تازه های بیوتکنولوژی سلولی مولکولی
سال:1392 | دوره:3 | شماره:10 |تعداد مقالات:13

سابقه و هدف: سرطان های معده روده ای از شایع ترین سرطان ها در سراسر دنیا می باشند که علت توزیع این سرطان ها فاکتورهای محیطی و ارثی می باشد، فاکتورهایی مانند عادت های غذایی، فعالیت فیزیکی و کشیدن سیگار نقش بسیار مهمی در ابتلا به این سرطان ها ایفا می کنند، سرطان معده چهارمین سرطان متداول و دومین سرطان مرگبار در دنیاست. نایسین، پپتیدی ضد میکروبی با 34 بنیان اسید آمینه است و به علت دارا بودن آمینواسید لانتیونین جزو خانواده لانتی بیوتیک هاست. هدف از این مطالعه بررسی اثر سایتوتوکسیسیتی نایسین بر روی رده سلولی سرطانی معده می باشد.مواد و روش ها: به منظور مطالعه اثر سایتوتوکسیک باکتریوسین نایسین بر روی سلول هایAGS ، این سلول ها به تعداد 104 سلول در پلیت های 96 خانه ای کشت داده شدند و به مدت یک شبانه روز در انکوباتور در دمای 37 درجه سانتی گراد، با 5 درصد CO2 و 95 درصد هوای مرطوب انکوبه شدند، پس از 24 ساعت این سلول ها با غلظت های مختلف 0، 15، 30، 40، 60، 75، 150، 250، 350 و 450 میکرومولار نایسین تیمار شدند و برای هر غلظت 3 بار تکرار انجام شد، در نهایت اثر سایتوتوکسیک نایسین بر روی این سلول ها در بازه های زمانی 24، 48 و 72 ساعت پس از تیمار بررسی شد.یافته ها: در هر سه بازه زمانی مشاهده شد که با افزایش غلظت نایسین قابلیت زیستایی سلول ها کاهش می یابد، به علاوه تیمار سلول ها در بازه زمانی طولانی تر اثر سایتوتوکسیسیتی بیشتر دارد.نتیجه گیری: بسیاری از پپتیدها با داشتن فعالیت های بیولوژیکی به عنوان عوامل درمانی استفاده می شوند؛ از جمله این پپتیدها نایسین می باشد که باعث مرگ در سلول های AGS می شود، اثر سایتوتوکسیک نایسین بر روی این سلول ها وابسته به غلظت و زمان است.

سابقه و هدف: در این تحقیق بیان microRNA های خانواده let-7 در سلول های CD4+T فعال شده با آنتی- CD2,CD3,D28 تحت تیمار با اینترلوکین 2 و یا بدون تیمار با آن مورد بررسی قرار گرفت. خانواده let-7 دارای دو خاصیت انکوژنی و مهارکنندگی تومور در سلول های مختلف است.مواد و روش ها: به این منظور سلولهای CD4+T بکر با ریز دانه های حاوی آنتی- CD2,CD3,CD28 تیمار شدند و تحت القا اینترلوکین 2 خارجی (0.75 نانوگرم بر میلی لیتر) به مدت 72 ساعت قرار گرفتند.از سلول های فعال شده و سلول های تحت تیمار با اینترلوکین 2،RNA  تام استخراج گردید. بعد از سنتز cDNA، بیان microRNA ها به روشQ-RT-PCR array  با استفاده از کیت (miRCURYLNATM universal RT miRNA PCR kit) صورت گرفت. آنالیز داده ها به کمک نرم افزار GeneX و روش DDCt انجام شد.یافته ها: در سلول های CD4+T فعال شده با آنتی- CD2,CD3,CD28 در مقایسه با سلول های تحت تیمار اینترلوکین 2 افزایش بیان 5 عضو خانواده let-7 مشاهده گردید. از جمله اهداف پیش بینی شده آنها به کمک miRDB وmiRanda  می توان به فسفاتازهای miDB و miRanada خانواده SOCS اشاره نمود که دو خانواده اولی در مهار مسیر پیام رسانی TCR و آخری در مهار مسیر JAK/STAT در سلول های فعال شده نقش دارد.نتیجه گیری: به نظر می رسد miRNA های مختلف از جمله خانواده let-7 با مهار بیان ژن های خاص در سطح پس از رونویسی در کنترل مسیرهای موثر در گسترش کلونی جهت ایجاد پاسخ مناسب ایمنی در سلول های CD4+T فعال شده نقش مهمی ایفا کنند.

سابقه و هدف: مشتقات کینوکسالین و پیرازولین دارای طیف وسیعی از اثرات بیولوژیکی می باشند که آنها را به عوامل دارویی مناسبی با اثرات مختلف از جمله خاصیت سایتوتوکسیک در شیمی درمانی سرطان تبدیل کرده است. در این مطالعه ترکیب ¢5-فنیل-¢2 و 4¢-دی هیدرو اسپایرو [ایندنو [1 و b-2] کینوکسالین-11 و¢3 –پیرازول] سنتز شد و اثرات سایتوتوکسیک آن بر روی رده سلولی K562 و سلول های PBMC بررسی گردید.مواد و روش ها: ترکیب ¢5-فنیل-¢2 و -¢4دی هیدرو اسپایرو [ایندنو [1 و b-2] کینوکسالین-11 و ¢3-پیرازول] به روش تک-ظرف سنتز و خواص ضد سرطانی آن بر روی رده سلولی سرطان خون (K562) و سلول های PBMC تحریک شده با PHA  که از خون کامل فرد سالم استخراج شده است به روش MTT بررسی شد. همچنین اثر سایتوتوکسیک سیس پلاتین نیز بر روی این سلول ها بررسی و مقایسه گردید.یافته ها: IC50 بدست آمده از اثر این ترکیب سنتز شده بر روی رده سلولی K562 و سلول های PBMC+PHA به ترتیب mg/ml 0.92 و 0.75 mg/ml می باشد. در حالی که IC50 سیس پلاتین به عنوان یک داروی استاندارد در شیمی درمانی سرطان بر روی همین سلولها به ترتیب 1.71 mg/ml و 7.8 mg/ml بدست آمد.نتیجه گیری: نتایج نشان داد ترکیب 4 نسبت به سیس پلاتین تا حدودی فعالیت سایتوتوکسیک بیشتری بر روی رده سلول سرطانی K562 و سلول های PBMC تحریک شده دارد.

سابقه و هدف: پپتیدها را می توان به عنوان عوامل ایده ال تشخیصی و درمانی در نظر گرفت و به عبارتی دیگر آن ها را گلوله های جادوئی نامید. بافت های توموری به علت بیان رسپتورهای مختلف پپتیدی به خوبی می توانند توسط پپتیدهای نشان دار مشخص شوند. از جمله پپتیدهای مورد استفاده می توان از نروتنسین نام برد که یک پپتید 13 اسید آمینه ای و از پپتیدهای مغزی – روده ای بوده که اولین بار از هیپوتالاموس گاو و سپس از بافت روده گاو جدا شده است. در این مقاله امکان استفاده از مشتق نروتنسین Neurotensin نشان دار به عنوان یک رادیوپپتید جدید که رسپتورهایش خصوصا نوع یک آن در تومورهای اگزوکرین پانکراس بیان می شود مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روش ها: مشتقی از نروتنسین که می تواند خاصیت اتصال به رسپتور را دارا باشد به روش فاز جامد سنتز شد. عامل شلاته کننده تترامین به انتهای آمینی پپتید متصل گردید و نشان دار سازی با استفاده از رادیوایزوتوپ تکنسیوم انجام شد. بازده نشان دارسازی، پایداری در سرم انسانی، میزان اتصال به رسپتور سطح سلول و ورود به رده سلول توموری HT-29 و توزیع بیولوژیکی در موش سوری سالم بررسی گردید.یافته ها: پپتید با خلوص بالا و بازده %40 تهیه گردید. نشان داروسازی به خوبی انجام شده و پپتید نشان دار شده با خلوص بالای %90 به دست آمد. پپتید نشان دار دارای خاصیت اتصال اختصاصی به رسپتور خود در سطح سلول بود و بعد از 4 ساعت %22 فعالیت به طور اختصاصی وارد سلول شد. پایداری بالا در سرم انسانی همراه با کلیرانس سریع خونی و دفع کبدی و کلیوی برای پپتید نشان دار دیده شد.نتیجه گیری: با توجه نتایج به دست آمده که نشان دهنده ترکیبی با خاصیت اتصال به رسپتور و توزیع بیولوژیکی مناسب است می توان آن را به عنوان رادیوداروی تصویربرداری از تومورهای با منشا اگزوکرین پانکراس مورد توجه قرار داد.

سابقه و هدف: صبر زرد یکی از گونه های مهم دارویی است که در نواحی گرم و خشک می روید. در این پژوهش 50 نمونه از جمعیت های Aloe vera Linne  از 5 منطقه مختلف جنوب ایران، برای ارزیابی صفات مرفولوژیک مورد بررسی قرار گرفت.مواد و روش ها: در طول دوره رشد 18 صفت مرفولوژیکی از قبیل ارتفاع گیاه، تعداد برگ های گیاه، طول و قطر برگ بالغ و... اندازه گیری شد. اطلاعات بدست آمده به وسیله نرم افزار آماری SPSS مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. ضرایب همبستگی برای صفات مورد بررسی محاسبه و جدول مربوطه رسم شد. تجزیه کلاستر بر اساس مجموع صفات اندازه گیری شده انجام و دندروگرام مربوطه رسم شد.یافته ها: نتایج حاصل از ضریب همبستگی، همبستگی مثبت و معنی داری را بین برخی صفات نشان داد از جمله طول برگ بالغ با قطر برگ بالغ همبستگی مثبت و معنی داری را در سطح احتمال 5 درصد داشتند. جمعیت برازجان دارای بیشترین وزن برگ (262 گرم) و قطر برگ (2.5 سانتی متر) بود. جمعیت بشاگرد دارای بیشترین وزن بوته (18 کیلوگرم) و طول گل (120 سانتی متر) بود.نتیجه گیری: تجزیه خوشه ای با توجه به فاصله ژنتیکی، جمعیت های مورد مطالعه را در 3 گروه مجزا قرار داد. نتایج نشان داد که صبر زرد ایرانی دارای تنوع بسیار زیاد بوده و منبع ژنتیکی با ارزشی برای تحقیقات به نژادی است.

سابقه و هدف: در حال حاضر، از سیتوکالازین B به عنوان متوقف کننده سیتوکینز در سلول های در حال تقسیم، برای درمان انواعی از سرطان استفاده می شود.مواد و روش ها: موش های نر Balb/c (25-30 گرم) به دو گروه تقسیم شدند: گروه کنترل و مورد آزمایش. به موش های گروه کنترل آب مقطر استریل و به گروه تیماری دوزهای 1،2،3،5 میلی گرم به ازای هر کیلو گرم وزن موش سیتوکالازین B به ناحیه صفاقی تزریق شد. بعد از 24 ساعت موش ها با کلروفرم کشته شدند و هر دو استخوان ران از بدن جدا سپس مغز استخوان با 1 میلی لیتر محلول Kcl استخراج شد. سو سپانسیون سلولی به دست آمده به مدت 5 دقیقه تحت سانتریفوژ 1000 rpm قرار گرفتند. در نهایت گسترش های سلولی بر روی لازم تهیه گردید.یافته ها: در این مطالعه برای به دست آوردن دوز مناسب جهت توقف تقسیم سیتوپلاسم توسط سیتوکالازین B دوزهای 5،3،2،1 میلی گرم به ازای هر کیلو گرم وزن موش در مدت زمان 24 ساعت پس از تیمار مورد آزمایش قرار گرفتند. از آزمون میکرونوکلئوس برای بررسی سلول های دو هسته ای و از روش های آمارگیری Anova و Tukey (نرم افزاSPSS ر) استفاده شد.نتیجه گیری: پس از بررسی نتایج، داده ها نشان دهنده بیشترین فراوانی سلول های پرونورموبلاست دو هسته ای (متوقف شده در سیتوکینز) در دوز 3 میلی گرم به ازای هر کیلوگرم وزن بدن موش بودند.

سابقه و هدف: آلکالوئیدهای وینکا، آلکالوئیدهای دیمریک کاتارانتوس روزئوس، خانواده ای از داروهای ضد میتوزی می باشند که در شیمی درمانی سرطان بر علیه انواعی از تومورهای هماتولوژیکی و جامد مورد استفاده قرار می گیرند. به این ترتیب که این ترکیبات با زیر واحدهای توبولین برهمکنش می دهند و از خودآرایی میکروتوبول ممانعت می نمایند که این امر جداسازی کروموزومی ناهنجار را در سلول های در حال تقسیم القا می کند و منجر به آنیوپلوئیدی می شود. هدف این مطالعه بررسی اثرات وین-کریستین (VCR)، مهم ترین و طبیعی ترین (تولید شده در واکوئل گیاه) عضو خانواده آلکالوئیدهای وینکا، بر القا ناهنجاری کروموزومی در سلول های مغز استخوان موش نر Balb/c در شرایط in vivo می باشد.مواد و روش ها: دوزهای مختلفی از وین کریستین ابتدا از مسیر داخل صفاقی به حیوانات تزریق گردیدند. بعد از 24 ساعت، حیوانات کشته شدند و سلول های مغز استخوان آن ها به منظور بررسی ژنوتوکسیسیتی و القا ناهنجاری با استفاده از سنجش میکرونوکلئوس مورد ارزیابی قرار گرفت. داده ها توسط آنالیز آماریANOVA  و با استفاده از نرم افزار PASW18 بررسی و تایید گردیدند.یافته ها: وین کریستین به طور معنی داری (P<0.05) تشکیل میکرونوکلئوس ها را در تمام دوزها در اریتروسیت های پلی کروماتیک القا نمود. این ماده ژنوتوکسیسیتی را در مغز استخوان موش ها القا کرد و موجب آسیب میتوزی قابل ردیابی گردید.نتیجه گیری: نتایج آشکار کردند که وین کریستین توانایی بالایی برای القا تشکیل میکرونوکلئوس در شرایط in vivo در سلول های مغز استخوان طبیعی در موش Balb/c دارد. نتایج حاضر می تواند در تحقیقات و بررسی چگونگی ایجاد ناهنجاری کروموزومی و سرطان مورد استفاده قرار گیرد.

سابقه و هدف: نانو ذرات نقره با قطری حدود 1 تا 100 نانومتر به عنوان عنصر ضدمیکروبی در داروسازی کاربرد دارند. کاربرد وسیع آن ها در زندگی امروزی و مقاومت باکتری های بیماری زا به آنتی بیوتیک ها که در سال های اخیر ظاهر شده است، دلیل مهمی برای جایگزینی آنتی بیوتیک ها با نانو نقره می باشد، اما نانو ذرات دارای خواص سمیتی نیز می باشند که تا به امروز در مورد آن به طور دقیق مطالعه نشده است.مواد و روش ها: دراین تحقیق ما آنتی بیوتیک ها را با غلظت های مختلف محلول نانو ذرات نقره با قطر 20 نانومتر در رقیق کننده های منی گاو جایگزین کردیم و میزان زنده مانی، تحرک و حرکت پیش رونده اسپرم ها را در زمان های متوالی 1 و 3 ساعت بعد با استفاده از سیستم نرم افزاری کاسا (CASA) ارزیابی کردیم. گروه های مورد بررسی در پژوهش حاضر شامل: گروه شم بدون آنتی بیوتیک و نانو ذرات نقره، گروه آنتی بیوتیک از 8 گروه باقی مانده یک گروه به عنوان گروه آنتی بیوتیک و 7 گروه دیگر به عنوان گروه های نانو نقره در نظر گرفته شد. به گروه آنتی بیوتیک با دریافت پنی سیلین و استرپتومایسین از هر کدام به میزان 1 میلی گرم بر میلی لیتر و گروه های نانونقره که به ترتیب نانو نقره را با غلظت های 0.005، 0.01، 0.03، 07.05، 0.0، 0.09، 0.11 میلی لیتر محلول نانونقره دریافت کردند.یافته ها: میزان زنده مانی، تحرک و حرکت پیش رونده اسپرم ها در تیمارهای مختلف در P<0.005 تفاوتی نداشت در حالی که گروه تیمار 0.11 میلی لیتر محلول نانو نقره پس از 1 ساعت و 3 ساعت به ترتیب در P<0.005 و P<0.001 تفاوت معنی داری را نشان داد. همچنین در بررسی ما بر روی میکروارگانیسم های موجود در مایع منی مشخص گردید که اثرات نانو نقره مشابه آنتی بیوتیک هایی همانند پنی سیلین و استرپتومایسین می باشد. همچنین نشان داده شد نمونه شم دارای باکتری گرم مثبت می باشد. تیمارهای آنتی بیوتیک و غلظت های 0.005 و 0.01 میلی لیتر نانو نقره دارای مقدار کمی باکتری بود و تیمارهای حاوی نانو نقره با غلظت های بیشتر تقریبا عاری از هر گونه میکروارگانیسم بود.نتیجه گیری: بر اساس یافته های این مطالعه دوز 0.05 mL نانو نقره قطر 20 نانومتر در ضمن دارا بودن خواص ضدمیکروبی در حد مطلوب، آسیبی از نظر زنده مانی و حرکت پیش رونده که دو شاخص مهم باروری هستند به اسپرم ها وارد نمی سازد و می تواند جایگزین مناسبی برای آنتی بیوتیک ها در رقیق کننده های اسپرم باشد.

سابقه و هدف: سرطان سینه شایع ترین سرطان در بین زنان می باشد. داروی پاکلی تاکسل یک عامل ضد سرطان است که در درمان این بیماری کاربرد دارد. استفاده از پاکلی تاکسل عوارضی را در بر دارد. به همین دلیل با هدف کاهش عوارض جانبی و بهبود کارایی دارو از فناوری دارورسانی نانولیپوزومی استفاده شد.مواد و روش ها: برای تهیه پاکلی تاکسل نانولیپوزومه نسبت های مشخصی از فسفاتیدیل کولین، کلسترول و پاکلی تاکسل با یکدیگر ترکیب شدند. قطر پاکلی تاکسل نانولیپوزومه شده با استفاده از دستگاه زتاسایزر محاسبه شد. الگوی آزاد سازی دارو از نانولیپوزوم ها با روش دیالیز بررسی شد و در نهایت اثر سایتوتوکسیسیتی داروی نانولیپوزومه شده با استفاده از روش MTT بررسی گردید.یافته ها: با استفاده از دستگاه زتاسایزر میانگین قطر پاکلی تاکسل نانولیپوزومه شده 421.4 نانومتر به دست آمد. بازده انکپسولاسیون پاکلی تاکسل نانولیپوزومه %91.3 بدست آمد. با استفاده از روش دیالیز میزان رهایش دارو طی 28 ساعت در فرمولاسیون پاکلی تاکسل نانولیپوزومه بررسی شد که برابر با %5.53 بود.نتیجه گیری: این بررسی نشان داد که اثر سایتوتوکسیسیتی پاکلی تاکسل نانولیپوزومه نسبت به فرم استاندارد آن بیشتر است.

سابقه و هدف تحقیق: قارچ دارویی Trametes gibbosa خانواده پلی پوراسه و راسته پلی پور دارای کاربردهای دارویی فراوانی در سرتاسر دنیا می باشد. هدف از انجام این تحقیق بررسی و مقایسه میزان فعالیت آنتی اکسیدانی این قارچ به دو روش مهار رادیکال آزاد و قدرت احیا و تعیین میزان فنل و فلاونوئید آن است.مواد و روش ها: پس از تهیه عصاره متانولی ویژگی های آنتی اکسیدانی آن توسط دو روش آنتی اکسیدانی از قبیل فعالیت مهار رادیکال DPPH و همچنین ظرفیت احیا کنندگی (RP) سنجش شد BHT و BHA به عنوان آنتی اکسیدان های مصنوعی در مقایسه با عصاره متانولی قارچ T. gibbosa در غلظت های مشابه فراهم شدند. هشت غلظت از عصاره متانولی تهیه شد (1000-12.5 میکروگرم بر میلی لیتر). همچنین میزان فنل و فلاونوئید در حلال متانولی مورد سنجش قرار گرفت.یافته ها: نتایج نشان داد که فعالیت آنتی اکسیدانی وابسته به غلظت عصاره بود. بالاترین میزان جاروب کنندگی رادیکال آزاد را غلظت (%19.61) 750 mg mL-1 و پایین ترین فعالیت در غلظت (%4.18) 12.5 mg mL-1 مشاهده شد. بالاترین ظرفیت قدرت احیا در غلظت (0.328) 1000 mgmL-1 و پایین ترین ظرفیت قدرت احیا را غلظت (0.129) 12.5 mg mL-1 داشت. میزان فنل کل 1.30±0.03 میلی گرم گالیک اسید معادل وزن تر و میزان فلاونوئید کل برابر با 1.55±0.26 میلی گرم کوئرستین معادل وزن تر حاصل شد.نتیجه گیری: نتایج نشان دادند که در غلظت های بالاتر، فعالیت آنتی اکسیدانی بالاتر عصاره و در غلظت های پایین تر، فعالیت آنتی اکسیدانی کمتر عصاره حاصل شد. در هر دو روش اتخاذ شده برای سنجش ظرفیت آنتی اکسیدانی نتایج نشان داد که فعالیت آنتی اکسیدانی شدیدا به غلظت عصاره وابسته بود. بطور کلی نتایج نشان داد که عصاره متانولی نمونه، فعالیت آنتی اکسیدانی قابل ملاحظه ای نداشت.

سابقه و هدف: پراکسیدازها یکی از آنزیم های مهم هستند که در بسیاری از فرایندهای فیزیولوژیکی گیاهان شرکت می کنند. پراکسیدازها پروتئین های آهن داری هستند که با استفاده از پراکسید هیدروژن بسیاری از سوبستراهای آلی و غیر آلی را اکسید می کنند. در این تحقیق فعالیت پراکسیداز در عصاره های استخراج شده از بنه های زعفران مزروعی در غلظت های مختلف پراکسید هیدروژن و pH های مختلف بررسی شد.مواد و روش ها: پیازهای ریزومی (بنه ها) زعفران مزروعی (Crocus sativus .L) در ماه های تیر و آبان به ترتیب به عنوان نمونه های خواب و بیداری جمع آوری شدند. بنه ها به عنوان منبع عصاره آنزیمی مورد استفاده قرار گرفتند. این عصاره برای مطالعات بیشتر استفاده شد.یافته ها: نتایج نشان داد که pH بهینه فعالیت آنزیم در دوره خواب یک واحد بیشتر از دوره بیداری است. نتایج پیشنهاد می کند که افزایش غلظت H2O2 تا 80 میلی مولار باعث افزایش فعالیت آنزیم می شود و در غلظت های بالاتر H2O2 فعالیت پراکسیدازی کاهش می یابد.نتیجه گیری: با توجه به نتایج سینتیکی به نظر می رسد که حداقل دو ایزوفرم از پراکسیداز در بنه های زعفران وجود دارد و از این رو می تواند در پروسه های مختلف رشد و نمو شرکت نماید.