Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

651
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

515
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

همسانه سازی و بیان ژن سلوبیوهیدرولاز cel6B در مخمر Pichia pastoris

صفحات

 صفحه شروع 139 | صفحه پایان 151

چکیده

 آنزیم Cel6B از باکتری Thermobifidia fusca, یک CBHII متعلق به خانواده بی سلولازهاست که بسیار مقاوم به حرارت است. به علت میزان پایین تولید این آنزیم در میزبان اولیه نمی توان از این میزبان برای تولید آنزیم در مقیاس صنعتی استفاده نمود. به منظور بیان این آنزیم در مخمر, ژن سلوبیوهیدرولاز موجود در سازه PSZ143 با PCR تکثیر و به درون ناقل مخمری pPICZα A, همسانه سازی شد. سازه نوترکیب حاوی ژن cel6B, به باکتری Jm109 E. coli منتقل شده و باکتری های نوترکیب بر روی محیط کشت LB حاوی µ g/ml5/0 بلئومایسین, انتخاب شد. سازه نوترکیب خطی شده, با استفاده از الکتروپوریشن به مخمرPichia pastoris سویه های GS115 و KM71H منتقل شد. در نهایت بهترین غلظت متانول و بهترین روز بیان آنزیم نیز با روش DNS تعیین شد. نتایج نشان داد, بیشترین میزان فعالیت سلوبیوهیدرولاز در سویه های GS115 و KM71H و بر روی PC (پنبه اسید فسفریک شده) در دمای C° 50 و به مدت 16 ساعت, به ترتیب 98/1 و U( mol/min)/ml 475/0 است. نمونه مربوط به کلنی پر محصول سویه GS115 بر روی ژل SDS-PAGE بارگزاری و بیان آنزیم تأیید شد و سپس نتایج بهترین غلظت متانول و بهترین روز بیان آنزیم با همین سویه, در روز چهارم بعد از القاء با 3 درصد متانول (V/V) به دست آمد. عدم بهینه سازی کدون های ژن همسانه شده به پلاسمید مخمری باعث کاهش بیان و کاهش فعالیت سلوبیوهیدرولازی آن شد. مخمر پیشیا میزبان مناسبی برای بیان این آنزیم است که با بهینه سازی کدونهای توالی کدکننده این ژن, می توان بازدهی بیان را بهبود داد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    حیدری قره سو، فهیمه، مشتاقی، نسرین، مشکانی، براتعلی، و ملک زاده شفارودی، سعید. (1397). همسانه سازی و بیان ژن سلوبیوهیدرولاز cel6B در مخمر Pichia pastoris. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی، 7(2 )، 139-151. SID. https://sid.ir/paper/270506/fa

    Vancouver: کپی

    حیدری قره سو فهیمه، مشتاقی نسرین، مشکانی براتعلی، ملک زاده شفارودی سعید. همسانه سازی و بیان ژن سلوبیوهیدرولاز cel6B در مخمر Pichia pastoris. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی[Internet]. 1397؛7(2 ):139-151. Available from: https://sid.ir/paper/270506/fa

    IEEE: کپی

    فهیمه حیدری قره سو، نسرین مشتاقی، براتعلی مشکانی، و سعید ملک زاده شفارودی، “همسانه سازی و بیان ژن سلوبیوهیدرولاز cel6B در مخمر Pichia pastoris،” مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی، vol. 7، no. 2 ، pp. 139–151، 1397، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/270506/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا