مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

862
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

617
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

تولید آنتی بادی اختصاصی پروتئین PGIP1 بیان شده به صورت هترولوگ در باکتری و استفاده از آن جهت تایید بیان PGIP در گیاهان کلزای تراریخت

صفحات

 صفحه شروع 25 | صفحه پایان 34

چکیده

 قارچهای بیماریزای کلزا که سالانه خسارت زیادی را به این محصول وارد می کنند برای نفوذ در گیاه, با ترشح آنزیمهایی باعث تجزیه مولکولهای دیواره سلولی آنها می شوند. در طی تکامل در گیاهان, پروتئینهایی برای مهار این آنزیمها بوجود آمده است. PGIP1 از جمله این پروتئینها بوده که قدرت نفوذ قارچ در گیاه را مهار می نماید. در این تحقیق با توجه به اینکه آنتی بادی علیه پروتئین PGIP1 لوبیا به صورت تجاری موجود نمی باشد و از طرفی جهت تایید بیان PGIP1 در گیاهان کلزای تراریخت بدست آمده نیاز به آنتی بادی مربوطه می باشد, لذا اقدام به تولید پروتئین PGIP1 در سیستم پروکاریوتی و استفاده از آن جهت تولید آنتی بادی علیه آن گردید. بدین منظور ژن کد کننده PGIP1 کلون شده در pUC19 بوسیله آغازگرهای اختصاصی RB وRB2H  (به ترتیب حاوی سایتهای Nde1 و Xho1) تکثیر و پس از هضم با این دو آنزیم در ناقل pET26b (+) کلون گردید. پلاسمید حاصله پس از تاییدهای مولکولی به میزبان بیانی E. coli BL21 (DE3) pLysS منتقل گردید. جهت بهینه سازی شرایط بیان ژن مورد نظر, شرایط مختلفی شامل, غلظتهای متفاوت IPTG, دماهای متفاوت کشت و OD زمان القا در کلونیهای متفاوت مورد بررسی قرار گرفت و نهایتا OD=0.3, دمای 37 درجه سانتی گراد وIPTG=0.5mM  بعنوان بهترین شرایط بیانی معرفی گردید. از آنجا که توالی هیستیدین در انتهای پروتئین کد شده وجود دارد, جهت تایید بیان پروتئین PGIP1 توسط آزمون وسترن بلات از آنتی بادی Anti-His استفاده گردید. پروتئین خالص شده در شش نوبت به دو خرگوش تزریق شد. جهت بررسی میزان تیتر آنتی بادی از آزمون الایزا استفاده گردید. از آنتی بادی تولید شده جهت تایید بیان پروتئین PGIP1 تولید شده در گیاهان کلزای تراریخت استفاده گردید. نتایج حاصل از آزمون وسترن بلات وجود پروتئین مورد نظر را در پروتئینهای استخراج شده از برگ گیاهان کلزای تراریخت در مقایسه با کلزای غیر تراریخت تایید نمود.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    مقدسی جهرمی، زهرا، زمانی، محمدرضا، مطلبی، مصطفی، اخگری، امیربهزاد، و فلاحی، فهیمه. (1390). تولید آنتی بادی اختصاصی پروتئین PGIP1 بیان شده به صورت هترولوگ در باکتری و استفاده از آن جهت تایید بیان PGIP در گیاهان کلزای تراریخت. زیست شناسی ایران، 24(1)، 25-34. SID. https://sid.ir/paper/21465/fa

    Vancouver: کپی

    مقدسی جهرمی زهرا، زمانی محمدرضا، مطلبی مصطفی، اخگری امیربهزاد، فلاحی فهیمه. تولید آنتی بادی اختصاصی پروتئین PGIP1 بیان شده به صورت هترولوگ در باکتری و استفاده از آن جهت تایید بیان PGIP در گیاهان کلزای تراریخت. زیست شناسی ایران[Internet]. 1390؛24(1):25-34. Available from: https://sid.ir/paper/21465/fa

    IEEE: کپی

    زهرا مقدسی جهرمی، محمدرضا زمانی، مصطفی مطلبی، امیربهزاد اخگری، و فهیمه فلاحی، “تولید آنتی بادی اختصاصی پروتئین PGIP1 بیان شده به صورت هترولوگ در باکتری و استفاده از آن جهت تایید بیان PGIP در گیاهان کلزای تراریخت،” زیست شناسی ایران، vol. 24، no. 1، pp. 25–34، 1390، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/21465/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button