مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

746
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

574
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

طراحی و بیان پروتئین نوترکیب از ژن tcpA ویبریوکلرا در وکتور pET32a(+)

صفحات

 صفحه شروع 12 | صفحه پایان 24

چکیده

 زمینه و هدف: ویﺒ ﺮ یﻮ ﮐ ﻠ ﺮ ا یﮏ ﺑ ﺎ ﮐ ﺘ ﺮ ی ﭘ ﺎ ﺗ ﻮ ژن ﮔ ﺮ م ﻣ ﻨ ﻔ ﯽ اﺳ ﺖ ﮐ ﻪ ﻋ ﺎ ﻣ ﻞ ﺑ ﯿ ﻤ ﺎ ری اﺳ ﻬ ﺎ ل اﺳ ﺖ . یکی از مهم ترین عوامل بیماری زایی باکتری ویبریوکلرا است؛ پیلی هم تنظیم شونده با توکسین است که برای کلونیزاسیون باکتری در روده لازم است. هدف از این تحقیق بررسی بیوانفورماتیکی و بیان پروتئین نوترکیب TcpA بود. روش بررسی: ژن tcpA به لحاظ وجود کدون های نادر بررسی و بهینه سازی ژن با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیکی انجام شد. طراحی پرایمر جهت تکثیر ژن سنتزی tcpA انجام گرفت. ژن سنتزی در وکتور pET32a(+) همسانه سازی شد. پلاسمید نوترکیب pET32a(+)-tcpA در باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت شد. بیان ژن tcpA تحت القای IPTG 1 میلی مولار انجام گردید. بیان پروتئین نوترکیب با روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ بررسی شد. جهت تخلیص پروتئین نوترکیب از کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA استفاده شد. یافته ها: ژن طبیعی tcpA دارای شاخص انطباق پذیری 0/6 بود, در حالی که ژن بهینه سازی شده دارای شاخص انطباق پذیری 0/9 بود. با بهینه سازی ژنی درصد کدون های با ترجیح بالا به 75% افزایش یافت. آنالیز آنزیمی همسانه سازی ژن tcpA کلون شده در وکتور pET32a(+) را تأیید کرد. پروتئینی با وزن مولکولی 38/6 کیلو دالتون در SDS-PAGE دیده شده و واکنش آن با آنتی بادی ضد هیستیدین در وسترن بلات تأیید گردید. میزان پروتئین خالص شده 11/533میلی گرم در لیتر بود. نتیجه گیری: بهینه سازی ژنی منجر به بیان بالای پروتئین نوترکیب TcpA شد. با توجه به خاصیت آنتی ژنیسیته tcpA, این پروتئین می تواند کاندیدای مناسبی به منظور توسعه ایمنی علیه وبا باشد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    عامریان، میلاد، نظریان، شهرام، هنری، حسین، و مینایی، محمدابراهیم. (1397). طراحی و بیان پروتئین نوترکیب از ژن tcpA ویبریوکلرا در وکتور pET32a(+). مجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد (Journal of Shahrekord University of Medical Sciences)، 20(4 )، 12-24. SID. https://sid.ir/paper/58131/fa

    Vancouver: کپی

    عامریان میلاد، نظریان شهرام، هنری حسین، مینایی محمدابراهیم. طراحی و بیان پروتئین نوترکیب از ژن tcpA ویبریوکلرا در وکتور pET32a(+). مجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد (Journal of Shahrekord University of Medical Sciences)[Internet]. 1397؛20(4 ):12-24. Available from: https://sid.ir/paper/58131/fa

    IEEE: کپی

    میلاد عامریان، شهرام نظریان، حسین هنری، و محمدابراهیم مینایی، “طراحی و بیان پروتئین نوترکیب از ژن tcpA ویبریوکلرا در وکتور pET32a(+)،” مجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکرد (Journal of Shahrekord University of Medical Sciences)، vol. 20، no. 4 ، pp. 12–24، 1397، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/58131/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button