هدف: در مطالعه حاضر توانایی تمایز سلول های کارسینومای جنینی P19در حضور هم زمان 5-Azacytidin و DMSO به کاردیومیوسیت ها مورد ارزیابی قرار گرفت.مواد و روش ها: جهت تمایز سلول های P19، اجسام شبه جنینی (Embryoid Bodies,EBs) به روش قطرات آویزان طی 2 روز تشکیل شدند. سپسEBs به مدت 10 روز تحت القای 2 میکرومولار 5-Aza group) 5-Azacytidin)،(DMSO group) DMSO، 0.5 درصد و ترکیب DMSO و (Aza+DM group) 5-Azacytidin قرار گرفتند. طی تمایز تعداد ضربان در دقیقه هر دو روز یکبار در گروه های مختلف به وسیله میکروسکوپ معکوس شمارش شدند. بیان ژن های نظیر (a-Myosin Heavy Chain, a-MHC)، (Myosin Light Chain, MLC) و (Connexin-43) به وسیله RT-PCR در روز دهم پس از القا بررسی شدند. جهت بیان پروتئین F-actin از ایمونوسیتوشیمی استفاده شد.نتایج: تغییرات مورفولوژیکی زیادی در کاردیومیوسیت های مشتق شده از P19 به ویژه در گروه Aza+DM group ایجاد شد به طوری که افزایش مشخصی در اندازه سیتوپلاسم و زواید سیتوپلاسمی آن ها دیده شد و به تدریج شاخه شاخه شدن زوائدشان افزایش یافت و با سلول های مجاور ارتباط برقرار کردند. نتایج شمارش روزانه تعداد ضربان در دقیقه در تمامی گروهها از روز 2+2 مشاهده شده و تا روز 8+2 بتدریج افزایش یافته است. در سلول های P19 که تحت القای هم زمان DMSO و5-Aza بودند ژن های MLC و a-MHC بیان شدند. کاردیومیوسیت های Aza+DM group پروتئین F-actin را بیان کردند در حالی که این پروتئین در سایر گروه ها مشاهد نشد.نتیجه گیری: کاربرد هم زمان ترکیبات DMSO و5-Azacytidin موجب بهینه سازی محیط کشت تمایزی کاردیومیوسیت ها از سلول های P19 می گردد.