مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,240
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلون کردن، بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی

صفحات

 صفحه شروع 190 | صفحه پایان 195

چکیده

 هدف: ساختن پلاسمید نو ترکیب pGEX-P35, بیان ژن کد کننده آنتی ژن سطحی P35 تک یاخته و ارزیابی اولیه توانایی پروتئین حاصل از بیان ژن در ردیابی آنتی بادی های اختصاصی توکسوپلاسما گوندی.مواد و روش ها: قطعه ای DNA حاوی 450 نوکلئوتید از ژن P35 به وسیله PCR تکثیر و در وکتور pGEM-T کلون و تعیین سکانس شد. سپس ژن مذکور با آنزیم های Sall و BamHl که در قسمت '5 پرایمرهای آن تعبیه شده بود از وکتور pGEM-T جدا و در وکتور pGEX-4T-1 ساب کلون شد. برای تایید اینکه وکتور نو ترکیب قادر است P35 را در باکتری بیان کند, این وکتور به سویه BL21 اشریشیا کلی ترانسفرم و عمل بیان ژن انجام شد. پروتئین نو ترکیب تولید شده خالص و با روشهای SDS-PAGE و Westernblotting بررسی شد.یافته ها: محصول PCR به صورت نوار DNA حاوی 450 نوکلئوتید بر روی ژل آگاروز 1 درصد مشاهده شد. پس از کلون شدن محصول PCR در pGEM-T, نتایج حاصل از تعیین سکانس با داده های موجود در GenBank مقایسه شد که تفاوتی وجود نداشت. پس از قرار گرفتن قطعه ژن در وکتور بیان, نتیجه آنالیز آنزیمی نشان داد که قطعه ژن مذکور با جهت صحیح در وکتور قرار گرفته است. پس از بیان ژن و خالص سازی پروتئین, انجام گرفتن SDS- PAGE نوار پروتئینی 42kDa حاصل از بیان را نشان داد. آنالیز به وسیله وسترن بلات با استفاده از آنتی بادی موشی بر علیه سویه RH توکسوپلاسما گوندی نشان داد که پروتیین نو ترکیب تولید شده به وسیله آنتی بادی شناسایی می شود.نتیجه گیری: در این مطالعه قسمتی از ژن کد کننده آنتی ژن سطحی اختصاصی تاکی زوییت توکسوپلاسما گوندی کلون, بیان و تعیین سکانس شد. سکانس مذکور تایید می کند اختلاف سکانس میان ژن های توکسوپلاسما, هر چند از نقاط مختلف جغرافیایی باشند ناچیز است. این سکانس با شماره شناسایی DQ092625 در بانک ژن به ثبت رسید.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

    استناددهی

    APA: کپی

    کواکب، پرویز، کاظمی، بهرام، و درستکارمقدم، داوود. (1385). کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی. یاخته، 8(3 (31) (ویژه نامه انگلیسی))، 190-195. SID. https://sid.ir/paper/16503/fa

    Vancouver: کپی

    کواکب پرویز، کاظمی بهرام، درستکارمقدم داوود. کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی. یاخته[Internet]. 1385؛8(3 (31) (ویژه نامه انگلیسی)):190-195. Available from: https://sid.ir/paper/16503/fa

    IEEE: کپی

    پرویز کواکب، بهرام کاظمی، و داوود درستکارمقدم، “کلون کردن, بیان و شناسایی پروتئین P35 توکسوپلاسما گوندی در اشریشیاکلی،” یاخته، vol. 8، no. 3 (31) (ویژه نامه انگلیسی)، pp. 190–195، 1385، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/16503/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button