تازه های بیوتکنولوژی سلولی مولکولی
سال:1389 | دوره:1 | شماره:1 |تعداد مقالات:9

سابقه و هدف: پنبه یکی از مهمترین محصولات گیاهی در ایران است و در نواحی مختلفی کشت می شود. کشت مداوم یکسری از ژنوتیپ ها منجر به فرسایش ژنتیکی در درازمدت می گردد، بنابراین مطالعه تنوع ژنتیکی و معرفی ارقامی با تنوع ژنتیکی بالا امری مهم و ضروری است.مواد و روش ها: در این مطالعه تنوع ژنتیکی ده رقم مختلف پنبه تتراپلوئید (Gossypium hirsutum L.) با استفاده از روش مولکولی RAPD مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته ها: از 30 پرایمر مورد بررسی، 22 پرایمر باندهای قابل ارزش گذاری تولید نمودند. در مجموع، 387 باند حاصل شد که 178 باند پلی مرف بودند. پرایمر OPM11 بیشترین باند پلی مرف و پرایمر OPC09 بیشترین باند اختصاصی را تولید کردند در حالی که بعضی از پرایمرها هیچ باند اختصاصی نداشتند. بعضی ارقام دارای باندهای اختصاصی بودند. بیشترین باند اختصاصی متعلق به رقم سی اکرا بود (6 باند).نتیجه گیری: گروه بندی ارقام با روش NJ انجام گرفت که نشان دهنده تنوع ژنتیکی ارقام مورد مطالعه بر اساس مارکرهای مولکولی RAPD بود. بر اساس دندروگرام رسم شده دو رقم والدینی سی اکرا و نازلی دارای بیشترین تشابه ژنتیکی (bootstrap %100) با یکدیگر بودند.

سابقه و هدف: در مبتلایان به بدخیمی های با منشا خونی احتمال افزایش بروز بیماری های عفونی می باشد که ناشی از دو عامل عمده است؛ عامل نخست سرکوب ایمنی ناشی از مصرف داروهای کموتراپی و عامل دوم ضعف ایمنی ناشی از نقص عملکرد سلول های ایمنی می باشد. از جمله عفونت هایی که این بیماران، مستعد ابتلا به آنها هستند، انواع مختلف عفونت های فرصت طلب به ویژه عفونت های مایکوباکتریایی می باشند. بر همین اساس با توجه به اهمیت موضوع در این مطالعه به بررسی موارد عفونت های مایکوباکتریوم در مبتلایان به بدخیمی های با منشا خونی با استفاده از کشت آسپیره مغز استخوان و تست PCR در نمونه خون کامل و آسپیره مغز استخوان پرداخته شد.مواد و روش ها: این مطالعه به صورت یک بررسی مشاهده ای (Observational) توصیفی - تحلیلی (Descriptive-Analytical) مقطعی (Cross-Sectional) انجام شده است. حجم نمونه مورد بررسی شامل 96 بیمار مبتلا به بدخیمی های با منشا خونی بود که به بیمارستان شریعتی تهران مراجعه نموده بودند.یافته ها: کشت مغز استخوان در 10 نفر (10.4 درصد) از بیماران مثبت بود که هیچ یک مایکوباکتریوم نبودند و پنج مورد آلودگی، دو مورد آسپرژیلوس، یک مورد استرپتومایسس و دو مورد بروسلا مشاهده شد. البته در3 PCR  بیمار (3.1 درصد) از نظر مایکوباکتریوم مثبت بودند. سن بیماران، جنسیت آنها، نوع بدخیمی و نیز دریافت پیوند مغز استخوان در بیماران تاثیری در مثبت بودن نتایج PCR نداشتند (P>0.05).نتیجه گیری: در مجموع بر اساس یافته های حاصل از این مطالعه و مقایسه آنها با سایر مطالعات انجام شده در این زمینه چنین استنباط می شود که بررسی و غربالگری از نظر عفونت های مایکوباکتریایی در مبتلایان به بدخیمی های با منشا خونی باید به صورت دوره ای انجام گردد.

سابقه و هدف: پروبیوتیک ها میکروارگانیسم های موجود در لوله گوارش هستند که علاوه بر کمک به گوارش مولکول های پیچیده به سیستم ایمنی بدن نیز کمک کرده و باعث کاهش التهاب می شوند. اثرات سودمند این باکتری در ترمیم زخم های گوارشی به اثبات رسیده است اما تحقیقات کمی در زمینه اثرات ترمیمی این باکتری ها بر زخم های پوستی انجام شده است. هدف از این مطالعه، بررسی اثر لاکتوباسیلوس پلانتاروم جدا شده از محصولات لبنی - سنتی ایران بر ترمیم زخم پوستی می باشد.مواد و روش ها: پس از جداسازی 22 سویه لاکتوباسیل از محصولات لبنی - سنتی ایران و بررسی میزان تولید اگزوپلی ساکارید سویه ها با روش فنل سولفوریک در نهایت، لاکتوباسیلوس پلانتاروم که توانایی تولید اگزوپلی ساکارید بالایی داشت، انتخاب گردید. سپس موش های صحرایی نر از نژاد ویستار به گروه های پنج تایی تجربی، کنترل و کنترل منفی تقسیم شدند و زخمی مربع شکل به ابعاد 1.5×1.5 cm در پشت موش ها ایجاد گردید. پس از گذشت 24 ساعت از ایجاد زخم، گروه های کنترل و تجربی به ترتیب تحت درمان موضعی با اوسرین و اوسرین حاوی لاکتوباسیلوس پلانتاروم قرار گرفتند، اما گروه های کنترل منفی هیچ درمانی دریافت نکردند. مساحت زخم هر سه روز یک بار اندازه گیری شد. زخم پوستی موش ها پس از کشته شدن در روزهای یک، سه و چهارده برداشته شد و تحت مطالعات بافت شناسی و آماری قرار گرفت.یافته ها: لاکتوباسیلوس پلانتاروم ابعاد زخم را نسبت به دو گروه کنترل و کنترل منفی به طور معنی داری کاهش و ترمیم زخم را افزایش داد. بررسی مطالعات بافت شناسی در روز سوم نشان دهنده افزایش معنی دار میزان نوتروفیل ها در واحد سطح (P>0.001) و افزایش ماکروفاژها و فیبروبلاست ها بود (P>0.001). همچنین در روز چهاردهم در میزان نوتروفیل ها، ماکروفاژها و فیبروبلاست ها کاهش معنی دار (P>0.001) مشاهده شد.نتیجه گیری: یافته های فوق نشان دادند که لاکتوباسیلوس پلانتاروم توانسته به طور معنی داری موجب کاهش التهاب و تسریع روند بهبود زخم در موش صحرایی شود. مطالعات بیشتری جهت شناسایی دقیق تر مکانیسم عمل لاکتوباسیلوس پلانتاروم در طی ترمیم زخم پوستی نیاز است.

سابقه و هدف: لیستریامونوسیتوژن یکی از عوامل سقط، زایمان زودرس، سپتی سمی و مننژیت نوزادان است. در این مطالعه تعیین فراوانی ابتلا به عفونت لیستریامونوسیتوژن و مقایسه دو روش ایمونوفلوئورسانس غیرمستقیم و کشت مایع آمنیوتیک در تشخیص این باکتری می باشد.مواد و روش ها: این پژوهش، یک مطالعه تحلیلی از نوع ارزیابی تست های آزمایشگاهی است. در این مطالعه، سرم مادران به روش ایمونوفلوئورسانس غیرمستقیم از نظر آنتی بادی مورد بررسی قرار گرفت. علاوه بر این، از محصولات جنین سقط شده یا زایمان زودرس (مایع آمنیوتیک و یا تکه ای از جفت) نمونه برداری و کشت داده شد.یافته ها: در این مطالعه، از 518 مورد از مادرانی که مورد مطالعه قرار گرفتند. 29 مورد (%5.59) زایمان زودرس، 125 مورد (%24.1) سقط تکراری و 364 مورد (%70.32) سقط برای اولین بار اتفاق افتاده بود. در 6 مورد (%1.15) در تست ایمونوفلوئورسانس غیرمستقیم، تیتر بالای آنتی بادی 1.800 سانتی گراد بر ضد لیستریامونوسیتوژن نشان داده شد و در 5 مورد (%0.96) کلونی های لیستریا در محیط های کشت انتخابی، شناسایی شدند.نتیجه گیری: یافته های فوق نشان می دهد که تست ایمونوفلوئورسانس غیرمستقیم ابتلای به عفونت لیستریامونوسیتوژن را مطرح می کند، اما باید به روش کشت در محیط های انتخابی تایید گردد. با شروع درمان ضد میکروبی امکان پیشگیری از وقوع سقط جنین و عوارض حاملگی وجود دارد، لذا انجام تست فوق در مادران پیشنهاد می شود. احتمالا تیترهای سرمی پایین مربوط به عفونت های قبلی یا عفونت توسط باکتری هایی با واکنش متقابل با لیستریامونوسیتوژن می باشد.

سابقه و هدف: گیاه هلیوتروپیوم خراسانیکوم یکی از گیاهان بومی فلات ایران می باشد که توجه چندانی در جهت شناخت آن صورت نگرفته است. می توان آن را با توزیع جغرافیایی محدودی که دارد یکی از گونه های بومی ایران در نظر گرفت. این گونه در استان خراسان - کپه داغ در ناحیه ایرانی تورانی قرار دارد. در این تحقیق ساختار ریشه، ساقه، برگ، گل، میوه و مریستم هلیوتروپیوم خراسانیکوم (Heliotropium chorassanicum) که یکی از گونه های بومی فلات ایران است، از نظر ریخت شناسی و ریخت زایی مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روش ها: نمونه ها از استان خراسان رضوی جمع آوری گردید و پس از تثبیت با فیکساتورFAA ، مراحل آبگیری، شفاف سازی، نفوذ پارافین، قالب گیری، برش گیری و رنگ آمیزی سیتولوژیکی به ترتیب انجام گرفت. نمونه های آماده شده با کمک میکروسکوپ نوریOlympus  به دقت مشاهده و با دوربین کانن مدل sxi110 عکس برداری شدند. برای بررسی نمونه های هرباریومی از دستگاه بیناکولر مدل Sz51 استفاده شد.یافته ها: در رنگ آمیزی آناتومیکی و سیتولوژیکی برگ مناطق زیر دیده می شوند: پهنک یا لامینا با رگبرگ های برجسته در سطح پشتی، لایه اپیدرم با کرک های ساده فراوان، کوتیکول نازک، اپیدرم تک لایه ایی در هر دو سطح، لایه کوتیکول بسیار نازک و دارای کرک های فراوان ساده، مزوفیل کلروفیل دار، ایزوبیلترال (دارای سلول های مزوفیل استوانه ایی در هر دو سطح)، غلاف آوندی کمانی شکل است، فلوئم، 2-6 لایه سلولی است. روزنه ها در این برش در سطح پایینی دیده می شوند.نتیجه گیری: با در نظر گرفتن کلید شناسایی کرک و مقایسه کرک های ساقه و برگ تیره آفتاب پرست در گونه هلیوتروپیوم خراسانیکوم، نوع کرک ساده با انتهای فنجانی شکل و پایه سلولی مشخص وجود دارد و ریشه رشد ثانویه دارد.

سابقه و هدف: پلورال افیوژن، در زمینه کثیری از بیماری ها رویت می گردد که دو گروه عمده آن، بدخیمی ها و سل می باشند. در مطالعه حاضر به منظور بررسی سودمندی تشخیص اندازه گیری ایزوآدنوزین دی آمیناز (ADA) و آنزیم های آن و اینترفرون گاما آزمون در مایع پلور با توجه به علل مختلف در جامعه ایران روی بیماران پلورال افیوژن انجام شد و مقایسه آن روی سه گروه بیماران سل افیوژنی، بدخیمی ها و بیماران غیر سلی انجام گردید.مواد و روش ها: روش انجام مطالعه توصیفی - تحلیلی و به صورت انتخاب 3 گروه با روش Cross-Sectional انجام گردید. تعداد 103 بیمار مبتلا به پلورال افیوژن، سل و غیر سلی مورد بررسی قرار گرفت. 60 نفر مرد و بقیه زن بودند در 46% از بیماران (45 بیمار) بر اساس تعریف مطالعه، سل پلور تشخیص داده شد. آدنوزین دی آمیناز (ADA1)، ایزوآنزیم آدنوزین دی آمیناز (ADA2) و غلظت اینترفرون گاما توسط برنامه های آنالیزی و منحنی ها تجزیه و تحلیل شد.یافته ها: افزایش از هر سه شاخص آنزیمی بیماران سلی مشاهده شد، ولی در بیماران غیر سلی این افزایش تشخیص داده نشد. برش مقدار برای آدنوزین دی آمیناز، ایزوآنزیم آدنوزین دی آمیناز و اینترفرون گاما به ترتیب 40، 26 و 299 پیکوگرم بر میلی لیتر بود. افزایش قابل توجهی در میزان آنزیم های آدنوزین دی آمیناز، ایزوآنزیم آدنوزین دی آمیناز در بیماران سلی نسبت به بیماران با عفونت های بدخیمی نمایش داده شد. متوسط غلظت اینترفرون گاما در مایع پلور بیماران سلی 1514.2 پیکوگرم بر میلی لیتر (931.2-2187.5 پیکوگرم بر میلی لیتر) بود که ده برابر بیشتر از مقدار متوسط از گروه دیگر از بیماران بود. تفاوت معنی داری بین بیماران مبتلا به عفونت بدخیم و افراد بیمار غیر سلی وجود داشت.نتیجه گیری: ADA2، ADA مایع پلور یک تست تشخیصی با حساسیت و اختصاصیت مناسب برای تشخیص التهاب پلورای سلی می باشد و اندازه گیری هر سه مارکر آنزیمی نشانگر عملکرد بالای تشخیصی برای سل در بیماران مبتلا به سل پلور بوده و بالا بودن میزان ADA بیش از 95% احتمال بیماری سل را تایید می نماید.

سابقه و هدف: در مطالعات نشان داده شده است که هیستامین بر رفتارهای شبه اضطرابی در انسان و حیوانات اثر دارد. شواهدی دیگر نشان می دهد هیپوکامپ شکمی یک جایگاه مهمی در واسطه گری رفتارهای شبه اضطرابی است. در این مطالعه، ارزیابی تجویز هیستامین به صورت دو طرفه بر هیپوکامپ شکمی و اثر آن در موش صحرایی حساس به مرفین بررسی می شود.مواد و روش ها: رفتارهای شبه اضطرابی تزریق دو طرفه هیستامین در هیپوکامپ شکمی در حیوانات حساس شده به مرفین و معمولی با استفاده از مدل ماز بعلاوه ای شکل بررسی شد. حساسیت به وسیله تزریق 3 روز مرفین و سپس 5 روز بدون دارو ایجاد می شود.یافته ها: نتایج نشان داد هیستامین در دوزهای 2.5، 5 و 7.5 میکروگرم بر رت درصد زمان گذرانده در بازوی باز و درصد ورود به بازوی باز را کاهش داد ولی بر فعالیت حرکتی تاثیری نداشت. بعلاوه نتایج دیگری نشان می دهد حساسیت به مورفین درصد زمان گذرانده در بازوی باز و درصد ورود به بازوی باز را افزایش می دهد.نتیجه گیری: یافته ها نشان می دهد، هیستامین یک پاسخ اضطراب زایی دارد ولی حساسیت به مرفین یک پاسخ اضطراب زدایی به وسیله مرفین در حضور هیستامین ایجاد می کند.

سابقه و هدف: مایکوباکتریوم چلونی در گروه مایکوباکتریوم های غیر سلی طبقه بندی می گردد که جزو گروه بزرگی از مایکوباکتری ها می باشند که جدا از گروه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس که عامل بیماری سل می باشد، قرار می گیرند. این باکتری علل سندرم های مختلف بالینی، از جمله بیماری های ریوی، بیماری های پوستی محلی، استئومیلیت، عفونت مفاصل و باعث عفونت های ریوی در افرادی که نقص سیستم ایمنی (به هر دلیل) دارند، می شوند و همچنین در عفونت های زخم بعد از عمل جراحی جدا شده است. مایکوباکتریوم چلونی در ورم غده های خلطی که بیماری نادری است، جدا شده است. اندوکاردیت نیز توسط این باکتری مستند شده است. اختلالات مری را افزایش و خطر بیماری های ریوی به دلیل این عامل به سرعت در حال رشد است. انتقال بیماری از انسان به انسان ثبت شده است.مواد و روش ها: خلط از بیمار مشکوک به سل از یک خانم 48 ساله جمع آوری شد و ثبت معاینات بالینی انجام گردید. برای بیمار تست توبرکولین انجام شد و نمونه خلط روی محیط جامد لون اشتاین جانسون انجام شد. همه تست ها از قبیل حساسیت دارویی و افتراق مایکوباکتری ها بر اساس روش استاندارد CDC انجام شد. روش PCR با چند پرایمر مختلف جهت شناسایی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس از غیر توبرکلوزیس انجام شد.یافته ها: در رنگ آمیزی لام به روش زیل نلسون و اورامین باسیل رویت گردید. تست توبرکولین بیمار منفی بود. PCR در تمام موارد انجام شده منفی بدست آمد. کشت پس از 7 روز افزایش یافته است و کلنی های باسیل رویت گردید و همچنین رشد در روی محیط 2- تیوفن اسید کربوکسیلیک مثبت شد و کلنی باکتری نیز از نوع نان فوتوکروموژن مشخص گردید. تست کاتالاز در دو درجه حرارت 22 و 68 مثبت شد. آزمایشات تست نیاسین و نیترات منفی مشخص شد.نتیجه گیری: در این مطالعه، نمونه مورد نظر جدا شده مایکوباکتریوم چلونی بود که از بیمار مبتلا به سرطان سینه متاستاتیک جدا شده است. این باکتری معمولا در انسان با مشکل دیگر شامل سرطان، ایمنی، آلرژی، استئومیلیت و غیره یافت می گردد.