زمینه و هدف: هدف از این مقاله شناسایی و تمایز الگوی ژنتیکی سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس بیماران مسلول با استفاده از پلی مرفیسم (DRDirect Repeat) با روش اسپولیگوتایپینگ می باشد.روش بررسی: کشت مثبت متلعق به 238 بیمارمبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفت. جداسازی اولیه سویه های مایکوباکتریوم باروش پتروف 4 درصد و با استفاده از محیط جنسون (Lowenstein Jensen LJ) انجام شد و برای شناسایی سویه ها از آزمایشات بیوشیمیایی از قبیل، نیاسین، فعالیت کاتالاز، احیای نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (2/0 میکروگرم در میلی لیتر)، ریفامپین 40 میکروگرم در میلی لیتر ، استرپتومایسین (10 میکروگرم در میلی لیتر) و اتامبوتول (2میکروگرم در میلی لیتر) به روش تناسبی انجام و سویه ها به سه گروه حساس، MDR و غیر MDR تقسیم بندی شدند. سپس DNA از کلنی های مثبت با روش CTAB استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش PCR تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه تکثیر شده، عمل هیبریداسیون با آنزیم استرپتاویدین پر اکسیداز به روشLine Reverse Blot صورت گرفت. با اضافه کردن مقداری لومینسانس و قرار دادن غشا بر روی فیلم X-ray، رادیوگرافی انجام گردید.یافته ها: سویه ها به 9 دسته (CAS1,CAS2,Beijing , Haarlem , U , T1,T2 , EAI2 EAI3) متمایز شدند، که بیشترین تعداد مربوط به سویه Haarlem 27)درصد، 238/66) وCAS1 25)درصد، 238/60) می باشد. همچنین با این روش دو سویه متعلق به مایکوباکتریوم بویس شناسایی شد.نتیجه گیری: این روش سریع، ساده و دارای حساسیت بالا برای تمایز سویه های مایکوباکتریوم توبرکوزیس و مطالعات اپیدمیولوژی می باشد.