مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

733
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

انتقال ژن Hski-1 به لاین سلولی COS-7 به منظور بررسی جایگاه درون سلولی آنزیم

صفحات

 صفحه شروع 275 | صفحه پایان 284

چکیده

 آنزیم (Site-1-Protease/Subtilisin-Kexin Isozyme-1)S1P/SKI-1 پروتئازی است که بر خلاف (Precursor Convertase) های پستانداران, سوبسترای خود راپس از آمینواسیدهای غیربازی در توالی توافقی (Arg/Lys)-X-(Hydrophobic)-(L,T)↓-X برش می دهد. به نظر می رسد که آنزیم در ER دستگاه گلژی و یا وزیکول های ترشحی وجود دارد ولی احتمالا در دستگاه گلژی فعالیت خود را انجام می دهد. بررسی جایگاه درون سلولی آنزیم S1P/SKI در لاین سلولی COS-7 هدف اصلی این تحقیق بوده است. بدین منظور پس از تکثیر پلاسمید به روش ماکسی پرپ, سلول های COS-7 هدف اصلی این تحقیق بوده است. بدین منظور پس از تکثیر پلاسمید به روش ماکسی پرپ, سلولهای COS-7 با حامل PIRES (حاوی cDNAی کد کننده S1P/SKI-1-V5) ترانسفکت شد و از آنجایی که  cDNAی پروتئین EGFP در حامل به عنوان گزارشگر حضور داشت, به روش فلورسانس میکروسکوپی, سطح بیان و درصد سلولهای ترانسفکت شده مشخص شد. برای اثبات بیان شدن S1P/SKI-1 وRNAی کل از کشت سلولی ترانسفکت شده استخراج گردید و پس از بررسی کمیت و کیفیت RNAی استخراج شده به روش اسپکتروفتومتری و الکتروفورزژل آگارز, واکنش رونویسی معکوس (RT) با استفاده از پرایمر الیگو dT و آنزیم M-MLV انجام شد. سپس واکنش PCR روی محصول RT انجام شد و وجود قطعه تکثیر شده با الکتروفورز محصول PCR بر روی ژل PAGE تایید شد. سپس ایمونوسیتوشیمی بر روی تک لایه سلولی ترانسفکت شده با استفاده از آنتی بادی بر علیه وصله V5 که به قسمت پایانه 3 ژن اضافه شده است, انجام شد. وجود سیگنال مثبت در تصاویر میکروسکوپ فلورسنت انجام موفقیت آمیز ترانسفکشن را تایید کرد. نتایج حاصل از ایمونوسیتوشیمی نشان داد که آنزیم در ساختارهایی شبیه ER و دستگاه گلژی قرار دارد اما توزیع رنگ آمیزی در اطراف هسته بیشتر از قسمتهای دیگر است. الگوی رنگ آمیزی در ایمونوسیتوشیمی ضمن اینکه فرضیات قبلی را در مورد محل استقرار درون سلولی آنزیم تایید می کند, پیشنهاد می کند که آنزیم ترجیحا در دستگاه گلژی قرار دارد و فعالیت می کند.

استنادها

  • ثبت نشده است.

    • ارجاعات

  • ثبت نشده است.

    • استناددهی

    APA: کپی

    حمیدی، آناهیتا، مولا، سیدجواد، و الطریحی، تقی. (1382). انتقال ژن Hski-1 به لاین سلولی COS-7 به منظور بررسی جایگاه درون سلولی آنزیم. مجله پزشکی کوثر، 8(4)، 275-284. SID. https://sid.ir/paper/423283/fa

    Vancouver: کپی

    حمیدی آناهیتا، مولا سیدجواد، الطریحی تقی. انتقال ژن Hski-1 به لاین سلولی COS-7 به منظور بررسی جایگاه درون سلولی آنزیم. مجله پزشکی کوثر[Internet]. 1382؛8(4):275-284. Available from: https://sid.ir/paper/423283/fa

    IEEE: کپی

    آناهیتا حمیدی، سیدجواد مولا، و تقی الطریحی، “انتقال ژن Hski-1 به لاین سلولی COS-7 به منظور بررسی جایگاه درون سلولی آنزیم،” مجله پزشکی کوثر، vol. 8، no. 4، pp. 275–284، 1382، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/423283/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.

    • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.

    • کارگاه های پیشنهادی






    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    فایل موجود نیست.
    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button