مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,223
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

749
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلون کردن DNA و بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در باکتری اشریشیاکلی

صفحات

 صفحه شروع 145 | صفحه پایان 152

چکیده

 اهداف: شناخت ساختار و عملکرد پروتئین آلفا-سینوکلئین می تواند زمینه ساز توسعه روش های درمانی مناسب علیه بیماری پارکینسون باشد. هدف پژوهش حاضر, کلون کردن DNA و بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در باکتری اشریشیاکلی بود. مواد و روش ها: در پژوهش تجربی حاضر, توالی کدکننده آلفا-سینوکلئین موجود در پلازمید نوترکیب pRK172, به کمک روش PCR و با استفاده از پرایمرهای مناسب تکثیر شد. DNA سنتزشده توسط آنزیم های محدودگر SalI وHindIII بریده و در حامل pET28a کلون و پلازمید نوترکیب به روش کلسیم کلراید به سویه بیانی باکتری اشریشیاکلی (BL21) منتقل شد. بیان آلفا-سینوکلئین توسط محلول IPTGالقا و بیان پروتئین نوترکیب با روش الکتروفورز SDS-PAGE ارزیابی شد. ردیف سازی توالی ها به کمک الگوریتم ClustalW با برنامهBioEdit 5. 0. 9 صورت پذیرفت. یافته ها: در محصولات واکنش های برش آنزیمی DNA و پلازمید pET28a با آنزیم های محدودگر, اندازه قطعات, نشان دهنده صحت واکنش های آنزیمی بود. DNA تکثیرشده و پلازمید pET28a مورد استفاده به ترتیب با طول های 407 و 5369 نوکلئوتید بودند. ترجمه حاصل از توالی قطعه کلون شده, تشابه 100% با پروتئین آلفا-سینوکلئین انسانی را نشان داد. در بیان پروتئین نوترکیب در قیاس با نمونه های شاهد منفی, افزودن IPTG موجب افزایش بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در تمامی نمونه ها به ویژه 2 ساعت پس از القا شد. بیشتر آلفا-سینوکلئین بیان شده از پلازمید pET28a-alpha-Synuclein به صورت اجسام گنجانده در باکتری تجمع یافتند. نتیجه گیری: پروتئین آلفا-سینوکلئین در پلازمید pET28a کلون و تشکیل اجسام گنجانده توسط آلفا-سینوکلئین به هنگام بیان از سامانهpET28a-alpha-Synuclein تایید می شود و راه را بر تولید این پروتئین در مقیاس بالا هموار می سازد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    شیخی، سارا، امینی نسب، مهریار، صفاری، بابک، و عبدی، سپیده. (1396). کلون کردن DNA و بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در باکتری اشریشیاکلی. زیست فناوری، 9(1 )، 145-152. SID. https://sid.ir/paper/231324/fa

    Vancouver: کپی

    شیخی سارا، امینی نسب مهریار، صفاری بابک، عبدی سپیده. کلون کردن DNA و بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در باکتری اشریشیاکلی. زیست فناوری[Internet]. 1396؛9(1 ):145-152. Available from: https://sid.ir/paper/231324/fa

    IEEE: کپی

    سارا شیخی، مهریار امینی نسب، بابک صفاری، و سپیده عبدی، “کلون کردن DNA و بیان پروتئین آلفا-سینوکلئین در باکتری اشریشیاکلی،” زیست فناوری، vol. 9، no. 1 ، pp. 145–152، 1396، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/231324/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button