تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت سلول به روش PCR

Q: چگونه مقاله دانلود کنم؟

برای دانلود مقاله از SID، ابتدا وارد سایت شوید، عنوان مقاله را جستجو کرده و بر روی گزینه 'دانلود مقاله' کلیک کنید.

Q: چگونه مقاله ISI دانلود کنم؟

برای دانلود مقاله ISI در SID، کلمه کلیدی یا عنوان مقاله را در نوار جستجو وارد کرده و نتایج مرتبط را مشاهده کنید. سپس روی مقاله مورد نظر کلیک کرده و گزینه 'دانلود مقاله' را انتخاب کنید.

Q: چگونه میتوانم به پایگاه داده SID دسترسی داشته باشم؟

برای دسترسی به پایگاه داده SID، وارد سایت SID.ir شوید، یک حساب کاربری ایجاد کنید و سپس با ورود به حساب خود به منابع علمی دسترسی پیدا کنید.

Q: آیا دانلود مقاله از SID رایگان است؟

بعضی از مقالات در SID بهصورت رایگان در دسترس هستند، اما برخی دیگر نیاز به پرداخت هزینه دارند. اطلاعات بیشتر در صفحه مقاله مشخص شده است.

شاه حسینی محمدحسن; حسینی زهرا; تبرایی بهمن; اخلاقی فاطمه; شکرگزار محمدعلی; مسلمی الهام

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

نشریه: مجله میکروب شناسی پزشکی ایران
:1387 | دوره:2 | شماره:2
صفحات :15-25

دانلود متن کامل

نسخه انگلیسی

بازدید:

2,289

دانلود:

1,062

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت سلول به روش PCR

نویسندگان

کلیدواژه

مایکوپلاسماQ4

PCRQ2

آلودگیQ3

تشخیص مولکولیQ2

کشت سلولQ3

چکیده

مقدمه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی در شرایط آزمایشگاه با گونه های مایکوپلاسما می تواند به مشکلاتی در ارگانیسم های زنده منجر شود. بنابراین, تهیه یک پروتکل تشخیص روتین برای عفونت های مایکوپلاسمایی, جهت به دست آوردن نتایج تحقیقاتی قابل اعتماد, ضروری و انکارناپذیر است. به دلیل محدودیت در روش های متواتر, این اواخر تکنولوژی هایی بر پایه اسید نوکلئیک خصوصا روش های بر پایه واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای شناسایی و تشخیص تمامی گونه های جنس مایکوپلاسما, به عنوان روشی سریع و ویژه ارایه شده اند. هدف از انجام این مطالعه ارایه روشی بر پایه PCR جهت آشکار کردن مایکوپلاسماها در نمونه های کشت سلولی و سایر فرآورده های بیولوژیک مانند واکسن ها بود.روش بررسی: با استفاده از پرایمرهای مخصوص جنس SHAH-GPO-3 و MGSO و گونه های استاندارد, روش PCR بهینه شد و از جهت حساسیت و ویژگی بررسی گردید. سپس از کشت های سلولی DNA استخراج و با PCR آزمایش شد. محصول تکثیری کلون و تعیین توالی گردید.یافته ها: در این مطالعه, روش حساسی از PCR تهیه و جهت تشخیص جنس مایکوپلاسما در آلودگی های فرآورده های بیولوژیک توسعه داده شد. ژن 16S rDNA به دلیل داشتن سکانس های مشترک و ثابت به عنوان ژن هدف, جهت تکثیر با پرایمرهای تغییر یافته مورد استفاده قرار گرفت. این روش حساس توسعه داده شده, با محصولی به اندازه 272 bp, دارای حساسیتی در حد 10 کپی از DNA ژنوم هدف بوده و با DNA بسیاری از میکروارگانیسم ها, رده های سلولی انسان, واکنش متقاطع ندارد. از این جهت, پرایمرها دارای حساسیت و ویژگی فوق العاده بالایی هستند.نتیجه گیری: سنجش PCR بر مبنای سکانس های ثابت و مشترک موجود در 16S rRNA, یک تکنیک مفید, قابل اعتماد با حساسیت, ویژگی, و دقت بالا جهت شناسایی آلودگی های مایکوپلاسمایی در کشت سلول و سایر فرآورده های بیولوژیک است. البته تحقیقات بیشتری در زمینه استخراج DNA, روش های تغلیظ نمونه, سکانس های هدف, روش شناسایی محصول تکثیری باید انجام گیرد.

استنادها