مقدمه: در سال های اخیر به دلیل افزایش مصرف آفتکش ها در محصولات کشاورزی و به طبع ورود آن به زنجیره غدایی انسان موجب افزایش نگرانی هایی در مورد سلامت غذا، در بین مردم شده است. ازاین رو، هدف از انجام این پژوهش معتبرسازی روش آنالیز باقی مانده 25 آفت کش در برنج با استفاده از دستگاه LC-MS/MSست. روش کار: در این پژوهش یک روش آنالیز همزمان برای تعیین مقدار 25 نوع آفتکش پر مصرف در برنج با استفاده از دستگاه کروماتوگرافی مایع با طیف سنج جرمی متوالی راه اندازی شد. مراحل آماده سازی نمونه ها بر اساس روش بهینه شده QuEChERS، با استفاده از استخراج بافری و پاکسازی بر اساس متد d-SPE انجام شد. تکنیک LC-MS/MS با یونیزاسیون الکترواسپری در مد مثبت برای تعیین همزمان 25 نوع آفتکش در یک اجرای 20 دقیقه ای و در برنامه MRM بکار گرفته شد. نتایج: حد تعیین مقدار (LOQ) و حد تشخیص (LOD) برای تمامی آفتکش ها به ترتیب، 25 و 8 نانوگرم/گرم بدست آمد. 30 نمونه جمع آوری شده برنج وارداتی از سطح شهر تهران جمع آوری و آنالیز شدند. از تعداد کل 30 نمونه، 9 نمونه یعنی 30٪,نمونه ها به سموم Triazophos, Phoratesulfoxide, Fosthiazate, Formetanate, Fonofos, Cyphenothrin آلودگی داشتند؛ که از این تعداد 4 نمونه بالاتر از MRL تعیین شده توسط سازمان استاندار ملی ایران بود.