشت طیور آلوده ویا فراورده های جنبی آنها از مهمترین منابع آلودگی سالمونلوز در انسان به حساب می آیند. ژن Hyperinvasive (locus A) hilA داری نقش بسیار مهمی در بیماری زایی سالمونلا می باشد. این ژن با رمز نمودن پروتئین های تنظیمی نسخه برداری باعث بیان ژن های مهاجم و تسهیل نفوذ سالمونلا به داخل سلول های پوششی روده می شود. هدف ازانجام این تحقیق جداسازی و تعیین گروه های سرمی سالمونلا از طیور و شناسایی ژن hilA در آنها با استفاده از روش PCR بود.روش بررسی: در این مطالعه مجموعا 520 نمونه (شامل 400 نمونه مرغ، 30 نمونه شترمرغ و 90 نمونه کبوتر) از روده، کبد و طحال طیور جمع آوری و به منظور جداسازی سالمونلا تحت آزمایشات باکتریولوژیک قرار گرفتند. آزمایش تعیین گروه سرمی با استفاده از آنتی سرمهای اختصاصی روی سالمونلاهای جدا شده انجام شد. همچنین آزمایش PCR با استفاده از یک زوج پرایمر اختصاصی ژن hilA جهت شناسایی و ارزیابی این ژن در سالمونلا های جدا شده انجام گرفت.یافته ها: نتایج آزمایش های باکتریولوژیک از مجموع 520 نمونه مورد آزمایش در این تحقیق تعداد 45 نمونه (8.65%) از نظر آلودگی به سالمونلاها دارای نتایج مثبت بودند. میزان شیوع سالمونلا در مرغ، شترمرغ و کبوتر به ترتیب 7.25%، 6.66% و 15.55% تعیین گردید. همچنین پس از تعیین گروه های سرمی، سالمونلاهای جدا شده در 4 گروه سرمی D1، B،C1  C2 و طبقه بندی شدند که گروه سرمی D1 داری بیشترین فراوانی (53.3%) بوده است. بر اساس نتایج PCR ژن hilA، این ژن با ایجاد باند 854 bp در تمامی سالمونلاهای جدا شده شناسایی گردید.نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد اولا سالمونلوز در کبوتر دارای شیوع نسبی بیشتری در مقایسه با سایر طیور مورد آزمایش در این تحقیق بوده و گروه سرمی  D1 سالمونلا از گروه های سرمی غالب در طیور می باشد. ثانیا ژن hilA در گروه های سرمی مختلف سالمونلاها و در گونه های مختلف پرندگان دراندازه یکسان قابل شناسایی است.

زمینه و هدف: در سالهای اخیر شیوع بیماریهای آلرژیک در کلیه جوامع روند صعودی داشته است. مشخص شده که اسپور و کونیدی قارچ های موجود در هوا در ایجاد فرمهای مختلف آلرژی بویژه آلرژی تنفسی نقش دارند. روش معمول تشخیص آزمایشگاهی قارچ ها، کشت آن ها می باشد که مدت زیادی باید صرف نمود که مشخصات مورفولوژی به طور قطع تعیین کننده گونه باشد. در بهبود بخشیدن حساسیت و ویژگی برای تعیین هویت قارچ های پاتوژن و آلرژی زا روش مولکولی گسترش پیدا کرده است.روش بررسی: پس از کشت قارچ های آسپرژیلوس و فوزاریوم روی محیط PDA و خرد شدن اسپورهای قارچ ها، DNA استخراج شد که به عنوان الگو در PCR برای تکثیر ژن های Aspf 1 و 4 و Its 1 استفاده گردید. در مرحله بعد همین پروسه در Colony PCR، بدون استخراج DNAصورت پذیرفت.یافته ها: نتایج PCR نشان داد که هر کدام از پرایمرها الگوی تکثیر یافته متفاوتی را ایجاد کردند و با پرایمر اختصاصی توانستیم دو قارچ را از یکدیگر مجزا کنیم. همچنین نتایج حاصل از دو روش PCR, Colony PCR یکسان بود. با توجه به اینکه تحقیقات سایر محققین بر روی مخمرها صورت پذیرفته بود، در این مطالعه از قارچ های رشته ای استفاده شد و نتایج یکسانی بدست آمد که با توجه به وقت گیر بودن مرحله استخراج، روش Colony PCR پیشنهاد می شود.نتیجه گیری: با بهینه سازی روش PCR Colony، می توان به عنوان روشی مطمئن جهت تشخیص سریع قارچ های فوق در آزمایشگاه های تشخیص طبی با استفاده از روش مولکولی بهره برد.

زمینه و هدف: درک بیشتر از چگونگی زنده مانی سلول های لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس در فرآیند تهیه تجاری و به کارگیری آن به عنوان باکتری پروبیوتیک مفید می باشد. بنابراین هدف این تحقیق بررسی اثر تنش های مختلف محیطی بر زنده مانی این باکتری پروبیوتیک می باشد.روش بررسی: از آنجایی که لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس یکی از مهمترین میکرو ارگانیسم های پروبیوتیکی در تکنولوژی مواد غذایی می باشد، بررسی جنبه های مختلف واکنش های آن در برابر تنش های محیطی، در مقالات منتشر شده بین سالهای 1980 تا 2010 صورت گرفت.یافته ها: بررسی مقالات نشان داد که لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس توانایی سازگار شدن با سایر تنش ها را دارد و سازگاری آن در برابر یک تنش می تواند مقاومت آن در برابر اکثر تنش های غیر مرتبط دیگر را افزایش دهد اما همه تنش ها نمی توانند این سازگاری را به وجود بیاورند. همچنین ثابت شد که مقاومت لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس در برابر تنش ها در فاز ایستایی رشد نسبت به فاز لگاریتمی رشد بیشتر می باشد.نتیجه گیری: با توجه به بررسی فاکتورهای مورد مطالعه در این تحقیق مشاهده شد که باکتری لاکتوباسیوس اسیدوفیلوس قدرت سازگار شدن در برابر تنش های محیطی را دارا می باشد و می توان با پیش تیمار کردن آن در شرایط سخت، زنده مانی این باکتری را افزایش داد.