پاتوبیولوژی مقایسه ای ایران
سال:1394 | دوره:12 (دوره جدید) | شماره:3 (پیاپی 50) |تعداد مقالات:7

تب کیو بیماری مشترک انسان و دام با انتشار جهانی است که توسط نوعی ریکتزیا به نام کوکسیلابورنتی ایجاد می شود. جرم عامل بیماری از طریق جنین سقط شده، ادرار، مدفوع و شیر دام آلوده دفع می شود. بنابراین مصرف شیر غیر پاستوریزه آلوده می تواند منبع عفونت برای انسان باشد. در این مطالعه از مجموع 50 گاوداری های شیری اطراف تهران تعداد 150 نمونه شیر از تانک مخزن دریافت گردید و تمامی نمونه ها با استفاده از پرایمرهای ژن ترانسپوزان IS1111a اختصاصی کوکسیلا بورنتی، مورد آزمایش PCR قرار گرفتند. که از کل نمونه های مورد آزمایش 18 نمونه از نظر کوکسیلابورنتی مثبت بودند که به طور تصادفی 12 نمونه انتخاب و برای توالی یابی به شرکت ماکروژن کره ارسال گردید. نتایج این پژوهش نشان داد که شیر گاو یکی از مخازن بالقوه کوکسیلابورنتی در ایران است. هدف از این مطالعه آنالیز فیلوژنتیک کوکسیلابورنتی های جدا شده از شیر گاوداری های استان تهران بود که پس از کسب توالی ژن مورد نظر باکتری کوکسیلا بورنتی، تمامی توالی های به دست آمده با توالی های موجود در بانک ژن مقایسه گردید. حاصل این مقایسه نشان داد که ژن ترانسپوزان IS1111A کوکسیلا بورنتی جداشده از شیر گاوهای گاوداری های اطراف تهران بیش از 99% با توالی های موجود در بانک ژن قرابت دارد.

نقطه شروع ‏بسیاری از روش های بیولوژی مولکولی، ‏ضرورت جداسازی DNA‏ با کیفیت عالی است. معمولا کیفیت DNA‏ ‏با ‏عواملی از قبیل عدم آلودگی ناشی ‏ازRNA ‎، پروتئین، لیپید و سایر ساختارهائی که برای آنزیم های برشی و ‏پلی مرازها مزاحمت ایجاد می کنند ‏سنجیده می شود‎‏. معمولا DNA ‏استخراج ‏شده‏ از بلوک های پارافین و بافت های فیکس شده در فرمالین بخاطر اثرات تخریبی وارد شده بر ‏DNA، از کیفیت مطلوبی برخوردار نیستند. هدف از مطالعه، معرفی روش کارآمد در استخراج DNA از بافت های نگهداری شده در فرمالین می باشد. جهت استخراج ‏DNA‏ از بافت های نگهداری شده در فرمالین، دو پروتکل مختلف از کیت Bioneer و کیت طراحی شده General Genomic Extraction ‏توسط نویسندگان مقاله مورد مقایسه قرار گرفتند. ارزیابی کمی و کیفی بر روی ‏DNA‏ های استخراج شده انجام گرفت. جهت تایید و ارزیابی DNA استخراج شده، واکنش ‏PCR‏ با پرایمرهای ژن بتاگلوبین بر روی تمام نمونه ها انجام شد.‏ نتایج آزمایش کیفی و کمی نشان داد که DNA استخراج شده با استفاده از کیت General Genomic Extraction از کمیت و کیفیت مطلوبتری در مقایسه با کیت Bioneer برخوردار بود. میزان تکثیر نمونه ها با پرایمر بتاگلوبین، حاکی از غلظت و خلوص بیشتر DNA استخراج شده با کیت مذکور در مقایسه با کیت Bioneer بود. با توجه به آسیب ناشی از نگهداری بافت در فرمالین، کیت General Genomic Extraction کارایی بیشتری در استخراج DNA داشت. این روش می تواند برای استخراج ‏DNA‏ از بافت های نگهداری شده در فرمالین و بلوک های پارافین به صورت روتین در آزمایشات تحقیقاتی و بالینی مورد استفاده قرار گیرد.

تومورهای غدد پستانی، شایع ترین تومورها از بین انواع تومورها هستند که کل سگ های ماده را تحت تاثیر قرار می دهند. جهش های ایجاد شده در ژن های وابسته به سرطان و تغییر اکسیداتیو پروتئین ها و آلدئیدهای واکنش پذیر از رخدادهای کلیدی بوده که می توانند مخاطره سرطان را افزایش دهند. نقش آنتی اکسیدان ها در پیشگیری و درمان سرطان ها توسط مطالعات بسیاری گزارش شده است. این مطالعه با هدف بررسی اثر آلفاتوکوفرول بر تکثیر رده سلولی سرطانی پستان سگ (CF41.Mg) انجام شد. در این مطالعه، رده سلولی  CF41.Mgدر محیط (Roswell Park Memorial Institute medium) RPMI 1640 کشت داده شد. سپس اثرات ضدتکثیری غلظت های مختلف آلفاتوکوفرول در زمان های 24، 48 و 72 ساعت با استفاده از سنجش MTT (3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-tetrazolium bromide)، مورد بررسی قرار گرفت. آلفاتوکوفرول در غلظت 100 میکرومولار پس از مدت 72 ساعت بیشترین تاثیر ضدتکثیری را داشت. در این مطالعه آلفاتوکوفرول در مدت 48 ساعت تاثیر کمتری را نشان داد. نتایج مطالعه، تایید کننده اثر مهاری آلفاتوکوفرول بر تکثیر رده سلولی CF41.Mg می باشد.

خطرات استفاده از داروهای شیمیایی و نگهدارنده های صناعی مواد غذایی، افزایش عفونت های میکروبی مقاوم به پادزیست ها، توجه به بیماری های حائز اهمیت قارچی همچون آسپرژیلوزیس و مایکوتوکسیکوزیس و هم چنین فساد کپکی محصولات کشاورزی و از سوی دیگر، ظرفیت اسانس ها در مقابله با میکروارگانیسم ها بستر مناسبی را برای تحقیق فراهم نموده است. برای این منظور، فعالیت ضد قارچی اسانس 3 گیاه آویشن شیرازی، زیره سبز و میخک هندی در مقایسه با فرمالین بر قارچ آسپرژیلوس پارازیتیکوس (Aspergillus parasiticus) مورد مطالعه قرار گرفت. برای تعیین حداقل غلظت بازدارندگی اسانس ها و میانگین قطر هاله رشد قارچ و درصد بازدارندگی اسانس ها، روش مسموم کردن محیط کشت جامد استفاده شد. نتایج نشان داد که اسانس های مورد آزمایش در تمام غلظت ها دارای اثر بازدارندگی بوده و توانایی مهار رشد قارچ اسانس ها بیشتر از قارچ کش شیمیایی (فرمالین) بود. بیشترین و کمترین قطر هاله رشد برای غلظت 125mL/L پس از 8 روز انکوباسیون مربوط به فرمالین و میخک هندی به ترتیب با 62.8 و14.1  میلی متر بود. میخک هندی و زیره سبز با غلظت 250mL/L و آویشن شیرازی و فرمالین با غلظت 500mL/L قادر به مهار کامل رشد قارچ آسپرژیلوس پارازیتیکوس شدند. بنابراین اسانس های میخک هندی و زیره سبز با درصد بازدارندگی بالا به ترتیب به عنوان بهترین اسانس ها برای کنترل رشد قارچ آسپرژیلوس پارازیتیکوس به جای استفاده از قارچ کش های شیمیایی، توصیه می شوند.

لرنئا سیپریناسه آ معمولا به نام کرم قلابدار شناخته می شود. نکروز عضلات، خونریزی، التهاب، و چرکی شدن جراحات ایجادشده معمول آن است. جراحات حاد معمولا در صورت وجود چندین لرنئا با هم در یک ماهی بوجود می آید. نکروز بافتی باعث بوجود آمدن صدمات جدی شده و می تواند به طور ثانویه بوسیله باکتری ها یا قارچ ها مورد تهاجم قرار گیرد. التهاب و التیام بعد از آن در اطراف محل ورود انگل، بدن انگل را کپسوله می کند. این تحقیق به منظور بررسی جراحات آسیب شناسی انگل لرنئا بر روی ماهی فیتوفاگ و آمور انجام گرفت. بدین منظور 80 ماهی از چهار مزرعه و به روش تصادفی خوشه ای (از هر مزرعه 20 نمونه) که وزن ماهی های آن بالای 150 گرم باشد با استفاده از تور دست افشان (ماشک) صید گردید. ماهی ها در فصل تابستان و از شهرستان شوشتر صید گردیدند. نمونه گیری از پوست و عضله در محل اتصال انگل انجام و در فرمالین 10% بافر نگهداری شد. مقاطع آسیب شناسی به روش استاندارد تهیه و سپس مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان دهنده واکنش التهابی به صورت نفوذ سلول های تک هسته ای، هیپرپلازی بافت پوششی پوست، تزاید فیبروبلاست، افزایش رنگدانه ملانین، نکروز عضلانی، پرخونی، رگ زایی و خونریزی بود که نشان دهنده پاسخ دفاعی ماهی از طریق سلول های دفاعی خون و تشکیل بافت التیامی بود. بیشترین جداسازی انگل از ناحیه پوست ماهی ها صورت گرفت ضمن اینکه درصد کل آلودگی به انگل لرنه آ 30 درصد بود.

مطالعه حاضر با هدف استفاده از کرم پرتار Perinereis nuntia در جیره مولدین میگوی سفید غربی و بررسی بازماندگی، رشد و مقاومت پست لارو 15 روزه در برابر استرس های محیطی شوری، دما و فرمالین در مرکز بازسازی ذخایر آبزیان کلاهی در استان هرمزگان انجام شد. سه تیمار آزمایشی با سه تکرار تعیین گردید. لاروهای حاصل از مولدین تغذیه شده با اسکوئید، ملالیس و جگر گاو در تیمار یک، اسکوئید، ملالیس، جگر گاو و 8% کرم پرتار در تیمار دو و اسکوئید، ملالیس، جگر گاو و 12% کرم پرتار در تیمار سه قرار گرفتند. شاخصهای رشد (طول کل و وزن تر) لاروها بررسی شده و جهت تعیین مقاومت در برابر استرس های محیطی، لاروها بمدت 30 دقیقه در معرض شوری (20، 10، 40 و 50 قسمت در هزار)، دما (10، 20، 40 و 50 درجه سانتیگراد) و فرمالین (100 قسمت در میلیون) قرار گرفتند و میزان بازماندگی محاسبه شد. بیشترین و کمترین میانگین طولی و وزنی بترتیب متعلق به تیمار سه و تیمار یک بود و تیمار یک با سایر تیمار ها دارای تفاوت معنی دار بود (p<0.05). در مقاومت به استرسهای محیطی، بیشترین بازماندگی در تیمار سه و کمترین بازماندگی در تیمار یک بود. بازماندگی لاروها بین تیمارهای مختلف در تستهای شوری و فرمالین تفاوت معنی داری نداشت اما تیمارهای دو و سه در تستهای دمایی 10 و 50 درجه بازماندگی بیشتری نسبت به تیمار یک داشتند (p<0.05). طبق نتایج، استفاده از کرم پرتار P. nuntia در جیره غذایی مولدین میگوی سفید غربی می تواند باعث افزایش شاخص های رشد و مقاومت لاروها در برابر استرس های محیطی شود.

هدف از انجام این تحقیق، مقایسه اثرات 6 گیاه دارویی مختلف بر روی عملکرد سیستم ایمنی جوجه های گوشتی بود. 420 قطعه جوجه یک روزه نر (سویه 308 راس) در 7 گروه آزمایشی کاملا تصادفی و سه تکرار (هر تکرار شامل 20 قطعه جوجه) به مدت 42 روز مورد آزمایش قرار گرفتند. گروه شاهد (گروه 1) با جیره پایه و گروه های آزمایشی 7، 6، 5، 4، 3، 2 علاوه بر جیره پایه به ترتیب با پودر 1% قسمت اندام های هوایی پونه، آویشن، کاسنی، کاکوتی، پنیرک و گزنه تغذیه شدند. واکسن  B1 نیوکاسل برای تمام گروه ها در روزهای 10 و 25 دوره پرورشی استفاده شد. دو قطعه جوجه از هر تکرار بطور تصادفی (مجموعا 6 قطعه جوجه از هر گروه) انتخاب شد و بعد از خونگیری در روزهای 24 و 34 دوره پرورشی، آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI) و تعیین نسبت هتروفیل به لنفوسیت انجام گرفت. در مورد آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI) (عیار آنتی بادی علیه ویروس واکسن نیوکاسل) تفاوت معنی داری در بین گروه های مختلف آزمایشی دیده نشد. در مورد نسبت هتروفیل به لنفوسیت، فقط گروهی که گزنه 1% دریافت کرده بود تفاوت معنی داری در مقایسه با گروه شاهد نشان داد (P<0.05) و سایر گروه های آزمایشی تفاوت معنی داری نشان ندادند. احتمالا سایر مقادیر این گیاهان دارویی (بطور مجزا و یا مخلوط با هم) بطور موثری باعث افزایش عملکرد سیستم ایمنی شود.