پاتوبیولوژی مقایسه ای ایران
سال:1399 | دوره:17 | شماره:2 (پیاپی 69) |تعداد مقالات:7

در این مطالعه تشخیص و شناسایی آنتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس به کمک طراحی کیت حساس Dot ELISA انجام شده است. در این مطالعه از کاغذهای نیتروسلولزی با منافذ 22/0 میکرون به عنوان بستر استفاده شده است، بر روی بستر یاد شده آنتی بادی اختصاصی آنتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس با رقت500/1 کوت گردیده و سپس توکسین اختصاصی به آنتی بادی های چسبیده شده مجاورت داده شده است؛ در ادامه آنتی بادی نشان دار شده با آنزیم HRP با رقت 2000/1 اضافه گردیده، باگذشت زمان و شستشوی مجدد، سوبسترا اضافه شد؛ در این آزمایش نمونه ها به صورت دستی آلوده شده و سپس با روش ساندویچ الایزا به عنوان استاندارد طلایی مورد مقایسه قرار گرفت، این کیت قادر به تشخیص 50 نانوگرم بر میلی لیتر به بالا توکسین A بوده و چنانچه میزان توکسین کمتر از این مقدار باشد آن را به صورت منفی گزارش کرده، در این آزمایش از 40 نمونه جمع آوری شده، 4 نمونه مثبت گزارش شده، نشان می دهد که حدود 10 % نمونه های جمع آوری شده آلوده بوده است؛ امروزه با استفاده از کیت الایزا دات به عنوان روش سریع با حساسیت و ویژگی نسبی، می توان تکرارپذیری جهت تشخیص آنتروتوکسین A استافیلوکوکوس در نان های خامه ایی را بهبود بخشید.

امروزه سرطان بر اساس گزارش سازمان بهداشت جهانی در سال 2018 دومین عامل مرگ و میر درجهان می باشد. استفاده از پلی ساکارید های قارچی یکی از راه های ارزانتر، کم خطرترو با عوارض جانبی کمتر و جدیدتر در پیشگیری و درمان سرطان می باشد. هدف از این تحقیق جداسازی و شناسایی قارچ فوزاریوم بومی از خاک های کرج و استخراج پلی ساکارید گلوکان وتعیین ویژگی های شیمیایی آن باروش هایFT-IR و HPLC و نقش ضد سرطانی آن برروی سل لاین های لنفوییدی (LCL) و هلا (Hela) می باشد. دراین مطالعه نمونه قارچ فوزاریوم از خاک منطقه کرج جداسازی گردید وبه روش میکروسکوپی وماکروسکوپی و ژنتیکی درحد جنس شناسایی شد. وسپس قارچ در محیط کشت مایع انتخابی برای تولید بیشترین مقدار توده قارچی برای استخراج گلوکان کشت گردید. گلوکان قارچ به روش آب جوش مورد استخراج قرارگرفت. مقادیر مختلفی ازگلوکان استخراج شده را به کشتهای سلولی LCLوHela اضافه شد واثرات سایتوتوکسیسیته آن بررسی شد. نتایج کشت نشان داد پلی ساکارید گلوکان نقش ضد سرطانی بر روی سلول های لنفوییدی داشت اما بر روی سلول های هلا اثر ضدسرطانی نداشت. اثرات سایتوتوکسیسیته پلی ساکارید گلوکان با روش کالریمتری(MTT) نشان داده شد.

اپیدرموفایتون فلوکوزوم درماتوفیتی انسان دوست می باشد که توزیع جهانی داردوبه ساختارهای کراتینی پوست و ناخن میزبان نفوذ می نماید ودرایجاد عفونت از پروتئازهای مهمی چون سوبتیلیزین استفاده می نمایند. هدف این مطالعه، بررسی حضور ژن سوبتیلیزین 3 و 6 (SUB3-SUB6) در نمونه دریافت شده از کلکسیون قارچی دانشکده بهداشت دانشگاه علوم پزشکی تهران، به روش مولکولی وتعیین توالی محصول، با استفاده از DNA ژنومی بود. برای نیل به این هدف، بر اساس نواحی بسیار ثابت ژنهای مشابه در سایر درماتوفیتها، پرایمرهای خاصی برای دو ژن مورد نظر طراحی شد. با انجام PCR و تعیین توالی قطعات حاصل از آن به کمک ABI PRISM® 3730XL automated Sanger sequencer، حضور دو ژن جدیدسوبتیلیزین 3وسوبتیلیزین 6 در این درماتوفیت مشخص شد. دوژن موردنظر درمرکزملی اطلاعات زیست فناوری(NCBI) با شماره دسترسی MN206114, MN177931 ثبت شدند. با تعیین توالی مشخص شد که نواحی کدکننده ژن سوبتیلیزین 3 مشتمل بر 861 جفت بازمیباشد که کدکننده 287 آمینو اسید می باشدونواحی کدکننده ژن سوبتیلیزین 6 مشتمل بر699 جفت باز میباشد که کد کننده233 آمینواسیداست. مقایسه توالی ها و آمینو اسیدهای به دست آمده با توالی های موجود در بانک اطلاعات ژنی، تشابه(همولوژی) معناداری را نشان داد دستیابی به درک بهتر از خصوصیات مولکولی ژنهای بیماریزا میتواند به عنوان بستری برای توسعه روشهای درمانی و راهکارهای پیشگیری موثرواقع شود.

مطالعه کنونی با هدف ارزیابی اثرات اسانس روغنی گیاه میخک (Syzygium aromaticum L. ) بر هیستوپاتولوژی و کارکرد کبدی-کلیوی و همچنین پروفایل پروتئین و ایمنی زایی در جوجه های گوشتی طراحی و اجرا گردید. بدین منظور، تعداد 180 قطعه جوجه گوشتی نر یک روزه سویه راس 308 در قالب طرح کاملاً تصادفی با چهار تیمار، سه تکرار و 15 قطعه جوجه در هر تکرار توزیع و تا سن 42 روزگی نگهداری شدند. . تیمارها شامل: 1) تیمار شاهد (فقط جیره پایه)، 2) جیره پایه +250 ppm اسانس میخک، 3) جیره پایه +350 ppm اسانس میخک 4) جیره پایه +450 ppm اسانس میخک بودند. شاخص های ذیل مورد ارزیابی قرار گرفت: وزن نسبی بافت های کبد و کلیه، شاخص های کارکرد کبدی و کلیوی شامل فعالیت آنزیم های آسپارتات آمینوترانسفراز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز(ALT) و گاماگلوتامیلترانسفراز (GGT)، اوره و کراتیتین، پروفایل پروتئین شامل پروتئین تام، آلبومین و گلوبولین و نهایتا ایمونوگلوبولین های G، A و M. . مقاطع بافتی کلیه و کبد نیز به روش نیمه کمی مورد مطالعه قرار گرفتند. نتایج به دست آمده مشخص کرد که اسانس میخک به طور وابسته به دوز باعث افزایش مقادیر پروتئین ها و ایمونوگلوبولین ها می گردد. اما دوز بیشینه گیاه (450 ppm) باعث ایجاد تغییرات معنی دار در شاخص های هیستوپاتولوژیک و کارکرد کبدی و کلیوی گردید. بعلاوه، ضایعات بافتی کبد شدیدتر از کلیه ارزیابی شد. می توان نتیجه گرفت که اسانس میخک اثرات سودمندی بر پروفایل پروتئین و ایمنی زایی در جوجه های گوشتی دارد، اما در دوزهای زیاد باعث ایجاد ضایعات کبدی و کلیوی می گردد، بنابراین باید دوزهای بهینه و بدون عوارض جانبی این گیاه تجویز شود.

تیلریا ها از انگل های خونی مهم گاو می باشند که توسط کنه های ایکسودیده منتقل شده و در دام های بیمار باعث تظاهرات بالینی خفیف تا بسیار کشنده می شوند. هدف از این مطالعه تعیین گونه های تیلریا در شهرستان شهرضا در جنوب استان اصفهان بود. درمجموع تعداد 253 نمونه خون از طریق رگ گوش و رگ وداج گاوهای به ظاهر سالم به طور تصادفی به ترتیب برای آزمون میکروسکوپی و ملکولی اخذ شد. در ابتدا DNA استخراجی از نمونه های خونی با جفت آغازگری که قطعه حدود 400 جفت بازی از ژن 18S rRNA جنس تیلریا را تکثیر می کرد، تکثیر شد. تمامی نمونه های مثبت با semi-nested PCR اختصاصی ازنظر وجود تیلریا آنولاتا و تیلریا اورینتالیس بررسی شدند و آلودگی نمونه ها ازنظر تیلریا آنولاتا و تیلریا اورینتالیس به ترتیب 9/54% و 47% تشخیص داده شد. آزمون مربع کای جهت مقایسه میزان شیوع نسبت به فصل سال، نوع دامداری، بهداشت دامداری، ناقلین بندپا، سن دام و تولید شیر انجام شد. در مقایسه فراوانی گونه تیلریا اورینتالیس در گاو بین فصول مختلف نمونه گیری، حضور ناقلین و سطح بهداشتی دامداری اخلاف معنی داری مشاهده شد (p <0. 05). بیشترین فراوانی به ترتیب مربوط به فصل بهار، حضور کنه و سطح بهداشتی معمولی دامداری بود. در مقایسه آزمون میکروسکوپی با آزمون ملکولی، حساسیت و ویژگی آزمون میکروسکوپی به ترتیب 39/14 و 12/99 درصد تعیین گردید. محاسبه ضریب کاپا بین آزمون ملکولی و میکروسکوپی تیلریا (50 فیلد) نشان دهنده سطح ضعیف توافق دو آزمون بود (Kappa= 0. 124). این مطالعه اولین مطالعه تشخیص ملکولی گونه های تیلریا در گاوهای منطقه جنوب اصفهان است.

پکتن یک ساختار پرعروق و پیگمانته در چشم پرندگان است که احتمالاً عملکرد آن تغذیه شبکیه است. ویژگی های ساختاری پکتن تا حدی در پرندگان مختلف، متفاوت است. به منظور مطالعه آناتومی و بافت شناسی پکتن در چشم مرغ و خروس بومی ایران، 8 قطعه مرغ و خروس بومی اصلاح نژاد شده (4 قطعه مرغ و 4 قطعه خروس) از موسسه اصلاح نژاد مرغ بومی مازندران خریداری و پس از کشتار، چشم از حدقه خارج و در بافر فرمالین 10درصد تثبیت و سپس مورد مطالعه مورفولوژیکی و هیستولوژیکی قرار گرفت. نتایج نشان داد که ساختار پکتن کره چشم در مرغ و خروس اصلاح نژاد شده در چشم چپ و راست دارای 20 عدد تیغه با ارتفاع متفاوت بود که در قسمت قاعده ای در خروس به عرض 51/0 ± 6235 میکرومتر و در مرغ 47/0 ± 6207 میکرومتر دیده شد. طول ارتفاع تیغه های پکتن متغیر بود. در محل اتصال این تیغه ها به شبکیه سینوس های خونی مشاهده گردید. با توجه به نتایج می-توان نتیجه گرفت که تعداد تیغه های پکتن مرغ بومی اصلاح نژاد شده مشابه بلدرچین و بوقلمون و اندازه آن مشابه مرغ خانگی و طوطی گالا و از دید بافت شناسی مشابه سایر گونه ها است.

به منظور دست یافتن به راهکارهای مناسب جهت تنظیم پاسخ های ایمنی که منجر به افزایش کارآیی واکسن شود، در این مطالعه الگوی پاسخ ایمنی متعاقب تزریق واکسن دوگانه دیفتری-کزاز در موش مورد بررسی قرار گرفت. در این مطالعه از واکسن های تک ظرفیتی دیفتری و کزاز و واکسن دوگانه دیفتری-کزاز که در مجاورت ادجوانت (ژل فسفات آلومینیوم) و بدون ادجوانت، فرموله شده بود، استفاده گردید. واکسن های فرموله شده در 5 مرحله به 6 گروه از موش های Balb/c تزریق شد. دو هفته بعد از آخرین تزریق، طحال موش ها خارج شده و سلول های طحالی در مجاورت آنتی ژن های موردنظر قرار گرفتند و میزان سایتوکاین هایInterleukin 4) IL-4 ( و IFN-ɤ (Interferon gamma) در مایع رویی کشت سلولی اندازه گیری گردید. میزان IL-4 در موش هایی که واکسن های با ادجوانت را دریافت کرده بودند، در مقایسه با گروه بدون ادجوانت و نیز گروه کنترل، افزایش مشخصی را نشان داد. درحالی که این افزایش در مورد IFN-ɣ معنی دار نبوده است. نتایج فوق نشان داد که جهت گیری پاسخ های ایمنی بیشتر به سمت پاسخ های ایمنی زیررده (T helper 2) Th2 است که علت این امر می تواند به ماهیت آنتی ژن، نحوه فرمولاسیون واکسن و درصد جذب آنتی ژن در ژل آلوم مرتبط باشد که در نهایت بر روی گرایش پاسخ ایمنی تأثیر خواهد گذاشت.