دنیای میکروب ها
سال:1389 | دوره:3 | شماره:4 (پیاپی 9) |تعداد مقالات:7

سابقه و هدف: ویروس آنفلوانزای H9N2 یکی از ویروس های با بیماری زایی کم در پرندگان می باشد. این ویروس به عنوان بومی ایران از سال 1377 صنعت طیور را درگیر کرده و تاکنون خسارات سنگین و قابل ملاحظه ای را موجب شده است. واکسیناسیون، یکی از راهبردهای مقابله با این ویروس می باشد. هدف از این پژوهش، بررسی توانایی واکسن کشته روغنی آنفلوانزا (ساخت موسسه واکسن وسرم سازی رازی) در مقابله با جدایه های در حال گردش این ویروس در شیراز بود.مواد و روش ها: در این مطالعه 50 قطعه جوجه به 5 گروه 10 تایی شامل گروه تست و گروه کنترل تقسیم شدند. 40 قطعه جوجه (گروه 1 تا 4) با واکسن کشته روغنی آنفلوانزا، ساخت موسسه واکسن و سرم سازی رازی واکسینه شدند و 10 قطعه جوجه به عنوان گروه کنترل واکسنی دریافت نکردند. دو هفته پس از واکسیناسیون همه گروه های واکسینه و کنترل، با ویروسهای آنفلوانزای H9N2 جدا شده از مرغداری های شیراز مربوط به سال 1389 تلقیح شدند. نمونه های سواب نای و کلواک در روزهای 1، 3، 5، 7، 9 و 11 پس از تلقیح، جمع آوری و فرایندهای آماده سازی جهت جداسازی ویروس انجام گردید.یافته ها: نتایج جداسازی ویروس در گروه های واکسینه و کنترل نشان داد که انتشار ویروس از طریق نای و کلواک در گروه 1، از روز پنجم و در گروههای 2، 3 و 4 از روز هفتم پس از تلقیح کاهش یافت. اما در گروه کنترل تا روز یازدهم پس از تلقیح نیز انتشار ویروس ادامه داشت.نتیجه گیری: نتایج نشان داد که واکسن آنفلوانزای کشته روغنی در کاهش انتشار و رونویسی آنفلوانزای طیور موثر می باشد.

سابقه و هدف: تیلریا لستوکاردی (Theileria lestoquardi) از مهم ترین عوامل تیلریوز بدخیم در گوسفند و بز است که توسط کنه های سخت به میزبان نهایی منتقل می گردد. این تک یاخته تنها یوکاریوتی است که قادر به ترانسفورم کردن سلول میزبان می باشد. این پژوهش، با هدف تهیه استابلیت حاوی اسپروزوایت تیلریا لستوکاردی و استفاده از آن برای تولید رده سلولی حاوی شایزونت تیلریا لستوکاردی در شرایط آزمایشگاهی انجام شد.مواد و روش ها: پس از آلوده کردن کنه های نوچه پرورشی از طریق قرار دادن آنها بر روی گوش گوسفند ناقل تیلریا لستوکاردی و هموژن کردن کنه های بالغ آلوده، استابلیت تیلریا لستوکاردی تهیه گردید. در مرحله بعد لنفوسیت های جمع آوری شده از یک گوسفند سالم در مجاورت استابلیت تهیه شده به منظور تولید سلول ترانسفورم شده حاوی تیلریا لستوکاردی کشت داده شد.یافته ها: این پژوهش منجر به تولید لنفوسیت ترانسفورم شده با تیلریا لستوکاردی در شرایط آزمایشگاهی گردید. این رده سلولی بوکت نامیده شد و نتیجه توالی ژنی آن در ژن بانک با شماره دسترسی GU233776ثبت گردید.نتیجه گیری: رده سلولی بوکت تولید شده در این پژوهش، دومین لنفوسیت گوسفندی حاوی تیلریا لستوکاردی در ایران می باشد که به صورت رده سلولی دایمی درآمده است.

سابقه و هدف: باکتری های اسید لاکتیک گروهی از باکتری های گرم مثبت، غیر متحرک و بدون اسپور می باشند که با تولید محصولات تخمیری و اسید لاکتیک اثرات مفیدی بر سلامت میزبان ایجاد می کنند. هدف از این پژوهش، جداسازی سویه های لاکتوباسیلوس از نمونه های مدفوعی کودکان و بررسی خاصیت ضد میکروبی آن ها علیه برخی از باکتری های بیماری زای دستگاه گوارش از جمله اشریشیا کلی، سالمونلا تیفی موریوم و هلیکوباکتر پیلوری بود.مواد و روش ها: به منظور جداسازی لاکتوباسیلوس ها از محیط MRS Agar استفاده شد. شناسایی لاکتوباسیلوس ها بر اساس مرفولوژی، خصوصیات بیوشیمیایی و فیزیولوژیک صورت گرفت. اثر بازدارندگی لاکتوباسیلوس های جدا شده بر رشد باکتری های بیماری زا با دو روش چاهک و دیسک صورت گرفت. سویه های لاکتوباسیلوس جدا شده پس از کشت در محیط MRS broth سانتریفیوژ گردید. در پلیت های MRS Agar پس از کشت چمنی باکتری های پاتوژن، مقدار 100 میکرولیتر از محلول رویی حاصل از رشد لاکتوباسیلوس ها به چاهک ها تلقیح و هاله عدم رشد پس از 48-24 ساعت بررسی گردید.یافته ها: از 40 نمونه لاکتوباسیلوس جداشده، 19 مورد (47.50%) دارای اثر بازدارندگی رشد علیه باکتری های بیماری زا بود. بیشترین سویه های شناسایی شده دارای اثر بازدارندگی، شامل لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس فرمنتوم و لاکتوباسیلوس رامنوسوس بود. بیشترین اثربازدارندگی جدایه های لاکتوباسیلوس علیه اشریشیاکلی و سالمونلا مشاهده گردید. در تمامی نمونه ها، لاکتوباسیلوس رامنوسوس و لاکتوباسیلوس فرمنتوم بیشترین اثربازدارندگی رشد را روی سویه های پاتوژن داشتند.نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که سویه های لاکتوباسیلوس جدا شده از مدفوع برای درمان اسهال و سایر بیماری های گوارشی می تواند مناسب باشد. از این رو به نظر می رسد که استفاده از این باکتری ها در محصولات لبنی می تواند در پیشگیری و درمان سودمند باشد.

سابقه و هدف: اسهال ناشی از اشریشیاکلی K99 در گوساله ها به ویژه در نخستین روزهای پس از تولد، به علت تلفات و خسارات اقتصادی حاصله از اهمیت زیادی برخوردار است. در این مطالعه شیوع ژن های عوامل بیماریزایی اشریشیاکلیK99 با استفاده از تکنیک Multiplex PCR و سپس الگوی پروتئینی این باکتری ها با روش های مختلف بید، اوره و پودر شیشه با SDS- PAGE ارزیابی گردید.موادوروش ها: 300 سواب رکتوم از گوساله های 1 تا 30 روزه مبتلا به اسهال طی سال های 1390-1389 جمع آوری شد. یک بخش جهت انجام Multiplex PCR برای شناسایی ژن های عوامل بیماریزایی 99K،F41  و STa استفاده گردید و بخش دیگر جهت کشت بر روی محیط های مختلف جهت جداسازی اشریشیا کلی و SDS-PAGE مورد استفاده قرار گرفت.یافته ها: نتایج PCR نشان داد از 200 اشریشیاکلی جداشده، 16 مورد دارای ژن های عوامل بیماریزایی K99، 41 F و STa می باشند و در هیچکدام از نمونه های جدا شده از گوساله ها سم حساس به حرارت (LT) وجود نداشت. همچنین نتایج حاصل از SDS-PAGE نشان داد که الگوهای پروتئینی باکتری های مختلف اشریشیا کلی متفاوت می باشد. نتایج SDS-PAGE حاصل از ستون بیانگر وجود تنها یک باند مربوط به آنتی ژن K99 بود.نتیجه گیری: مشاهده فاکتورهای حدت باکتری های اشریشیا کلی K99 جدا شده نشان داد که همه باکتری ها حداقل دارای سه ژن K99، F41 و Sta می باشند. با وجود این که از نظر مولکولی تفاوت معنی داری در بین نمونه ها مشاهده نشد. اما از نظر الگوی پروتئینی تفاوت های قابل ملاحظه ای در بین باکتری های جدا شده وجود داشت. بنابراین می توان نتیجه گرفت که باکتری های متفاوت الگوهای پروتئینی مختلف و در نتیجه بیماریزایی متفاوتی دارند.

سابقه و هدف: اشریشیا کلی عامل بیش از 80% از عفونت های ادراری در تمام گروه های سنی جامعه است. سویه های اشریشیاکلی به چهار گروه فیلوژنتیک تقسیم می شوند. اغلب جدایه های های بیماریزای خارج روده ای متعلق به گروه B2 وD هستند. هدف از این پژوهش، تعیین گروه های فیلوژنتیک اشریشیاکلی جدا شده از بیماران با عفونت ادراری در جنوب ایران بود.مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی _ توصیفی بر روی اشریشیاکلی جداشده از کشت ادرار بیماران مراجعه کننده به آزمایشگاه بیمارستان پیمانیه جهرم در سال 1389 انجام شد. از آزمون های بیوشیمیایی برای تعیین هویت باکتری های جداشده استفاده شد. سپس طبقه بندی گروه های فیلوژنتیک سویه های اشریشیاکلی با استفاده ازپرایمرهای اختصاصی ChuA وyjaA  و TspE4.C2 و آزمون PCR انجام شد.یافته ها: از 60 باکتری اشریشیاکلی شناسایی شده، 47 مورد (78.34%) مربوط به زنان و 13 مورد (21.76%) مربوط به مردان بود. شایع ترین گروه های فیلوژنتیک شناسایی شدهD ،A و B1 به ترتیب با فراوانی 70%، 23.3% و 6.7% بودند. اما درهیچ کدام از نمونه های مورد بررسی گروه B2 شناسایی نشد. همچنین بین گروه فیلوژنتیکی و متغیرهای سن، جنس، سابقه عفونت ادراری، سابقه مصرف آنتی بیوتیک و سابقه بستری شدن در بیمارستان ارتباط معناداری مشاهده نشد.نتیجه گیری: اشریشیاکلی جدا شده از عفونت های دستگاه ادراری در این منطقه، بیشتر متعلق به گروه فیلوژنتیک D بودند که در مقایسه با سایر مناطق از نظر نوع گروه فیلوژنتیکی متفاوت می باشند.

سابقه و هدف: یکی از بهترین راه های کنترل بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه گوجه فرنگی ناشی از F. oxysporum f.sp. radicis-lycopersici استفاده از ارقام مقاوم می باشد. نشانگرهای مولکولی دارای همبستگی با ژن مقاومت، می توانند در برنامه های اصلاحی گوجه فرنگی مورد استفاده قرار گیرند. هدف از این پژوهش، شناسایی ارقام مقاوم (دارا بودن ژن (Frl و حساس 27 رقم گیاه گوجه فرنگی با استفاده از نشانگر RAPD بود.مواد و روش ها: در ابتدا DNA مربوط به 27 رقم گیاه گوجه فرنگی با استفاده از روش CTAB استخراج شد. از تکنیک PCR برای شناسایی F. oxysporum f.sp. radicis-lycopersici استفاده شد. سپس برای تکثیر ژن مقاومت Frl از نشانگر RAPD (UBC 194) استفاده گردید. نتایج به کمک آزمون بیماری زایی تایید شدند.یافته ها: در این مطالعه با استفاده از نشانگر UBC 194 مشخص گردید که از 27 رقم و هیبرید مورد مطالعه، باند شاخص 590 جفت بازی (وجود ژن مقاومت (Frl در 20 رقم و هیبرید تشکیل شده بود. ارزیابی آزمون بیماری زایی نشان داد ارقامی از گیاه گوجه فرنگی که قطعه مربوط به ژن مقاومت Frl را تکثیر کرده بودند، فاقد هر نوع علایم بیماری بودند. اما گیاهانی که این قطعه ژنی را نداشتند، علایم بیماری را با شدت های مختلف نشان می دادند.نتیجه گیری: با کاشت ارقام مقاوم یافت شده در این پژوهش در مناطق آلوده، می توان بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه را بدون استفاده از سموم شیمیایی کنترل نمود.