تازه های بیوتکنولوژی سلولی مولکولی
سال:1397 | دوره:8 | شماره:30 |تعداد مقالات:14

سابقه و هدف: امروزه وجود بتالاکتامازهای وسیع الطیف در باکتری های جدا شده از بیماران بستری که مقاومت چند گانه دارویی را بیان می کنند، یک واقعیت و معضل مهم بهداشتی در اکثر کشورها محسوب می گردد. روش کار: تعداد 346 سویه انترو باکتریاسه از نمونه های مختلف درکهورستان جداسازی شد. برای تعین مقاومت نمونه ها، تست آنتی بیو گرام انجام شد. در نهایت ایزوله های ESBL مثبت، توسط روشPCR از نظر ژن های TEM، CTX-M، SHV مورد بررسی قرار گرفتند. نتیجه: از 346 ایزوله مورد بررسی، 162 ایزوله کلبسیلا و132 ایزوله اشریشیا کلی به آنتی بیوتیک های سفتازیدیم یا سفوتاکسیم و یا هر دو آن ها مقاوم بودند. همچنین 82 (26/42%) ایزوله مولد ESBLبودند. بحث: با توجه به درصد بالای مقاومت به سفالوسپورین های نسل سوم انجام دقیق آزمایش های آنتی بیوگرام قبل از تجویز آنتی بیوتیک در عفونت های ناشی از ارگانیسم های تولید کننده ESBL ضرورت دارد.

سابقه و هدف: نیوزوم ها به دلیل نیمه عمر بالا در پلاسمای خون امکان رسانش مؤثر عوامل شیمی درمانی به بافت توموری را ایجاد می کنند و بازده درمانی داروی شیمی درمانی را افزایش می دهند. در این مطالعه نانو نیوزوم حاوی دوکسوربیسین سنتز شدند. دوز بهینه دارو تعیین شد و اثر ضد سرطانی نانو ذره حاصل مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش ها: نیوزوم های حاوی کلسترول و اسپن 60 با نسبت مولی 85: 15 با روش آب پوشانی لایه نازک تهیه گردیدند. در مرحله آب پوشانی به-منظور تعیین غلظت بهینه دارو، غلظت های مختلف داروی دوکسوربیسین رقیق شده با آب مقطر به کار گرفته شد. هم چنین در پایان سمیت سلولی با تست MTT سنجیده شد. یافته ها: نتایج حاکی است دوز بهینه دارو mg/ml 5/0 است. درصد محصور سازی فرمولاسیون بهینه، سایز و شاخص پراکندگی به ترتیب 69/81، 9/102 و 128/0 می باشد. طی 144 ساعت، میزان رهاسازی دارو 35 درصد بوده است. سامانه تهیه شده می تواند عوارض جانبی دوکسوربیسین را کم کند و در مقابل سلول های سرطانی مؤثر واقع شود. بحث: این مطالعه نشان داد که دوز دارو در مقدار بهینه، نقش مهمی در بهبود درصد درون گیری دارو دارد که از نظر اقتصادی بهینه است هم چنین باعث می شود در مصرف بالینی، دوز کم تری دارو با بیش ترین اثر درمانی وارد بدن بیمار می شود. کاهش دوز مصرفی دارو هم چنین سبب می شود سلول های سالم کم تر مورد آسیب قرار گیرند. آهسته رهش بودن سامانه دلیل اصلی افزایش سمیت داروی شیمی درمانی است. نتیجه گیری: سامانه نیوزومی تهیه شده سامانه ای آهسته رهش با سایز بسیار کم تر از 150 نانومتر و درصد بالای محصورسازی دارو می باشد که می تواند جهت غلبه بر عوارض جانبی داروی دوکسوربیسین آزاد استفاده شود. سامانه حاصل در مقابل سلول های سرطان مغز استخوان موثر است.

سابقه و هدف: بتالاکتاماز CTX-M به عنوان یک مکانیسم مقاومت درمقابل بتالاکتام ها درپاتوژن های گرم منفی شناخته شده است. هدف تعیین ژنCTX-Mدرکلبسیلاپنومونیه مولدESBL درمناطق مختلفشهر تهران به روش مولکولیPCR می باشد. مواد و روش ها: 176 ایزوله کلبسیلا پنومونیه جداسازی و تعیین هویت شدند. مقاومت باکتری ها نسبت به دیسک های آنتی بیوتیکی تعیین شد. سپس در سویه های مولد ESBL، وجود ژن CTX-M با روش مولکولی PCR بررسی شد. یافته ها: در تست فنوتیپی تاییدی 81/56 % ایزوله ها ESBL بودند و فراوانی ژن CTX-M برابر 28 % بود. بیشترین میزان مقاومت، مربوط به آنتی بیوتیک آمپی سیلین(89/24%) وکمترین مقاومت مربوط بهآنتیبیوتیک ایمی پنم(06/6%) بود. بحث: ژن های بتالاکتاماز CTX-M شیوع بالایی در ایزوله های مولد ESBLدارد; لذا اعمال ابزارهای مناسب کنترل عفونت و راهکارهای مناسب درمانی در بخش های مختلف بیمارستان های مورد مطالعه برای جلوگیری از انتشار آن ها ضروری است.

سابقه و هدف: مشگک از خانواده چتریان است که در طب سنتی برای درمان سردرد و کمردرد استفاده می شود. این تحقیق به منظور انتخاب بهترین پیش تیمار برای شکستن خواب بذر و آغاز جوانه زنی و رشد گیاهچه مشگک انجام شد مواد و روش ها: آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 6 تیمار و 4 تکرار در سال 1395 در دانشگاه کاشان اجرا گردید. تیمارها شامل نیترات پتاسیم 1/0 و2/0 درصد مدت 72 ساعت، اسید سولفوریک 98 درصد به مدت 5 دقیقه، سرمادهی به مدت 35 روز در دمای 5+ درجه سانتی گراد، خیساندن در آب مقطر و شاهد بودند. یافته ها: نتایج نشان داد که اثر تیمارهای مختلف بر درصد جوانه زنی، سرعت جوانه زنی، طول ریشه چه و ساقه چه و وزن تر و خشک، در سطح احتمال یک درصد معنی دار است. تیمار خراش دهی بوسیله اسید سولفوریک به طور کامل مانع جوانه زنی شد. بحث: بیش ترین درصد جوانه زنی در محلول نیترات پتاسیم مشاهده شد. بنابراین نیترات پتاسیم در پاسخ به فرایندهای متابولیکی بذور مفید است نتیجه گیری: با توجه به این که مهم ترین دلیل کاهش پراکنش این گیاه طول دوره خواب بذر می باشد، لذا استفاده از نتایج این تحقیق به جوانه زنی این گیاه دارویی کمک خواهد نمود.

سابقه و هدف: شایع ترین عارضه در سه ماهه اول و دوم حاملگی سقط جنین است. هدف ازاین تحقیق بررسی ارتباط میان پلی مورفیسم، XPO5 rs11077 & DROSHA rs10719 ماشین آلات ساختmiRNA در زنان مبتلا به سقط مکرر خودبخودی می باشد. تا در صورت اثبات ارتباط، از آن به عنوان نشانگر تشخیصی در خانم هایی که دارای سقط مکرر می باشند، استفاده شود. مواد و روش ها: در این مطالعه، از نمونه خون 50 زن مبتلا به سقط مکرر خودبخودی و همچنین 24 زن بدون سابقه سقط و دارای حداقل دو باروری موفق که به آزمایشگاه مسعود تهران مراجعه کرده بودند، استفاده شد. DNA با استفاده از کیت مخصوص از نمونه های خون محیطی دارای EDTA استخراج شد. پلی مورفیسم 2 ژن XPO5 rs11077 و DROSHA rs10719 با روشTetra-ARMS PCR بررسی و به وسیله ی الکتروفورز ژل آگارز مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. یافته ها: فراوانی های ژنوتیپی و آللی پلی مورفیسم rs11077(A/C) از ژن XPO5 هیچ رابطه معنی داری را بین دو گروه بیمار و کنترل نشان نداد. در مقابل فراوانی ژنوتیپی و آللی در پلی مورفیسمrs10719(T/C) از ژن DROSHA رابطه معنی داری را بین بیماران و نمونه های کنترل نشان دادند و ژنوتیپ TT به طور معنی داری در گروه بیمار بالاتر از گروه کنترل بود. بحث: بررسی های ما پیشنهاد می کند که پلی مورفیسم rs10719(T/C) از ژن DROSHA ممکن است با استعداد ابتلا با RPL در جمعیت ایرانی مرتبط باشد و آلل T ممکن است در افزایش بروز بیماری نقش داشته باشد. نتیجه گیری: می توان گفت بررسی پلی مورفیسم های دستگاه ساخت میکروRNA به تنهایی ثابت کرد در ژن DROSHA rs10719 ارتباطی با سقط وجود دارد که نیاز به بررسی همزمان با ژن های دیگر دخیل در سقط را نیز دارد تا نتایج این تحقیق به صورت کاملا کاربردی در تشخیص علل ژنتیکی مورد استفاده قرار گیرد

سابقه و هدف: سیر (garlic) با نام علمی allium sativum یکی از بیشترین تحقیقات گیاهی-دارویی را تاکنون به خود اختصاص داده است، که دارای اثرات ضد میکروبی فراوانی می باشد. هدف ازانجام این مطالعه، بررسی اثرغلظت های مختلف عصاره سیر بر روی سه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، استرپتوکوکوس پنومونیه و شیگلادیسانتریه و مقایسه آن با آنتی بیوتیک ها در شرایط آزمایشگاهی می باشد. مواد وروشها: در این مطالعه، عصاره ی سیر تهیه گردید و برای تعیین حداقل غلظت ممانعت کنندگی (MIC) این عصاره ها از روش استاندارد لوله ای (standard tube test) استفاده شد، همچنین برای مقایسه با آنتی بیوتیک ها، از روش دیسک دیفیوژن استفاده گردید. آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 3 تکرار و مقایسه میانگین ها با روش توکی انجام شد. یافته ها: MIC عصاره ی سیر با غلظت های مختلف بر حسب mg/dl بر روی سه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، استرپتوکوکوس پنومونیه و شیگلادیسانتریه به ترتیب، در عصاره خالص: 15، 23، mm25 و غلظت mg/dl: 12، 20، mm22 و غلظت mg/dl: 10، 16، mm18 و غلظت mg/dl: 0، 13، mm 15 و غلظت های برای هر سه باکتری صفر می باشد. بحث: بر اساس نتایج حاصل از این مطالعه در شرایط آزمایشگاهی اثرات ضد باکتریایی عصاره سیر بر روی سه باکتری مذکور اثر بازدارندگی داشت. نتیجه گیری: یافته ها در این تحقیق نشان داد اثر مهاری عصاره سیر بر روی باکتری های مذکور، در شرایط آزمایشگاه، تقریباً به خوبی اثر مهاری آنتی بیوتیک های تست شده می باشد.

سابقه و هدف: مطالعه حاضر به منظور آگاهی از روند تکاملی و مولکولی توالی نوکلئوتیدی جایگاه ژن بتالاکتوگلوبولین در پستانداران، آنالیز فیلوژنی و روند انتخاب طبیعی انجام گرفت. مواد و روش ها: توالی نوکلئوتیدی جایگاه ژن بتالاکتوگلوبولین در گونه های مورد مطالعه از بانک اطلاعاتی ژنوم (NCBI) به دست آمده و هم تراز شدند. درصد جانشینی و جایگزینی نوکلئوتیدها با روش حداکثر درست نمایی و همچنین ترسیم درخت فیلوژنتیک به روش Neighbor-Joining بدست آمدند. یافته ها: نتایج نشان داد جانشینی انتقالی بیشتر از جانشینی تقاطعی است و نسبت dN/dSبرابر70/0 محاسبه شد که نشان دهنده انتخاب خالص در طی تکامل این جایگاه ژنی است. نتایج درخت فیلوژنتیک نشان دهنده مسیرهای تکاملی مختلف ژن بتالاکتوگلوبولین در گونه های مختلف شامل پنج دسته از گونه های (گاو، بوفالو وگاومیش)، (گوسفند و بز)، اسب و گراز وحشی بود که گاو، بوفالو و گوسفند بیشترین قرابت را داشتند. بحث: جهش و انتخاب در طی سالیان گذشته سبب به وجود آمدن پروتئین های جدید، واریته های جدید و سبب تثبیت عملکرد آنها در طی روند تکامل و پیشرفت در جهت خالص سازی عملکرد آنها گردیده است. نتیجه گیری: بر اساس این تحقیق، نواحی حفاظت شده بخش اندکی از توالی ژن بتالاکتوگلوبولین را تشکیل می دهد که این امر نشان دهنده چندشکلی بالای این ژن و همچنین مستعد بودن آن به تغییرات نوکلئوتیدی و جهش می باشد.

سابقه و هدف: به دلیل شیوع نسبتاً بالای بیماری های ناشی از حضور فلز سرب در خاک های آلوده به نفت مراکز صنعتی، سپس انتقال این فلز به گیاهان و جانوران و در نهایت به انسان و خطرات بالایی برای سلامتی انسان و سایر موجودات زنده، چنین به نظر می رسد که شناسایی و جداسازی میکروارگانیسم های با مقاومت بالای فلزی و در نهایت حذف زیستی می تواند گام مهمی در روند تکاملی سیستم های پاکسازی خاک های آلوده به سرب مراکز صنعتی محسوب گردد. مواد و روش ها: نمونه گیری از 3 ناحیه از خاک آلوده به نفت منطقه سی برنج مسجدسلیمان انجام شد. برای جداسازی باکتری های مقاوم به سرب از روش رقت در آگار و محیط کشت Ι Ι PHG حاوی غلظت های 5/0، 1، 2، 5/2، 3، 5/3، 4 میلی مول بر لیتر سرب استفاده شد. برای شناسایی باکتری های جذب کننده سرب ابتدا از تست های بیوشیمیایی و سپس روش مولکولی کلنی-PCR استفاده گردید. یافته ها: در این مطالعه 5 ایزوله باکتریایی مقاوم به سرب جداسازی و شناسایی شد، که در بین آن ها باکتری Proteus mirablis strain AOUC-001 بالاترین میزان مقاومت به سرب (4MIC= ) را نشان داد. بحث و نتیجه گیری: با توجه به این که باکتری های مورد بررسی در این پژوهش قادر به جذب سرب در شرایط آزمایشگاهی بودند و رشد نسبتا مناسبی را در حضور این فلز از خود نشان دادند، بنابراین به نظر می رسد گزینه مناسبی برای حذف زیستی سرب از خاک های آلوده به نفت در آینده باشند. به شرطی که این خاک ها ی آلوده جهت جداسازی این باکتری ها با فیلتره کردن تیمار شوند.

سابقه و هدف: عفونت های دستگاه ادراری (UTI) از شایع ترین عفونت های باکتریایی در سنین کودکی، بزرگسالان و زنان محسوب می شوند. بنابراین لازم است بلافاصله بعد از تشخیص عفونت ادراری، نسبت به درمان مناسب اقدام گردد. در مطالعه حاضر به منظور تعیین مقاومت دارویی ایزوله های استرپتوکوکوس های گروه B جدا شده از ادرار انجام گرفته است. مواد و روش ها: این مطالعه توصیفی و مقطعی بر روی 3676 بیمار مراجعه کننده به آزمایشگاه مرجع شهرستان سلماس در طی سال 1394 انجام گرفته است. که از این تعداد 2754 نفر زن 922 نفر مرد بودند. نمونه های ادراری میانی گرفته شده از بیماران پس از انتقال به محیط Todd Hewith در محیط کشت های بلاد آگار کشت داده شدند. الگوی حساسیت و مقاومت دارویی سویه های استرپتوکوکوس با استفاده از روش انتشار دیسک روی محیط مولر هینتون آگار بر اساس دستورالعمل های استاندارد CLSI انجام گردید. یافته ها: از مجموع 3678 نمونه، 47 مورد مثبت (36 زن و 11 مرد) شدند. استرپتوکوکوس های گروه B در برابر کلیندامایسین و اوکسازالین بیشترین درصد و بقیه به ترتیب جنتامایسین، تتراسایکلین، سفتی زوکسیم، آمیکاسین، سفالکسین، تری متوپریم، آمپی سیلین، سیپروفلوکساسین و در آخر سیفکسیم از خود مقاومت نشان داد. نتیجه گیری: با توجه به شیوع عفونت های دستگاه ادراری، دانش الگوی مقاومت محلی و درمان بموقع ضروری است. این مطالعه نشان داد که بیشترین فراوانی مقاومت دارویی به استرپتوکوکوس گروه Bاختصاص دارد. این مسئله نیازمند توجه بیشتر مسئولین بهداشتی– درمانی شهرستان سلماس است.

سابقه و هدف: به تازگی باکتری های تولیدکننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف( ESBL)که توانایی هیدرولیز اکثر آنتی بیوتیک های بتالاکتام را دارند، در سراسر جهان شیوع زیادی یافته اند و به عنوانیک مشکل اساسی در درمان عفونت های باکتریایی مطرح هستند. مواد و روش ها: در مطالعه حاضر، 100 باکتری E. coli از نمونه های بالینی جدا شد و با توجه به استانداردهای CLSI و با استفاده از روش Combined Disk، باکتری های تولید کننده آنزیم بتالاکتاماز شناسایی و سپس فراوانی ژن TEM با استفاده از روش PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: از 100نمونه E. coli جدا شده، 60 نمونه مولد آنزیم بتالاکتاماز بودند واز این تعداد، 48 نمونه)80 درصد( دارای ژن TEMبودند. نتیجه گیری: این یافته ها اهمیت ژن TEM را در هیدرولیز داروهای بتالاکتام در میان سویه های E. coli در شهرستان رباط کریم نشان می دهد. شناسایی این ژن وتعیین پراکندگی آن می تواندروند تشخیص و درمان بیماران را سرعت بخشید.

سابقه و هدف: شناسایی و تمایز جنس فوزاریم در سطح گونه، برای مقاصد اپیدیمیولوژی و پاتولوژیکی ضروری است. هدف از این مطالعه بررسی روابط فیلوژنتیکی و یافتن الگو های تکراری کلاستر شده مشخص در ناحیه ITS به منظور شناسایی گونه های متفاوت جنس فوزاریم است. مواد و روش ها: 16 جدایه از گونه های متفاوت جنس فوزاریم و از نواحی مختلف ایران جمع آوری شدند. ناحیه فاصله انداز داخلی DNA ریبوزومی توسط واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر، توالی یابی و با ابزار های مختلف مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: محصول واکنش زنجیره ای پلی مراز، قطعه های به طول به طورتقریبی 550 جفت باز در تمام جدایه ها بود. مقایسه توالی ها و فیلوگرام حاصل از تجزیه و تحلیل ناحیه ITS، گونه های جنس فوزاریم را در ده گروه مختلف قرار داد. بحث: ناحیه فاصله انداز داخلی بی ثبات و تغییرپذیر هستند. سطح بالای تنوع بین ناحیه فاصله انداز داخلی ناشی از حذف یا اضافه شدن واحدهای تکراری در ناحیه فوق است. نتیجه گیری: بعضی از جدایه ها به طور قطعی شناسایی میشوند. بعضی از آنها دارای الگوی متفاوتی هستند. وجود موتیف های خوشه شده بی همتا در ناحیه ITS یک گونه خاص نشان می دهد که این موتیف ها می توانند به عنوان یک ابزار شناسایی گونه مورد نظر به کار روند.

سابقه و هدف: عفونت های ادراری مردان فاکتور بسیار مهمی در ناباروری مردان است. از فراوان ترین و مهم ترین عامل باکتریایی تخریب-کنندهاسپرماتوژنز، باکتری E. coli می باشد. هدف این تحقیق بررسی حضور ژن های fim H، pap و afa در نمونه هایsemen آلوده به E. coli در مردان نابارور بود. مواد و روش ها: 100 نمونه semen آنالیز و کشت داده شد. با تست های بیوشیمیایی نوع پاتوژن ها شناسایی گردید. نمونه های E. coli جهت استخراج ژنوم جداسازی شدند و با PCR فراوانی ژن های fim H، pap و afa در آن ها بررسی گردید. یافته ها: از 100 نمونه semen، 53 نمونه باکتریایی شامل: 86/18 % E. coli، 33/33 % استافیلوکوک، 09/45 % استرپتوکوک و 88/5 % کلبسیلاجداسازی گردید. نمونه های آلوده به E. coli دارای تحرک و مورفولوژی اسپرم غیر نرمال بودند. حضور ژن هایH fim و pap با فراوانی بالا 100% در نمونه های E. coli مشاهده شد، اما ژن afa در هیچ یک از نمونه ها مشاهده نشد. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که نمونه های semen مردان نابارور آلوده به باکتری E. coli بود. از آنجایی که این باکتری یک پاتوژن مهم دستگاه تناسلی است، شناسایی موقعیت و شیوع ژن های بیماری زا از جمله کدکننده ادهزین ها می تواند در کنترل عفونت و راه های درمان موثر باشد. بنابراین بررسی حضور ژن های fimH و pap در نمونه های مردان نابارور آلوده با E. coli می تواند ارتباط عفونت باکتریایی با ناباروری را مطرح نماید.