تازه های بیوتکنولوژی سلولی مولکولی
سال:1398 | دوره:9 | شماره:35 |تعداد مقالات:8

رپلیزوم یوکاریوت ها یک کمپلکس چند جزئی بوده که همانندسازی DNA را با سرعت حدود Kb 2-3 در دقیقه انجام می دهد. این مسئله نشان می دهد که ساختار کروماتین به میزان 15-10 نوکلئوزوم در دقیقه و در جلوی هر رپلیزوم فعال متلاشی می شود. برای تشکیل یک الگوی کروماتینی مشابه بر روی DNA های تازه شکل گرفته، هیستون ها و یک سری از فاکتورهای متصل شونده به کروماتین، از روی رشته مادری به روی رشته های دختری انتقال داده می شوند. به علاوه، هیستون های جدید نیز برای ایجاد و حفظ تراکم نوکلئوزومی موردنظر تجمع یافته و اصلاحات هیستون های جدید نیز بر مبنای الگو گرفتن از هیستون های مادری و قدیمی انجام می گیرد. به طور کلی بررسی اینترکشن های میان اجزای رپلیزوم با پروتئین-های کروماتین، به درک صحیح نحوه پیشرفت چنگال همانندسازی و ارتباط آن با کروماتین کمک می نماید. در این مطالعه به بررسی مکانیسم های تنظیمی در همانندسازی کروماتین و فرآیند حفظ اپی نوم پرداخته می شود.

سابقه و هدف: کلبسیلاپنومونیه از عوامل شایع عفونت های ناشی از آنزیم های بتالاکتامازی در بیمارستان ها است. هدف از این مطالعه تعیین میزان فراوانی ژن های مولد مقاومت آنتی بیوتیکی TEM و IMP-1در سویه های کلبسیلاپنومونیه است. مواد و روش ها: 94 نمونه کلبسیلاپنومونیه جهت تأیید فنوتیپی ESBLs مورد استفاده قرار گرفتند. میزان مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه ها مشخص و میزان شیوع ژن های TEM و IMP-1با روش واکنش PCR تعیین شدند. یافته ها: 6/77% جدایه ها دارای فنوتیپ ESBL و 3/22% نمونه ها فاقد فنوتیپ ESBL بودند. نتایج نشان داد که 1/4% نمونه ها دارای ژن IMP-1 و 8/43% نمونه ها دارای ژن TEM هستند. 8/43% نمونه ها نیز به طور مشترک واجد هر دو ژن TEM و IMP-1 بودند. نتیجه گیری: با توجه به این که ژن های TEMو IMP-1 به طور مشترک در تعداد زیادی از نمونه های مقاوم وجود داشتند، استفاده از راه کارهای درمانی مناسب، تجویز درست و منطقی آنتی بیوتیک ها توسط پزشکان در این زمینه پیشنهاد می گردد.

سابقه و هدف: قارچ لنتینولا ادودز (شی تاکه)، به دلیل وجود متابولیت های ثانویه معجزه آسای مؤثر در درمان سرطان اهمیت دارویی به سزایی دارد. در این مقاله تلاش می شود تا با انتخاب محیط مناسب جهت رشد بهینه و شناسایی و بررسی عوامل تأثیر گذار بر تولید متابولیت های ثانویه، تولید ترکیب های آنتی اکسیدان بهینه سازی گردد. مواد و روش ها: ابتدا بانک سلول های قارچی در محیط جامد تهیه شد و سپس نمونه ها به محیط مایع انتقال داده شد. عصاره الکلی از نمونه ها تهیه شد. جهت بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی از دو روش 2و2 دی فنیل 1-پیکریل هیدرازیل (DPPH) به منظور بررسی قابلیت حذف رادیکال های آزاد و قدرت احیاءکنندگی فریک (FRAP) به منظور بررسی قابلیت احیای یون فریک استفاده شد. جهت اندازه گیری میزان پلی ساکارید و فنل نیز به ترتیب از روش های فنول-سولفوریک اسید و Folin-Ciocalteu استفاده شد. میزان سمیت سلولی عصاره نیز با تست MTT سنجیده شد. یافته ها: بهینه سازی خاصیت آنتی اکسیدانی قارچ شی تاکه با ارائه محیط غنی شده حاوی عصاره چوب بلوط انجام شد و میزان بازدارندگی رادیکال DPPH آن 24/5 برابر و میزان قدرت احیای یون فریک آن 9/1 برابر افزایش یافت. هم چنین سمیت سلولی بسیار مناسب (IC50 برابر 8 میکروگرم بر میلی لیتر) را بر روی رده سلولی MCF-7 نشان داد. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که عصاره چوب بلوط دارای خاصیت تحریک کنندگی بر تولید مواد آنتی اکسیدان در قارچ شی تاکه است. پس می-تواند به عنوان محرک مناسبی برای افزایش میزان آنتی اکسیدان ها درسلول های قارچ شی تاکه در محیط های کشت به کار رود.

سابقه و هدف: آلوپسیا آره آتا (AA) یک بیماری چند عاملی است که با ریزش موی سر به خصوص در ناحیه سر شناسایی می شود که 5 میلیون نفر را تحت تأثیر خود قرار داده است. نواحی خاصی ازHLA ها شناسایی شده که با پاتوژنز بیماری آلوپسیا آره آتا در ارتباط است. در این تحقیق اثر فراوانی آلل HLA-DQB2 در بروز بیماری آلوپسیا آره آتا در جامعه بیمار و کنترل بررسی شده است. مواد و روش ها: این مطالعه شامل 30 بیمار AA (13 زن و17 مرد، میانگین سنی 3/26) و 15 نفر کنترل سالم (5 زن و 10 مرد با میانگین سنی 30) است DNA از نمونه های خون با استفاده از روش DNG plus استخراج شد و با روش PCR-SSP تشخیص HLA(HLA-DQB2) انجام شد. علاوه بر این ارتباط بین این آلل HLA با فاکتورهای دموگرافیک بررسی شد. یافته ها: فرکانس آلل HLA-DQB2 در مقایسه با افراد کنترل (7/26 %) در بیماران به طور چشم گیری بالاتر بوده است. از بین فاکتورهای دموگرافیک، فقط در معرض آفتاب بودن با وجود آللHLA-DQB2 ارتباط معنی داری نشان داده است. هم چنین هیچ ارتباط معنی داری بین ترس، استرس، سابقه خانوادگی در بیمارانی با بیماری AA با وجود این آلل یافت نشده است. بحث: داده های ما هیچ ارتباطی بین آلل HLA-DQB و وقوع بیماری آلوپسیا آره آتا نشان نمی دهند، گرچه میزان وجود آن در بیمارانAA به طرز چشم گیری نسبت به افراد سالم بیش تر است.

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس عامل عفونت های مختلفی در انسان است. عفونت باکتریایی دهانه رحم می تواند در تغییر پارامترهای اسپرماتوزوا نقش داشته باشد و ممکن است منجر به ناباروری در زنان شود. هدف این تحقیق بررسی حضور سوپر آنتی­ ژن های استافیلوکوکوس اورئوس در زنان نابارور با علت ناشناخته بود. مواد و روش ­ ها: صد نمونه واژینال از زنان نابارور بدون علت مشخص جمع آوری شد. نمونه های مثبت استافیلوکوکوس اورئوس با حداقل سه مقاومت آنتی بیوتیکی، به­ وسیله PCR بررسی شدند. جهت بررسی تأثیر عفونت بر ناباروری، پس از انکوباسیون نمونه های تازه اسپرم با سویه­ های دارای یکی از ژن­ های seg, sei و یا Tsst-1، پارامترهای اسپرم اندازه گیری شد. یافته­ ها: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس از 52 نمونه جدا شد. پس از انجام تست آنتی بیوگرام، 19 نمونه استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به سه یا بیش­ تر آنتی بیوتیک، شناسایی شدند. فراوانی ژن­ های Tsst-1، sei و seg به ترتیب 3/26%، 1/21% و 5/10% بود. در 11 سویه (9/57%)، ژن­ های seg, sei و یا Tsst-1 حضور داشتند. هم­ چنین در 5/10٪ نمونه­ ها، هر دو ژن sei و seg وجود داشت. یک سویه (3/5%) دارای هر سه ژن seg, sei و Tsst-1، توانایی اگلوتیناسیون 50٪ اسپرم های تازه را بدون تغییر قابل ملاحظه ای در حرکت و قابلیت زنده ماندن داشت. نتیجه­ گیری: نتایج نشان داد استافیلوکوکوس اورئوس عامل عفونت واژ ینال می تواند سبب آسیب به مورفولوژی و تحرک اسپرم شود. در نتیجه، درمان واژینوز باکتریال جهت پیشگیری از ناباروری ها با علل ناشناخته در زوجین نابارور می­ تواند نقش مؤثری ایفا نماید.

سابقه و هدف: مشخصه التهاب در کبد تهاجم سلول های التهابی است. این سلول ها با ترشح سایتوکین ها التهابی مثل اینترلوکین-6 و فاکتور توموری نکروز آلفا باعث پیش روی بیماری و آسیب بیش تر کبد می شوند. در این مطالعه اثر ضدالتهابی عصاره زنجبیل و آب لیموترش بر فاکتور التهابی IL-6 در شرایط سمیت کبدی القا شده توسط تیواستامید در موش های صحرایی مورد برسی قرار گرفت. مواد و روش ها: به منظور انجام آزمایش از 55 موش آزمایشگاهی هم سن با وزن تقریبی 250-200 گرم تهیه شده از دانشگاه اصفهان استفاده شد. نمونه ها به طور تصادفی به 9 گروه تیمار، یک گروه کنترل و یک گروه شاهد تیواستامید (کنترل مثبت) (هر گروه با 5 موش) تقسیم شدند. پس از تیمار هر گروه با دوزهای مختلف عصاره زنجبیل و آب لیمو خون گیری از قلب تحت شرایط بی هوشی انجام شد و به منظور اندازه گیری فاکتور التهابی IL-6 از تست الایزا استفاده شد. در نهایت مقایسه آماری میانگین مقادیر سرمی IL-6 در گروه های مختلف با استفاده از نرم افزار SPSS V. 20و آزمون های آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) انجام شد. یافته ها: نتایج مطالعه حاضر نشان داد، مصرف عصاره زنجبیل و آب لیمو ترش موجب کاهش معنی دار سطح سرمی IL-6 شده است. در خصوص IL-6 سطح سرمی قبل از تیمار و بعد از تیمار با تیواستامید بیش ترین میزان کاهش در گروه های تیمار ترکیبی، زنجبیل 500 میلی گرم بر کیلوگرم و آب لیمو 100 درصد بود. کاهش سرمی IL-6در گروه های مورد مطالعه وابسته به دوز بود (P<0. 001). بحث: تیواستامید باعث مسمومیت و در نهایت التهاب کبد می شود. عصاره زنجبیل وآب لیمو بخاطر داشتن جینجرول و فلاونوئیدها که خاصیت ضدالتهابی دارند به صورت ترکیبی می تواند پارامترهای کبدی را در التهاب کبدی بهبود بخشد. نتیجه گیری: عصاره زنجبیل و آب لیمو ترش خاصیت ضدالتهابی دارند و به صورت ترکیبی می تواند پارامترهای کبدی را در التهاب کبدی بهبود بخشد و با کاهش سطح سرمیIL-6 باعث کاهش التهابات می شوند.

سابقه و هدف: هدف از این تحقیق بررسی تئوری تأثیر پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدیrs141831067 ژن دی هیدروفولات ردوکتاز بر پاسخ درمانی افراد مبتلا به سرطان پروستات به داروی متوترکسات و مطالعه فراوانی این پلی مورفیسم در جمعیت ایرانی است. مواد و روش ها: در این پژوهش خون محیطی از 50 فرد سالم و 50 فرد مبتلا به سرطان پروستات گرفته شد. سپس DNA ژنومی استخراج و جداسازی شد. برای بررسی وجود پلی مورفیسم موردنظر در افراد مورد مطالعه، از تکنیک ARMS-PCR استفاده شد. در نهایت بررسی آماری نتایج به دست آمده به واسطه بررسی فراوانی آللی، درجه هتروزیگوتی، آنالیز فاکتور PIC و بررسی تعادل هاردی واینبرگ صورت پذیرفت. یافته ها: مقایسه فراوانی آلی برای پلی مورفیسم rs141831067 در دو گروه سالم و بیمار نشان داد که فراوانی آللی این مارکر در گروه بیمار به صورت معناداری بیش تر از گروه سالم است (002/0P-Value=). به علاوه آنالیزهای بیوانفورماتیکی برهم کنش آنزیم دی هیدروفولات ردوکتاز و داروی متوترکسات نشان داد که پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدیrs141831067 ژن دی هیدروفولات ردوکتاز در برهم کنش با دارو تغییر ایجاد می کند و موجب خروج نسبی متوترکسات از جایگاه فعال دی هیدروفولات ردوکتاز می شود. نتیجه گیری: چند شکلی تک نوکلئوتیدی rs141831067 موجود در ژن دی هیدروفولات ردوکتاز در احتمال بروز سرطان پروستات نقش مهمی دارد و این چند شکلی تک نوکلئوتیدی می تواند باعث بروز مقاومت دارویی به متوترکسات در سرطان پروستات گردد.

سابقه و هدف: آرتریت باکتریایی یکی از انواع آرتریت های شناخته شده است که به سرعت باعث تخریب مفاصل می شود. از بین باکتری های مولد آرتریت عفونی، مایکوباکتریوم تربرکلوزیس (MTB) یکی از باکتری هایی است که می تواند به طور نادر ایجاد کننده این عارضه باشد. هدف از این مطالعه بررسی وجود مایکوباکتریوم تربرکلوزیس در مایع مفصلی بیماران مبتلا به آرتریت از طریق روش PCR است. مواد و روش ها: این مطالعه بر روی مایع مفصلی 70 بیمار مراجعه کننده به بیمارستان شریعتی تهران که دچار آرتریت بوده اند صورت گرفت. DNA از مایع مفصلی این 70 بیمار با روش فنل کلروفرم استخراج شد. پرایمر، برای ژن هدف IS6110 انتخاب و بعد از تأیید حساسیت و اختصاصیت، تست PCR بهینه بر روی نمونه ها انجام و مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته ها: تست PCR بهینه و آمپلیکون bp 317 به وسیله آگاروزژل الکتروفورز %5/1 مشاهده گردید. حد تشخیص تست 100 و با ویژگی صد درصد ارزیابی گردید. DNA مایکوباکتریوم توبر کلوزیس در 4 نمونه مایع مفصلی بیماران مبتلا به آرتریت (%7/5) دیده شد. نتیجه گیری: اولین قدم در درمان بیماری، تشخیص درست و سریع آن است. مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مشخصه هایی از قبیل رشد کند دارد که شناسایی این باکتری را از طریق کشت و تست های بیوشیمیایی مشکل و طاقت فرسا می کند. نتایج این مطالعه مؤید آرتریت های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس موجود است که تشخیص سریع و به موقع آن ها از طریق PCR امکان درمان صحیح آن ها را مهیا می نماید.