دنیای میکروب ها
سال:1389 | دوره:3 | شماره:2 (پیاپی 7) |تعداد مقالات:9

سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ (II با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (ALL) مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز II و کلون سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود.مواد و روش ها: در ابتدا ژن ال- آسپاراژیناز II با روش PCR از اشریشیا کلی سویه K12 جداسازی و درون وکتور بیانی pET32 مهندسی شده کلون گردید. توالی یابی و ارزیابی بیان ژن مورد نظر مطابق با روش های متداول به انجام رسیدند. سپس پلاسمید نوترکیب حاوی ژن متیونین آمینوپپتیداز خالص سازی گردید و با روش شوک حرارتی به درون باکتری تولید کننده آسپاراژیناز نوترکیب انتقال داده شد.یافته ها: بیان ال- آسپاراژیناز سیتوپلاسمی بیش از نوع پری پلاسمی بود. همچنین با توجه به بیان بالای آنزیم متیونین آمینوپپتیداز در میزبان بیانی اشریشیا کلی Origami، انتظار می رود که این آنزیم به طور موثری توانسته موجب حذف متیونین ابتدایی ال- آسپاراژیناز شود.نتیجه گیری: نتایج به دست آمده در این مطالعه در راستای معرفی میزبان با قابلیت بیان بالای ال- آسپاراژیناز نوترکیب در سیتوپلاسم، می تواند گامی بزرگ در مسیر درمان لوکمی لنفوبلاستیک حاد و نیز افزایش تولید این آنزیم در صنعت محسوب گردد.

سابقه و هدف: بروسلوزیس یک بیماری مشترک بین انسان و حیوان است که توسط جنس بروسلا ایجاد می شود. در مطالعات اخیر فعالیت ضدمیکروبی نانوذرات نقره به اثبات رسیده است. هدف از این پژوهش، بررسی اثرات ضدمیکروبی و اثر هم افزایی کونژوگه داکسی سیکلین و نانوذرات نقره بر روی بروسلا ملی تنسیس 16M بود.مواد و روش ها: در ابتدا کونژوگه داکسی سیکلین و نانوذرات نقره تهیه شد. سپس با روش انتشار چاهک اثر مهارکنندگی آن بر روی بروسلا ملی تنسیس 16Mدر محیط مولر هینتون آگار مورد بررسی قرار گرفت. همچنین با استفاده از روش ماکرودیلوشن حداقل غلظت مهار کننده رشد (MIC) و حداقل غلظت کشنده باکتری (MBC) توسط کونژوگه داکسی سیکلین و نانوذره نقره در محیط مولر هینتون براث تعیین گردید. در نهایت در مدل حیوانی نیز اثر کونژوگه سنتز شده مورد مطالعه قرار گرفت.یافته ها: نتایج نشان داد که کونژوگه داکسی سیکلین و نانوذرات نقره اثر ضدمیکروبی روی باکتری بروسلا ملی تنسیس 16M در شرایط آزمایشگاهی دارد. در مدل حیوانی کونژوگه نانوذرات نقره و داکسی سیکلین کاهش زیادی در میزان باکتری های بروسلا ملی تنسیس طحالی ایجاد کرد.نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که کونژوگه داکسی سیکلین و نانوذرات نقره اثر هم افزایی بر روی هم دارند و می تواند در درمان بروسلوز مورد توجه قرار گیرد.

سابقه و هدف: اخیرا گزارش هایی مبنی بر وجود باکتری های اوره آز مثبت غیر از هلیکوباکتر پیلوری در معده بیماران مبتلا به زخم معده یافت شده است. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی باکتری های اوره آز مثبت غیر از هلیکوباکتر پیلوری در بیماران مبتلا به زخم معده و بررسی اثر ضدمیکروبی نانوذرات نقره بر روی آن ها بود.مواد و روشها: 50 نمونه از بیوپسی آنتروم معده بیماران مبتلا به زخم معده مراجعه کننده به بیمارستان مجتمع رسول اکرم (ص) تهران توسط پزشکان متخصص گوارشی جمع آوری شد. نمونه ها در محیط کشت مایع انتقالی به آزمایشگاه میکروب شناسی منتقل شدند. باکتری های اوره آز مثبت موجود در معده با روش های استاندارد باکتریولوژی مانند کشت در محیط های اختصاصی و انجام تست های بیوشیمیایی شناسایی گردیدند. سپس اثر ضدمیکروبی نانوذرات نقره بر روی باکتری های اوره آز مثبت، با تعیین حداقل غلظت مهار کنندگی (MIC) و حداقل غلظت کشندگی (MBC) مشخص گردید.یافته ها: نتایج نشان داد که در 42% از نمونه های جمع آوری شده باکتری های اوره آز مثبت (10% کلبسیلانمونیه، 10% استافیلوکوکوس اورئوس، 8% انتروباکتر کلواکه، 6% انتروباکتر آگلومرانس، 4% کلبسیلا اوزنه و 4% سیتروباکتر دایورسوس) وجود داشتند. همچنین MIC ضدمیکروبی نانوذرات نقره بر روی جدایه های باکتریایی بین 1.56 تا 12.5 و MBC آن ها بین 3.125 تا 25 تعیین گردید.نتیجه گیری: رشد برخی از باکتری های اوره آز مثبت می تواند منجر به مشاهده مثبت کاذب در تست های تنفسی اوره و اوره آز سریع گردد. بنابراین توصیه می شود که برای تشخیص عامل زخم معده، تمام باکتری های اوره آز مثبت موجود در معده مورد شناسایی قرار گرفته و درمان بر اساس آن ها صورت گیرد. از طرفی به دلیل بروز مقاومت باکتری ها نسبت به اکثر داروهای رایج، امکان استفاده از اثرات ضدمیکروبی نانوذرات نقره برعلیه باکتری های مورد پژوهش وجود دارد.

سابقه و هدف: بیماری سل هنوز هم یکی از مهم ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه ای از باکتری ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن ها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش PCR-RFLP برای افتراق مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس و مایکوباکتریوم بویس و مقایسه نتایج آن با آزمون های بیوشیمیایی است.مواد و روش ها: 68 نمونه خلط از بیماران سل ریوی با اسمیر مثبت از مراکز بهداشتی و درمانی استان مرکزی جمع آوری و در محیط کشت های اختصاصی کشت شد. همچنین 10 جدایه مایکوباکتریوم بویس مربوط به مناطق مختلف ایران و 6 سویه استاندارد مایکوباکتریوم برای مقایسه استفاده گردید. پس از انجام تست های بیوشیمیایی، آزمون PCR بر اساس ژن کاذب oxyR انجام گرفت. سپس الگوی برش محصول تکثیر یافته با استفاده از آنزیم AluI مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته ها: در همه جدایه های انسانی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس یک قطعه و در جدایه های گاوی 3 قطعه پس از برش توسط آنزیم مشاهده شد. از نمونه های مورد پژوهش تنها در یک مورد مایکوباکتریوم بویس تشخیص داده شد. همچنین نتایج حاصل از آزمون PCR-RFLP با نتایج حاصل از تست های بیوشیمیایی هماهنگی 100% داشت.نتیجه گیری: روش PCR-RFLP روشی سریع و دقیق به منظور افتراق مایکوباکتریوم بویس از سایر اعضای کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس می باشد و می تواند در تشخیص اولیه و درمان مورد استفاده قرار گرفت.

سابقه و هدف: لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) از جمله بیماری های انگلی مشترک بین انسان و حیوان است که عامل آن لیشمانیا اینفانتوم و مخزن اصلی آن سگ و سگ سانان می باشد. هدف از این پژوهش، شناسایی مولکولی انگل مولد لیشمانیوز احشایی در سگ های شهرستان بویراحمد بود.مواد و روش ها: در این پژوهش برای جداسازی انگل لیشمانیا، از گسترش های تماسی تهیه شده از طحال و کبد 15 قلاده سگ دارای علایم بالینی لیشمانیوز احشایی شهرستان بویراحمد در سال 89 استفاده گردید. همچنین جنس و گونه انگل پس از تهیه مقاطع بافتی از اندام های حیوانات مورد پژوهش با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانه ای شناسایی گردید.یافته ها: از مجموع نمونه های مورد بررسی لیشمانیا اینفانتوم در 14 مورد (93.9%) از بافت های کبد، طحال و اسمیرهای آن ها و لیشمانیا ماژور در 1 نمونه (6.7%) با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز آشیانه ای تشخیص داده شدند.نتیجه گیری: نتایج مولکولی نشان داد که عامل اصلی لیشمانیوز احشایی در مخازن حیوانی (سگ) شهرستان بویراحمد لیشمانیا اینفانتوم می باشد. اما لیشمانیا ماژور نیز می تواند به عنوان یکی از عوامل ایجاد کننده لیشمانیوز احشایی در سگ وسگ سانان به شمار آید.

سابقه و هدف: افزایش روز افزون مقاومت آنتی بیوتیکی در دنیا باعث شده است که استفاده از ترکیبات طبیعی حاوی پروبیوتیک ها به عنوان جایگزین مطرح گردند. لاکتوباسیلوس کازئی و لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس به عنوان فعال ترین پروبیوتیک ها در جذب و حذف کلسترول قبلا شناسایی شده بودند و در این تحقیق تکمیلی فعالیت ضدمیکروبی آن ها در مقابل سویه های بیماری زا بررسی گردید.مواد و روش ها: این مطالعه مورد- شاهدی برروی لاکتوباسیلوس های جدا شده از لبنیات محلی استان فارس انجام شد. مقاومت آنتی بیوتیکی آن ها با استفاده از روش انتشار دیسک بررسی و سپس از کشت مایع 72 ساعته لاکتوباسیلوس ها، برای ارزیابی قدرت مهار کنندگی آن ها بر علیه سویه های استاندارد بیماری زا در دو حالت فعال و غیرفعال با استفاده از روش انتشار در آگار، استفاده گردید.یافته ها: لاکتوباسیلوس کازئی به تمام آنتی بیوتیک ها و لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس به جز توبرامایسین و وانکومایسین، نسبت به بقیه آنتی بیوتیک های مورد استفاده در این مطالعه مقاومت داشتند. در بررسی خاصیت ضدباکتریایی لاکتوباسیلوس ها نیز تمام سویه های بیماری زای مورد آزمایش به جز باسیلوس سابتیلیس هاله عدم رشد مشاهده شد.نتیجه گیری: به دلیل مقاومت دو سویه لاکتوباسیلوس به آنتی بیوتیک های متداول و کارآیی شان برعلیه عوامل بیماری زای بیمارستانی استفاده از آن ها به عنوان پروبیوتیک برعلیه سویه های پاتوژن پیشنهاد می گردد.

سابقه و هدف: در این مطالعه اثرات ضدقارچی اسانس گیاهان نعنا، شوید، جعفری و ریحان بر روی قارچ سم زای آسپرژیلوس پارازیتیکوس استاندارد مورد بررسی قرار گرفت. همچنین ترکیبات شیمیایی تشکیل دهنده اسانس گیاهان ذکر شده تعیین گردید.مواد و روش ها: در ابتدا اسانس گیاهان با روش تبخیر آبی از گیاه خشک به دست آمدند. سپس برای شناسایی ترکیبات شیمیایی آن ها از روش GC/MS استفاده شد. حداقل غلظت بازدارنده رشد با روش تعیین غلظت متوالی تعیین گردید.یافته ها: مهم ترین ترکیبات تشکیل دهنده نعنا: بنزن برومو فنوکسی متیل دی متوکسی، ریحان: اتیل دکبوران، شوید: دی متیل دکربا دکبوران و جعفری: متیل آنتراسن بود. غلظت بازدارنده برای نعنا، شوید، ریحان و جعفری به ترتیب 1.5، 1.5، 3 و 4 میکرولیتر در میلی لیتر محاسبه گردید. اثر ضدقارچی با توجه به غلظت و ترکیب اسانس به کار رفته متفاوت بود. این اثر در دو گیاه نعنا و شوید مشابه و بیش از دو گیاه دیگر مشاهده شد.نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که اسانس های گیاهی به کار رفته در این پژوهش دارای اثر ضدقارچی بسیار قوی می باشند. بنابراین می توانند به عنوان عواملی محافظت کننده در جلوگیری از آلودگی برخی از مواد غذایی با قارچ های آلوده کننده سم زا به کار روند.

سابقه و هدف: پوسیدگی ساقه برنج ناشی از Magnaporthe salvinii اولین بار از ایتالیا گزارش شد. در استان فارس علایم پوسیدگی ساقه برنج در مرحله پنجه زنی در مناطق مختلف مشاهده می شد بدون آنکه عامل بیماری شناخته شده باشد. هدف از این پژوهش، ارزیابی عامل این پوسیدگی ها و نیز وجود احتمالی Magnaporthe salvinii در استان فارس بود.مواد و روش ها: در سال زراعی 88-1387 از مناطق عمده برنج کاری در استان فارس، بوته هایی با نشانه های پوسیدگی طوقه و ساقه جمع آوری و مطالعه شدند. جدایه ها، با روش های استاندارد خالص سازی، شناسایی و با استفاده از محیط کشت های اختصاصی شکل جنسی آن ها تشکیل و بررسی شدند. آزمون اثبات بیماری زایی نیز برای جدایه های یاد شده انجام شد.یافته ها: کشت قسمت های آلوده گیاه منجر به تشکیل پرگنه هایی به رنگ سفید متمایل به خاکستری گردید. بر اساس مشخصات به دست آمده، شکل غیرجنسیNakataea sigmoidea  و شکل جنسی Magnaporthe salvinii تشخیص داده شدند. آزمون بیماری زایی نیز نشان داد که این بیمارگر از قدرت تهاجمی بالایی برخوردار است و در ارقام حساس بدون نیاز به وجود هر گونه عامل کمکی مانند زخم، به سادگی در گیاه توسعه می یابد.نتیجه گیری: پوسیدگی طوقه و ریشه ناشی از Magnaporthe salvinii شایع در مناطق مختلف استان فارس از قدرت تهاجمی بالایی برخوردار است. این مورد، اولین گزارش از وجود قارچ پوسیدگی ساقه برنج در این منطقه می باشد.