مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,374
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

ساخت و کلونینگ cDNA فاکتور کلنی گرانولوسیت انسانی (hG-CSF)

صفحات

 صفحه شروع 55 | صفحه پایان 64

چکیده

 هدف: فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیت انسانی یکی از فاکتورهای رشد خونساز است که تکثیر و تمایز سلولهای پیش ساز گرانولوسیت نوتروفیلی سلولهای مغز استخوان را تحریک می کند. این فاکتور همچنین تمایز نهایی بعضی از سلولهای لوسمی میلوییدی را القا می کند. hG-CSF در منوسیتها و ماکروفاژهای انسانی در پاسخ به آندوتوکسین باکتریایی و همچنین رده های سلولی انسانی نظیر کارسینومای حفره دهانی CHU-2  و کارسینومای مثانه 5637 تولید می شود. هدف این پژوهش, استخراج RNA  کل از سلولهای تحریک شده منوسیت انسانی, سنتز cDNA دو رشته ای hG-CSF و در نهایت کلون کردن cDNA سنتز شده در یک ناقل کلونینگ مناسب بود.مواد و روشها: در ابتدا, سلولهای منوسیت از خون محیطی فرد طبیعی جداسازی شد. این سلولها کشت داده شد و به طور همزمان به وسیله محرکهای لیپوپلی ساکارید باکتریایی (LPS) و اینترفرون گامای انسانی (hIFN-γ) تحریک شد. RNA کل, از سلولها استخراج شد و به دنبال آن هر دو cDNA دارای ترادف راهنما (کد کننده پروتئین اولیه) و فاقد ترادف راهنما (کد کننده پروتئین بالغ) با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و بر اساس روش RT-PCR سنتز شد. همچنین هر دو cDNA مذکور به طور همزمان از RNA کل استخراج شده از سلولهای کارسینومای مثانه انسانی 5637 سنتز شد. در مرحله بعد هر دو cDNA با استفاده از آنزیم محدودگر StyI که بر روی ژل الکتروفورز تشکیل سه قطعه مجزا می دهد, مورد تایید قرار گرفت, سپس cDNA دارای ترادف راهنمای مشتق از منوسیتها درون ناقل کلونینگ pBluescriptIISK داخل و در باکتری اشریشیاکلی (سویه TOP10F') کلون شد.نتایج و بحث: به دنبال غربالگری, کلنیهای صحیح انتخاب شد و ناقل نوترکیب از باکتریهای تراریخته, استخراج و با استفاده از آنزیمهای محدودگر BamHI, EcoRI, StyI, NcoI تایید شد. برای تایید نهایی, ناقل نوترکیب صحیح انتخاب و قطعه کلون شده, تعیین توالی شد. بعد از تایید ترادف نوکلئوتیدی قطعه کلون شده؛ با استفاده از پرایمرهای اختصاصی, ناقل نوترکیب به عنوان الگو و با کمک PCR, cDNA فاقد ترادف راهنما سنتز و در ناقل کلونینگ داخل و در باکتری TOP10F' کلون شد. در نهایت کلون صحیح انتخاب شد و با استفاده از آنزیمهای محدودگر مورد تایید قرار گرفت.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    سعیدی نیا، علیرضا، صادقی زاده، مجید، مقصودی، نادر، اکبری، بهرام، فلاح، جلیل، و کریمی، محسن. (1381). ساخت و کلونینگ cDNA فاکتور کلنی گرانولوسیت انسانی (hG-CSF). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، 5(1)، 55-64. SID. https://sid.ir/paper/81194/fa

    Vancouver: کپی

    سعیدی نیا علیرضا، صادقی زاده مجید، مقصودی نادر، اکبری بهرام، فلاح جلیل، کریمی محسن. ساخت و کلونینگ cDNA فاکتور کلنی گرانولوسیت انسانی (hG-CSF). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)[Internet]. 1381؛5(1):55-64. Available from: https://sid.ir/paper/81194/fa

    IEEE: کپی

    علیرضا سعیدی نیا، مجید صادقی زاده، نادر مقصودی، بهرام اکبری، جلیل فلاح، و محسن کریمی، “ساخت و کلونینگ cDNA فاکتور کلنی گرانولوسیت انسانی (hG-CSF)،” پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، vol. 5، no. 1، pp. 55–64، 1381، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/81194/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    فایل موجود نیست.
    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button