سرم جنین گاو یکی از پرمصرف ترین مکمل ها در کشت سلولی می باشد. اهمیت سلامت اجزا محیط کشت جهت دستیابی به نتایج مطلوب واضح است و این موضوع زمانی آشکارتر می گردد که کشت سلولی کاربرد تولید مواد بیولوژیک با جنبه درمان یا پیشگیری در انسان و یا دام داشته باشد. در تلاش برای استریل نمودن اجزا محیط کشت یکی از رایج ترین روش ها، استفاده از حرارت مرطوب است. اجزا شیمیایی محیط کشت سلولی را می توان براحتی اتوکلاو نمود ولی در حرارت ناشی از این روش سرم جنین صدمه دیده و ترکیبات آن دچار تغییر ماهیت خواهند شد. به همین دلیل به روش های دیگر استریل سازی مانند استفاده از فیلتراسیون بعنوان یک روش فیزیکی حذف آلودگیها روی آورده شد. استفاده از اشعه گاما یکی از روشهایی است که در چند سال اخیر به منظور استریل سازی دارو و مواد بیولوژیک مورد توجه قرار گرفته است.در این طرح تعدادی نمونه 8-7 سی سی سرم جنین گاو تهیه گردید. این نمونه ها در 6 گروه مختلف سرم خام، سرم فیلترشده (با استفاده از فیلتر  0.22میکرون) و دریافت کنندگان 5، 15، 25 و 35 کیلوگری اشعه گاما (با نرخ دز  (5.6gray/sتقسیم بندی شدند. این نمونه گیری در 3 بچ تکرار شد. نمونه های مختلف از نظر استریلیتی، پارامترهای بیوشیمیایی و حمایت از رشد سلولی (با استفاده از آزمایش (MTT بررسی شدند و نتایج در تیمارهای مختلف مورد مقایسه قرار گرفتند.نتایج بدست آمده در گروههای دریافت کننده اشعه گاما در مقایسه با گروه فیلتر شده نشان داد که در دز 15 کیلوگری و بالاتر هیچ نوع آلودگی باکتریایی، قارچی، مایکوپلاسمایی و ویروسی که قابل رشد در شرایط آزمایش باشند باقی نماند در حالی که روش فیلتراسیون توانایی حذف کامل آلودگی های ویروسی و مایکوپلاسمایی را نداشت. در بررسی بیوشیمیایی، میانگین میزان تری گلیسرید و کلسترول تغییرات قابل توجهی نداشت. میانگین فعالیت آنزیمی، کاهش معنی داری را در آنزیمهای آسپارتات آمینوترانسفراز(SGOT)  و آلانین آمینوترانسفراز (SGPT) در تیمارهای 25 و 35 کیلوگری نسبت به گروه فیلتره نشان داد (P<0.05). کاهش فعالیت آنزیمهای گاما گلوتامیل ترانسفرا(γGT) ، آلکالین فسفاتاز(ALP)  و لاکتات دهیدروژناز(LDH)  فقط در گروه دریافت کننده دز 35 کیلوگری دارای اختلاف معنی داری با گروه فیلتراسیون بود (P<0.05). مقایسه میانگین حمایت از رشد تیمارهای مختلف در رده های سلولی Cos7،MDA-MB231  و BK کاهش معنی داری در تیمارهای دریافت کننده اشعه گاما نسبت به گروه فیلتراسیون نشان نداد. نتایج بدست آمده در این طرح نشان داد که استفاده از اشعه گاما میتواند به عنوان یک روش مطمئن در استریل کردن سرم جنین گاو مورد استفاده قرار گیرد و دز قابل استفاده بسته به شرایط تهیه محصول و موارد مصرف متفاوت خواهد بود.

تنوع ژنتیکی تعداد 26 ایزوله استرپتو کوکوس اینیایی و تعداد 44 ایزوله لاکتوکوکوس گارویه بدست آمده از تلفات مزارع قزل آلای رنگین کمان در برخی استانهای کشور به روش RAPD مورد مطالعه قرار گرفته است. پس از کشت از بافت کلیه ماهیان مرضی و جداسازی کوکسی های گرم مثبت روی ژلوز خون، با استفاده از روش PCR (تولید باند 513bp برای استرپتوکوکوس اینیایی و تولید باند 1100bp برای لاکتوکوکوس گارویه) تائید تشخیص شدند. در مطالعات RAPD و بااستفاده از نه پرایمر انتخابی(P1-P6 ,P14 ,1290 ,OPS11) نتایج حاصله نشان داد که ایزوله های استرپتو کوکوس اینیایی در 5 تیپ (پروفایل) قابل تقسیم بندی هستند. نتایج ترسیم درخت فیلوژنی محصول RAPD با استفاده از UPGMA موجب تفکیک این ایزوله ها در 2 کلاستر و در یک گروه ژنتیکی شد. درمورد لاکتوکوکوس گارویه نتایج مطالعات RAPD و بااستفاده از شش پرایمر انتخابی (P1-P6) نشان داد که تنها پرایمر P4 قادر به تولید حداکثر (5باند) نمود. با استفاده از این پرایمر چهار الگوی باندی شامل 1330-560 bp با تعداد 5 باند،1260-560 bp با تعداد 5 باند،1260-560bp با تعداد 4 باند و 1200-560bp با تعداد 5 باند نمود.نتایج ترسیم درخت فیلوژنی محصول RAPD ایزوله های لاکتوکوکوس گارویه با استفاده از UPGMA موجب تفکیک این ایزوله ها در 3 کلاستر و در چهار گروه ژنتیکی شد. نتایج این مطالعه نشان می دهد که ایزوله های استرپتو کوکوس اینیایی از عوامل اصلی استرپتوکوکوزیس در مزارع قزل آلای منطقه شمالی کشور با منطقه جنوبی و غربی کشور از مشابهت بالایی برخوردارند. همچنین نتایج این مطالعه نشان می دهد که گرچه مشابهت هایی بین ایزوله های لاکتوکوکوس گارویه منطقه شمالی کشور با منطقه جنوبی وجود دارد ولی ایزوله های این دو منطقه با همدیگر دارای تفاوتهای ژنتیکی نیز هستند که بیانگر وجود تنوع ژنتیکی ایزوله های لاکتوکوکوسی گارویه عامل تلفات در مزارع قزل آلا در ایران می باشد.

در این تحقیق القا تغییر جنسیت در ماهی کپور معمولی، بوسیله هورمون 17- آلفامتیل تستوسترون به روش خوراکی در سطح صنعتی مورد بررسی قرار گرفته است. از روش خشک سازی الکل جهت توزیع همگن هورمون در خوراک استفاده گردید. میزان هورمون مورد استفاده 300 میلی گرم در کیلوگرم خوراک بود. ماهیهای 10روزه کپور معمولی به مدت 45 روز با خوراک حاوی هورمون تغذیه شدند. درجه حرارت آب در طول دوره تیمار 25±1 درجه سانتیگراد بود. یک گروه به عنوان تیمار شاهد با غذای بدون هورمون در نظر گرفته شد که تمامی شرایط برای گروه شاهد و تیمار یکسان بود. پس از طی دوره تیمار، بچه ماهیان به مدت 270 روز در استخر خاکی 2000 متری و با غذای فاقد هورمون پرورش داده شدند. در انتهای دوره از گروه شاهد و تیمار شده نمونه های تصادفی برداشته شد و بررسیهای بافت شناسی گنادها مشخص نمود که نسبت جنسی ماهیها کاملا تغییر نموده است (P<0.005)؛ و در بین آنها ماهیان عقیم و همچنین جنسیت بینابینی هم مشاهده گردید، بطوریکه در ماهیان تیمار شده 61.6% نر، 11.6% جنسیت بینابینی و 26.8% ماهیان عقیم ایجاد شده و ماهی ماده ای در این تیمار مشاهده نگردید و این در حالی است که در نسبت جنسی گروه شاهد پس از پایان دوره هیچگونه تغییری مشاهده نگردید. بررسیهای انجام شده در مورد طول و وزن ماهیان تیمار شده نمایانگر افزایش رشد ماهیان تیمار شده نسبت به گروه شاهد می باشد بطوریکه متوسط طول و وزن ماهیان تیمار شده به ترتیب برابر 19.5±3.2 سانتی متر و 135.9±23.8 گرم بوده در صورتی که در گروه شاهد طول و وزن متوسط برابر 18.8±1.2 سانتی متر و 110.6±11.4 گرم بوده است. بنابراین تیمار 300 ppm هورمون در خوراک ایجاد تغییر جنسبت و عقیمی در ماهی کپور نموده و همچنین باعث حذف جنس ماده ازجمعیت می گردد؛ نتایج این تحقیق راهگشای مشکل تکثیر طبیعی ماهی کپور در استخرهای گرمایی بوده و تاثیر مثبتی نیز بر رشد این ماهی خواهد داشت.

1- تولید آنتی ژن: بذر ویروس آنفلوانزایی که در این طرح مورد استفاده قرار گرفت سال 1377 از اپیدمی استان تهران A/chick/Iran/ZMT-101/98 (H9N2) در دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران جدا شده بود. ابتدا به منظور تولید آنتی ژن مورد نیاز، تخم مرغهای جنین دار 7-5 روزه از گله های مادر گوشتی سالم خریداری شده و به دستگاه جوجه کشی موجود در آزمایشگاه ویروس شناسی بخش طیور انتقال می یافت. پس از این تخم مرغها تا روز نهم بطور مرتب نور بین شده و جنین های تلف شده حذف می گردید. تخم مرغهای جنین دار 9 روزه سالم با استفاده از سرنگهای استریل به شکل کاملا آسپتیک بوسیله بذر اولیه تزریق می شد. جنین های تلف شده در فاصله زمانی 24 ساعت بعد از تزریق حذف می شدند. بعد از 48 ساعت انکوباسیون تخم مرغها به مدت 24 ساعت در یخچال قرار داده می شد تا جنین ها کشته شوند. سپس در زیر هود میکروبیولوژی و کنار شعله و شرایط کاملا آسپتیک مایع آلانتوئیک تخم مرغها جمع آوری شده و به داخل ظروف درب دار استریل انتقال داده می شد و از نظر وجود آلودگی میکروبی توسط آزمایش کشت در Nutrient agar در دمای 37˚C به مدت 48 ساعت مورد ارزیابی قرار می گرفت و در صورت عادی بودن از هر گونه آلودگی میکروبی با استفاده از فرمالین غیر فعال می شد. مجددا به منظور ارزیابی غیر فعال بودن، مایع آلانتوئیک حاصله به تخم مرغهای جنین دار 9 روزه تزریق می شد که در صورت غیر فعال بودن، هیچگونه تلفاتی در جنین ها ایجاد نمی کرد. علاوه بر آن مایع آلانتوئیک این تخم مرغها بعد از 4 روز جمع آوری و توسط آزمایش HA مورد ارزیابی قرار می گرفت. در صورت منفی بودن آزمایش HA جهت اطمینان از عدم تکثیر ویروس غیر فعال شده، پاساژ مجدد به عمل می آمد.

لطفا برای مشاهده چکیده به متن کامل (PDF) مراجعه فرمایید.

در سال های اخیر، سلول درمانی و کشت سلول اهمیت بالایی پیدا کرده است. سرم جنین گاو (FBS) به دلیل داشتن مواد مغذی فراوان، فاکتورهای رشد و ترکیبات مختلف به عنوان مکمل در کشت بسیاری از رده های سلولی استفاده می شود. از مشکلات مصرف FBS ماهیت متغیر آن است به طوریکه میزان ترکیبات کلیدی آن در بچ های مختلف متفاوت است. تهیه ی مقادیر بالای FBS نیز به دلیل محدودیت دسترسی به جنین گاو و احتمال انتقال عوامل عفونی در ایران با مشکل مواجه است. با توجه به چالش های استفاده از FBS، معرفی جایگزینی برای آن، اجتناب ناپذیر است. پلاکت های خون انسانی از جمله ترکیباتی هستند که به عنوان جایگزین سرم جنین گاو مورد استفاده قرار گرفته اند؛ لیکن استفاده از آنها نیز با محدودیت هایی مواجه است. هدف از این طرح ارزیابی پلاکت با منشأ خون گاو به عنوان یک منبع ارزان قیمت و قابل دسترس جایگزین سرم جنین گاو است. در این طرح پس از مطالعه ی ویژگی ها و فاکتورهای رشد موجود در سرم جنین گاو، اثر پلاکت های خون گوساله (گاو) به دو روش (پلاسمای غنی از پلاکت و لیزات پلاکتی) بر رشد و قابلیت حیات سه رده ی سلولی منتخب بررسی و مقایسه گردیدند. نتایج نشان داد که پلاسمای غنی از پلاکت و لیزات پلاکتی توانسته اند در مقایسه با گروه کنترل قابلیت حیات سلول ها را افزایش دهند همچنین لیزات پلاکتی نیز در مقایسه با سرم جنین گاوی می تواند در غلظت های مورد مطالعه توانایی تشکیل کلونی را به طور معنی داری افزایش دهد.

رشد در بخش طیور به خاطر افزایش بروز و ظهور مجدد بیماری های ناشی از تکامل پاتوژن های مختلف ویروسی و استفاده از واکسن زنده به چالش کشیده شده است و با انبوهی از ضررهای اقتصادی ناشی از این بیماری ها مواجه شده است. برونشیت عفونی پرندگان (IB) به وسیله کرونا ویروس ایجاد می شود و در لیست بیماری های OIE قرار دارد و به وسیله درگیری های تنفسی، کلیوی و دستگاه ادراری تناسلی مشخص می شود و باعث مرگ ومیر بالایی می شود. بیماری برونشیت عفونی گسترش و شیوع شدید و خسارت انکار ناپذیر و بسیار زیادی بر پرورش طیور صنعتی در ایران و جهان دارد، بیماری آسیب های متنوعی بر رده های مختلف پرورش ماکیان اعم از گوشتی، تخم گذار و مادر می گذارد. همراهی این ویروس با سایر عوامل بیماری زا که موجب ایجاد کمپلکس های تنفسی و تشدید عفونت های ثانویه می شود، ضرر و زیان شدیدی را مخصوصا در طیور صنعتی به بار می آورد به حالتی که برونشیت عفونی تبدیل به مطرح ترین بیماری در طیور صنعتی در کشور گردیده است. با توجه به واگیری بالای ویروس و کاربرد گسترده واکسن ها به طرق مختلف، بروز تلفات سنگین و متغیر در ارتباط باIBV در کشور رخ می دهد و با توجه به این که استفاده از سویه های بومی هر منطقه می تواند کمک کننده باشد، طرح حاضر با هدف تعیین ژنوتیپ غالب ایران و تهیه واکسن کشته اتوژن از این طراحی و اجرا گردید. نتایج پژوهش حاضر نشان داد که سویه ی غالب کشور در حال حاضر واریانت 2 با شیوع 3/64% می باشد. از سویه ی حاضر با استفاده از دستورالعمل OIE و در شرایط آزمایشگاهی واکسن کشته تهیه گردید. مقایسه ی این واکسن با واکسن تجاری موجود نشان داد که واکسن آزمایشی قادر است محافظت جوجه ها در برابر برونشیت عفونی راافزایش دهد (05/0<p). بنابراین انتظار می رود شود با ترکیب این واکسن با سویه ی مادر M41 و تزریق آن در هنگام تولید بتوان گله را در برابر برونشیت عفونی محافظت کرد (تخمگذار و مادر ).

مقدمه: سرم جنین گاو بهترین سرم شناخته شده جهت کشت سلولی و ویروسی می باشد. این سرم بعلت داشتن مواد طبیعی لازم جهت رشد و بقای سلولها از اهمیت فوق العاده ای برخوردار می باشد و برای رشد اکثر سلولها بخوبی مورد استفاده قرار می گیرد و تا بحال سرمهای دیگر و مواد صناعی نتوانسته اند جایگزین مناسبی برای این ماده باشند. این سرم علاوه بر داشتن مواد محرک رشد سلولی واجد کمترین میزان آنتی بادی می باشد. سرم مذکور در آزمایشگاههای ویروس شناسی، آزمایشگاههای تشخیص، تولید واکسن، انتقال جنین، باروری خارج رحمی، آ‍زمایشگاههای ایمونولوژی و... بکار می رود و در کشور ما علاوه بر استفاده این سرم در آزمایشگاه های مختلف و در دانشگاهها بطور متداول در سازمان انتقال خون موسسه سرم سازی رازی، انستیتو پاستور و بانکهای سلولی مورد مصرف قرار می گیرد.هدف از انجام طرح: تا به حال این ماده بصورت آماده از کشورهای اروپایی و آمریکایی به قیمتهای بسیار گران وارد کشور می شد و از آنجایی که نگهداری و ارسال این ماده باید در دمای -20 درجه سانتی گراد صورت گیرد، علاوه بر قیمت سوم هزینه ارسال نیز بسیار سنگین می باشد. و سالانه میزان زیادی ارز از کشور بدین منظور خارج می شود.در ضمن بعضی از مراکز تحقیقاتی و آزمایشگاهی بعلت گران بودن ماده فوق اجبارا از سرم حیوانات بالغ همچون گاو استفاده می نمایند که ضمن اینکه محرک مناسبی جهت رشد نبوده گاهها باعث اشتباهاتی در نتایج آزمایشات می شود.

به منظور بررسی قابلیت پرواری و کیفیت لاشه گوساله های نر گاومیشهای آذربایجان غربی تعداد 12 راس گوساله نر گاومیش 9-7 ماهه با استفاده از یونجه خشک، سیلوی ذرت و کنسانتره بمدت 85 روز پروار شدند.وزن متوسط حیوانات در شروع آزمایش 124 کیلوگرم، وزن متوسط در آخر دوره پرواری 167.9 کیلوگرم، متوسط افزایش وزن روزانه 0.51 کیلوگرم، کل افزایش وزن در طور پرواربندی 43.8 کیلوگرم، مقدار ماده خشک غذای مصرف شده جهت یک کیلوگرم افزایش وزن 7.91 کیلوگرم، راندمان لاشه 48% و مساحت سطح ماهیچه 70.9 سانتیمتر بوده است.

استان لرستان با مساحتی حدود 28064 کیلومتر مربع در جنوب غربی ایران واقع شده است. برخی محققین این استان را «ایران کوچک» نامیده اند. چرا که تقریبا تمام تیپ های آب و هوای ایران در این استان یافت می شود. نتیجه این تنوع آب و هوایی، غنای گیاهی و جانوری است و اکثر گونه های کشور در این استان موجودند. لرستان می توانست یک هرباتوفون غنی باشد. اما در مقایسه با سایر نقاط کشور به ندرت مورد مطالعه قرار گرفته است. در این پژوهش فون خزنده گان استان مطالعه شده است. در این طرح سعی شده همه خزنده گان با روش های صحرایی متفاوت جمع آوری شود. بر اساس ویژگی های مورفولوژیک، 22 گونه سوسمار، 20 گونه مار و 2 گونه لاک پشت در استان لرستان شناسایی شد.