بیماری هاری به طور گسترده در تمامی استانهای ایران شایع است. این مطالعه دربرگیرنده فن Polymerase   Chain   Reaction   (PCR) برای تشخیص و همچنین روش Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) برای تعیین تیپ های مخلتف ویروس هاری و تمایز آنها با ویروس های وابسته به هاری می باشد. علاوه براین PCR به طور حتم وسیله قوی برای مطالعه اپیدمیولوژیک این ویروس و تجزیه و تحلیل سویه های مختلف ویروس هاری بدون استفاده از کشت سلول می باشد.  در این مطالعه، 50 نمونه ویروس هاری جداشده از مغز میزبانهای مختلف دریافتی از شهرستانهای مختلف کشور به روش RFLP بر روی ژن y که ناحیه متغیر ژنوم این ویروس است مورد بررسی قرارگرفت. نتایج نشان دهنده آن است که این ویروس ها به گروه ژنوتیپ/سروتیپ 1 تعلق دارند.

1مقدمه: از حدود سه میلیارد جفت باز تشکیل دهنده ژنوم انسان چیزی در حدود یک درصد از فردی به فرد دیگر تنوع ژنتیکی وجود دارد که ویژگی های فیزیکی، روانشناختی و استعداد به بیماری ها را تعیین می کند. در میان انواع تنوع ژنتیکی ، پلی مورفیسم های تک نوکلئوتیدی یکی از مهم ترین تفاوت های ژنتیکی بین دو انسان می باشد. تنوع پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی می تواند در ناحیه پروموتر، اگزون ها، اینترون ها، نواحی غیرقابل ترجمه و سایر نواحی DNA(Deoxyribonucleic acid) قرار بگیرد. در حالی که تنوع در ناحیه اگزون بسته به اینکه ساختار پروتئین را تغییر دهد یا بر کینتیک ترجمه تاثیرگذار باشد می­تواند استعداد به بیماری ها را تغییر دهد. تنوع در ناحیه پ‍‍‍‍‍‍‍روموتر می تواند بر، برهمکنش ژنتیکی و اپی ژنتیکی تاثیرگذار باشد. همچنین تنوع در ناحیه پروموتر می تواند وضعیت متیلاسیون  DNAرا تحت تاثیر قرار دهد. تنوع پلی مورفیک ناحیه اینترون می تواند بر پیرایشmRNA(Messenger ribonucleic acid) و عملکرد عناصر تنظیمی cis تاثیرگذار باشد. تنوع در ناحیه  UTR 5'(Untranslated region 5')سبب تغییر در کارایی ترجمه می شود.در حالی که تغییرUTR 3'(Untranslated region 3') میزان اتصال micro Ribonucleic acid ها به جایگاه خود را تحت تاثیر قرار می دهد. در برخی موارد تنوع درtRNA(Transfer ribonucleic acid)و rRNA(Ribosomal ribonucleic acid) بر عملکرد این عناصرcis تنظیمی تاثیرگذار هستند. نتیجه گیری: از دیدگاه بالینی شناخت این نوع از تنوع ژنتیکی می تواند به روند درمان، مدیریت بیماران و درک پیش آگهی بر اساس این جایگاه ها کمک کند. پزشکی خصوصی یا شخصی سازی شده نیز اساسا بر تنوع ژنتیکی مبتنی است. در این مقاله به مرور انواع تنوع ژنتیکی تک نوکلوتیدی و ارائه مثال هایی از انواع سرطان، بیماری های نرولوژیک و ایمونولوژیک پرداختیم.

هدف: دو رگ گیری فلوئورسانس درجا (FISH)، شناسایی توالیهای خاص با طولهای متفاوت را در نواحی کروموزومی یا کل کروموزوم در سلولهای اینترفاز یا متافاز میسر می سازد. پیشرفتهای جدید در این فن آوری موجب نقشه برداری سریع و تعیین موقعیت قطعه های DNA بر روی یک باند کروموزوم متافازی می شود. روش FISH مبتنی بر چند مرحله است که شامل آماده سازی و نشاندار کردن پروب، دو رگ گیری پروب و آماده سازی کروموزوم و آشکارسازی نشانه ها و تصویرگیری است. در این تحقیق با استفاده از این روش سلولهای لنفوبلاستوییدی اتاکسی تلانژکتیازی (A-T) که به عوامل کلاستوژن و موتاژن فیزیکی و شیمیایی حساسیت بیشتری نسبت به سلولهای نرمال نشان می دهند مورد بررسی قرار گرفت.نوع مطالعه: مطالعه تجربیمواد و روشها: سلولهای A-T و نرمال در محیط RPMI-1640 کشت داده شد و تحت تابش اشعه گاما در مرحله G1 و G2 چرخه سلول قرار گرفت. پس از تیمار با دموکلسین و آماده سازی متافازها به روش استاندارد، لام میکروسکوپی تهیه شد. برای بررسی کروموزومهای 1، 4، 7 و 14 این سلولها با استفاده از پروب کروموزوم کامل روش FISH انجام شد. برای هر نمونه با استفاده از میکروسکوپ فلوئورسانس Zeiss متصل به رایانه حداقل 50 متافاز مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: مشاهدات مبین آن است که فراوانی ناهنجاریهای کروموزومی در سلولهای A-T و نرمال قبل و بعد از تابش گیری برای کروموزومهای مورد بررسی به طور کلی کم بوده است. به هر حال رخداد فراوانی بیشتر آسیبهای کروموزومی در سلولهای A-T شامل جا به جایی، تریزومی، جا به جایی روبرتسونی و شکست کروماتیدی مشهود است.نتیجه گیری: در روشهای متداول سیتوژنتیکی، مشاهده تغییرات متفاوت کروموزومی همیشه با انجام یک روش میسر نیست. حساسیت آشکارسازی روش FISH به کروموزومهای رنگ آمیزی شده محدود می شود اما همانگونه که برای سلولهای A-T مشاهده شد، FISH یکی از موثرترین روشهای بررسی انواع تغییرات کروموزومی پایدار و ناپایدار محسوب می شود. این روش نه تنها می تواند کاربرد گسترده ای در نقشه برداری ژنوم انسان و دیگر ارگانیسمها داشته باشد، بلکه می تواند در سیتوژنتیک بالینی، ژنتیک سلولهای سوماتیک، تشخیص سرطان و بررسی های بیان ژن نقش مهمی داشته باشد.

بیماری تب برفکی یک بیماری حاد و شدیدا مسری دامهای زوج سم است. بیماری تب برفکی موجب خسارات اقتصادی مهمی در صنعت دامداری می گردد. واکسیناسیون همه دامهای حساس به ویروس تب برفکی اساس تمامی اقدامات بهداشتی برای کنترل و ریشه کنی بیماری است. روشهای جاری تولید واکسن با مشکلات چندی همراه است زیرا کشت و دستکاری حجم بالایی از ویروس حاد هزینه بر بوده و خطر انتشار ویروس حاد را در بر دارد.ویروسهای عامل بیماری تب برفکی جنس آفتوویروس خانواده پیکورناویریده را تشکیل می دهند. مانند سایر پیکورناویروسها ژنوم ویروس RNA تک رشته ای با پولاریتی مثبت و حدود 8500 نوکلئوئید می باشد. ژنوم ویروس توسط یک کپسید بیست وجهی که متشکل از 60 کپی از هر یک از چهار پلی پپتید VP1-VP4 احاطه شده است. در بین این پروتئین ها VP1 از اهمیت ویژه ای برخوردار است، زیرا شاخصهای اصلی پادگنی ویروس را که بر علیه آنها پادگنهای خنثی کننده ساخته می شوند در بر دارد. کلون نمودن و بیان VP1 در سیستمهای متفاوتی گزارش شده است. نتایج این تحقیقات نشان داده اند که VP1 پادگن موثری است. این پروژه سنتز cDNA دو رشته ای ژن VP1 سروتیپ O1/Iran ویروس تب برفکی و کلون نمودن آن را با استفاده از روش RT-PCR گزارش می کند.

انسان ها همانند سایر موجودات زنده دارای تنوع ژنتیکی هستند. بدین معنی که جمعیت ها در تکرار توالیهای DNA با یکدیگر اختلاف دارند. این پدیده منشا ساخت سلاح های مخربی تحت عنوان سلاح های ژنتیکی قرار گیرد. این سلاح ها روی ژنوم ملتها، نژادها، جمعیت ها و یا گروه های خاص اثر می گذارند و بر اساس اهداف خود در ژنوم انسان ها ممکن است باعث معلولیت های جسمی و یا ذهنی شده و یا اینکه سبب نابودی گروه خاصی از انسان ها شود. اولین قدم برای ساخت سلاح های ژنتیکی تهیه نقشه ژنی (ژنوم) ملت های مختلف می باشد که تاکنون در حدود 90 درصد از نقشه ژنوم عمومی ساخته شده و انتظار می رود تا سال 2005 بطور کامل شناخته و طراحی شود. پس از ترسیم این نقشه می توان تفاوت های موجود در کدهای ژنوم ملل مختلف را شناسایی نمود و در جهت ایجاد اختلال در فرایند های ژنتیکی آن، کدهای ویژه ای را بداخل ژنوم آنها تزریق کرده و یا اینکه از بیماری های ژنتیکی موجود در آن جمعیت سود جسته و در جهت ازدیاد ژنتیکی آن بیماری برآیند. برای این منظور ناقلین ویروسی(Viral Vector) ، پلاسمیدها (Plasmid) و سایر حامل های ژنی می توانند مورد استفاده قرار گیرند.

بیست و یک رقم و لاین امید بخش از گندم های دوروم از نظر پروتئین های ذخیره بذر در مکان های ژنی  Glu-A1، Glu-B1 و Glu-B3/Gli-B1 مورد مطالعه قرار گرفتند. اجزا گلیادین ها و زیر واحدهای گلوتنین های سنگین(HMW-G.S.)  و سبک (LMW-G.S.) برای مکانهای ژنی فوق الذکر بر اساس سیستم های نامگذاری بین المللی، شناسایی و تعیین گردیدند. طرح های الکتروفورزی پروتئین های ذخیره بذر در غالب ارقام، یکنواختی نشان دادند. در بعضی موارد نیز وجود ناخالصی درون لاین ها و ارقام مشاهده گردید. در رقم لیکان(Lican) در یک ژنوتیپ ناخالص (یک بذر) دو جز با تحرک کند در منطقه امگاگلیادین مشاهده شد که مشخصه ژنوم D در گندم نان می باشند. در تمام لاین ها و ارقام مورد بررسی، به جز رقم برونته (Bronte) نوع یک گلوتنین های سبک (LMW-1) همراه با گاماگلیادین 42 و نوع دو (LMW-2) با گاماگلیادین 45 همراه بودند. در حالی که در رقم ایتالیایی برونته که حاصل تلاقی رقم بریللو (نوترکیبLMW-2/γ42,ω35;  ) و لاتینو (LMW-1/γ42,ω33-35-38) است گاماگلیادین 42 همراه با امگاگلیادین 35 و LMW-2 مشاهده شد. دراین رقم از 24 بذر مطالعه شده در دو بذر ترکیب زیر واحدهای گلوتنین های سبک و اجزای گلیادین ها مشابه رقم لاتینو بود. در تمام لاین ها و ارقام مورد مطالعه در محل ژنی Glu-Alx زیر واحد نول مشاهده شد. درحالی که در لاین شماره 7 (MRB5895) دراین مکان ژنی، زیر واحدی با تحرک کند مشخص گردید که قبلا گزارش نشده بود و با عنوان زیر واحد 1.2 نام گذاری شد. درمکان ژنیGlu-B1  سه نوع زیر واحد 8+7، 15+7،و 20 مشاهده گردید. درگروه B از زیر واحدهای گلوتنین های سبک، از 21لاین و رقم مورد مطالعه پنج مورد زیر واحدهای گلوتنین های سبک نوع LMW-1 و 16مورد دیگر نوع LMW-2 را نشان دادند. نتایح این بررسی می تواند در برنامه های به نژادی گندم دوروم درایجاد خلوص ارقام و همچنین اصلاح کیفیت آرد، مورد استفاده قرار گیرد.

بیش از 90 درصد ضایعات سرویکس بعلت ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) است ولی اطلاعات کمی در ارتباط با نقش ژنوم ویروس و شناسایی سریع انواع متفاوت آن در دست می باشد. در این تحقیق تنوع تیپ های ویروس HPV با استفاده از روش هیبریدیزاسیون ملکولی(ISH)  Insitu Hybridization تعیین گردیده است. از ضایعات سرویکس 60 بیمار مبتلا به کانسر سرویکس بیوپسی تهیه و در فرمالین 10% ثابت و مقاطع پارافینی مورد مطالعه پاتولوژی قرار گرفت. تکنیکISH (Insitu Hybridization)  با مواد و پروب های نشاندار شده با بیوتین (biotinylated probes) انجام گردید. حضور ژنوم ویروس HPV و تیپ های مختلف آن مورد شناسایی و تعیین شد. 42 مورد از 60 نمونه مورد مطالعه (70%) از نظر آلودگی با HPV مثبت بود و از 18 مورد (30%) ژنوم ویروس جدا نگردید. تیپ های ویروسHPV در سه گروه:6.11، 16.18 و 31.33.51 مورد مطالعه قرار گرفت که 13 نمونه (21.66%) نسبت به گروه 6.11 و تعداد 14 مورد (23.33%) نسبت به گروه 16.18 و در نزد 15 بیمار (25%) نسبت به گروه 31.33.51 واکنش مثبت با روش هیبریدیزاسیون ملکولی مشاهده گردید. این یافته ها نشان می دهد،  مطالعات ملکولی در شناسایی ژنوم ویروسHPV امکان پذیر بوده و از سرطان های دهانه رحم بانوان ایرانی انواع مختلف ویروسHPV به فراوانی جدا می گردد.