مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله طرح

مشخصات مقاله

مجری: پژوهشکده فنآوریهای نوین علوم پزشکی ابن سینا
سال:1386 | تاریخ پایان: 1386

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

613
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات طرح

عنوان

تهیه IgM موشی با استفاده از سلول هیبریدوم و استفاده از آن جهت تولید آنتیبادی پلیکلونال علیه IgM موشی به منظور ساخت ستون کروماتوگرافی جذبی

نهاد حامی(کارفرما)

 جهاد دانشگاهی

صفحات

 صفحه شروع | صفحه پایان

کلیدواژه

ثبت نشده است

چکیده

 هدف: در طی مراحل تولید آنتی بادی منوکلونال، پس از به دست آوردن یک سلول هیبریدومای مولد آنتی بادی منوکلونال، نحوه تخلیص آنتی بادی منوکلونال از سوپ کشت سلول یا آسیت، مرحله ای مهم و حساس است که با توجه به کلاس آنتی بادی موردنظر، روش مناسب برای تخلیص، انتخاب می گردد.
برخی از کلونهای هیبریدوما، تولیدکننده آنتی بادی از کلاس IgM هستند. در حال حاضر روشهای متعددی برای تخلیص IgM به کار می روند. در این میان می توان به ژل فیلتراسیون، کروماتوگرافی تعویض یونی، کروماتوگرافی هیدروفوب و کروماتوگرافی جذبی اشاره کرد. تخلیص IgM موجود در سوپرناتانت سلولی با مشکلات عدیده ای همراه است که معمولا با کاهش بازده تخلیص و از دست دادن آنتی بادی همراه می باشد. برای مثال از معایب استفاده از کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون، رقیق شدن نمونه و زمان بر بودن انجام آن است؛ مضافا بر اینکه معمولا با یک مرحله تخلیص،IgM  کاملا خالص به دست نمی آید و روشهای دیگری برای رسیدن به خلوص بالاتر لازم است. با توجه به ضرورت ابداع روشی برای امکان تخلیص آنتی بادی منوکلونال از سوپرناتانت سلولی، طراحی روشی سریع، آسان و مقرون به صرفه برای تخلیص IgM تولید شده، ضروری است. در این طرح تصمیم به این گرفته شد که علیه Mouse IgM، آنتی بادی پلیکلونال تهیه شده و نهایتا با این آنتی بادی، ستون کروماتوگرافی جذبی جهت تخلیص آنتی بادی های منوکلونال با کلاس IgM، از سوپ یا آسیت طراحی و ساخته شود.
مواد و روشها: سلول هیبریدومای مولد آنتی بادی منوکلونال با کلاسIgM ، کشت داده شد. پس از آن که تعداد سلولها به حد لازم رسید، با تزریق آنها به موش، آسیت تولید شده و IgM موجود در آسیت با روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون استخراج گردید. خلوص IgM به دست آمده با SDS-PAGE، سنجیده شد. سپس این IgM به خرگوش تزریق شد تا آنتی بادی پلیکلونال ضد IgM به دست آید. سپس ستون کروماتوگرافی جذبی با لیگاند Mouse IgM ساخته شد و سرم خرگوش ایمن شده باMouse IgM  از این ستون عبور داده شد. آنتی بادی تخلیص شده با این ستون، جهت ساخت ستون کروماتوگرافی جذبی دیگری به کار گرفته شد که با استفاده از این ستون می توان IgM را در زمان کوتاه و با هزینه بسیار کمتر نسبت به روشهای دیگر و نیز با درجه خلوص بسیار بالا از آسیت یا سوپ سلولی تخلیص کرد.
نتایج: پس از کشت سلولها و تزریق آنها به موش، از 1.5cc آسیت به دست آمده،Mouse IgM3.32mg  توسط ژل فیلتراسیون تخلیص شد و پس از تزریق آن به دو خرگوش، آنتی بادی Rabbit Anti Mouse IgM به دست آمده توسط ستون Sepharose-4B-Mouse IgM به مقدار 41mg به دست آمد که با آن دو ستون Sepharose-4B-Rabbit Anti Mouse IgM  ساخته شد و از آن برای تخلیص آنتی بادی منوکلونال با کلاس IgM از سوپ سلولی و آسیت استفاده شد و IgM تخلیص شده کاملا خالص بود.
بحث: با توجه به مطالعات انجام شده و نتایج به دست آمده توسط سایر محققین، تصمیم بر آن گرفته شد که روشی ابداع شود که هم از لحاظ زمانی و هم مالی، مقرون به صرفه باشد. با توجه به اینکه بسیاری از مقالات به تکنیک کروماتوگرافی، اشاره و تاکید کرده اند و برخی نیز کروماتوگرافی جذبی را پیشنهاد نموده اند. عموم روشهای تخلیص IgM، حداقل 2 مرحله ای و برخی 3 یا 4 مرحله ای هستند. علاوه بر این، در برخی روشها بایستی یک یا چند مرحله پروسه ابتدایی روی سوپ یا آسیت حاوی آنتی بادی انجام داد و پس از آن، مرحله اصلی تخلیص IgM را آغاز کرد. اما به کمک ستون کروماتوگرافی جذبی، فقط در یک مرحله میتوان IgM منوکلونال را از آسیت یا سوپ سلولی تخلیص کرد و IgM کاملا خالص به دست آورد.

چندرسانه ای

  • ثبت نشده است.
  • استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    محمودی، سیداحمدرضا، قدس، رویا، بیات، علی احمد، خاک پور، جمیله، برزگریارمحمدی، لیلا، بالای گلی، لیلا، بابایی، مهدخت، جدی تهرانی، محمود، و استادکرم پور، مهیار. (1386). تهیه IgM موشی با استفاده از سلول هیبریدوم و استفاده از آن جهت تولید آنتیبادی پلیکلونال علیه IgM موشی به منظور ساخت ستون کروماتوگرافی جذبی. تهران، ایران: مراکز جهاد دانشگاهی. https://sid.ir/paper/788102/fa

    Vancouver: کپی

    محمودی سیداحمدرضا، قدس رویا، بیات علی احمد، خاک پور جمیله، برزگریارمحمدی لیلا، بالای گلی لیلا، بابایی مهدخت، جدی تهرانی محمود، استادکرم پور مهیار. [Internet]. تهیه IgM موشی با استفاده از سلول هیبریدوم و استفاده از آن جهت تولید آنتیبادی پلیکلونال علیه IgM موشی به منظور ساخت ستون کروماتوگرافی جذبی. تهران، ایران: مراکز جهاد دانشگاهی؛ 1386. Available from: https://sid.ir/paper/788102/fa

    IEEE: کپی

    سیداحمدرضا محمودی، رویا قدس، علی احمد بیات، جمیله خاک پور، لیلا برزگریارمحمدی، لیلا بالای گلی، مهدخت بابایی، محمود جدی تهرانی، و مهیار استادکرم پور، “تهیه IgM موشی با استفاده از سلول هیبریدوم و استفاده از آن جهت تولید آنتیبادی پلیکلونال علیه IgM موشی به منظور ساخت ستون کروماتوگرافی جذبی،” ایران، مراکز جهاد دانشگاهی، 1386. [Online]. Available: https://sid.ir/paper/788102/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

  • ثبت نشده است.
  • مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

    فایل موجود نیست

    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button