مقدمه: ویبریوکلره یک باکتری گرم منفی است که باعث ایجاد بیماری وبا می شود. به دنبال خوردن مواد آلوده به این باکتری، باکتری در روده باریک میزبان شروع به کلونیزاسیون و تولید انتروتوکسین می کند. یکی از مهمترین عوامل بیماری زای باکتری پیلی (TCP) است. این پیلی به عنوان اولین فاکتور در کلونیزاسیون و تداوم باکتری ها در روده کوچک مورد نیاز است. باکتری پیلی هم- تنظیم شونده با توکسین به صورت پیلی تشکیل دهنده دسته ای است که به شکل هماهنگ با توکسین کلرا (CT) تنظیم می شود. توکسین کلره به عنوان بخشی از ژنوم باکتریوفاژ رشته ای (CTXQ) است، به طوری که این باکتریوفاژ از پیلی هم- تنظیم شونده با توکسین به عنوان گیرنده خود استفاده می کند. هدف از این مطالعه تولید یک واکسن نوترکیب برای ویبریوکلره در آینده است.روش: در این مطالعه ژن tcpB با روش PCR تولید شد. سپس به داخل وکتور بیانی pET32 a وارد گردید. سلول های مستعد E.coli. BL21(DE3)plays به وسیله پلاسمید نوترکیبpET32 a – tcpB ترانسفورم گردید. سپس در محیط های کشت متفاوت با تغییر دادن پارامترهایی مثل گلوکز به عنوان منبع کربن، عصاره مخمر به عنوان منبع نیتروژن، بیان پروتئین با استفاده از IPTG انجام شد. پروتئین نوترکیب به وسیله کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA تخلیص گردید. در نهایت میزان پروتئین خالص شده با استفاده از روش براد فورد اندازه گیری شد. یافته ها: نتایج تعیین توالی با روش سنجر نشان داد که توالی ژن شباهت کامل باژن tcpB دارد. باکتری E.coli,BL21(DE3), plysS به وسیله pET32a-tcpB ترانسفورم شد و بیان ژن به وسیله IPTG صورت گرفت. پروتئین بیان شده توسط کروماتوگرافی تمایلی و به وسیله کیت Ni-NTA تخلیص گردید.نتیجه گیری: تولید پروتئین نو ترکیبtcpB ، ویبریوکلره در سیتوپلاسم باکتری اشریشیا کلی با استفاده از پلاسمید بیانی pET32a انجام گرفت. تولید این پروتئین در میزبان اشریشیا کلی سویه plysS با استفاده از وکتورهای بیانی مثل pET 32aدر این مطالعه امکان پذیر است.