پژوهش های آسیب شناسی زیستی
سال:1397 | دوره:21 | شماره:2 |تعداد مقالات:7

اهداف: یکی از چالش های اصلی در مهندسی بافت، رهایش فاکتورهای رشد با سرعت و غلظت مشخص به سلول ها است. هدف این پژوهش، ساخت و مشخصه یابی نانوذرات هوشمند پلی-ان-ایزوپروپیل آکریل آمید حاوی فاکتور رشد اندوتلیال عروقی برای القای رگ زایی در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسانی بود.: مواد و روش ها در این پژوهش تجربی، نانوذرات پلیمر هوشمند PNIPAM، به روش پلیمریزاسیون رادیکالی، با دو فرمولاسیون (سامانه) مختلف استفاده شدند. برای بارگذاری فاکتور رشد اندوتلیالی عروقی، دو روش نانورسوبی و نفوذ برای فرمولاسیون ها انجام شد. اثر رهایش فاکتور رشد اندوتلیالی عروقی بر تمایز به اندوتلیال سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسانی در محیط رگ زایی، استخوانی و محیطی شامل50% از هر دو محیط رگ زایی و استخوانی مورد بررسی قرار گرفت. تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از بسته نرم افزار GraphPadPrism 6 انجام شد.: یافته ها روش نانورسوبی به دلیل استفاده از حلال آلی ان-ان-دی متیل استامید، موجب تخریب ساختار پلیمر شد. پس از 72ساعت حدودا 70% فاکتور رشد از پلیمر آزاد شد. رهایش 10نانوگرم بر میلی لیتر فاکتور رشد اندوتلیالی عروقی از سامانه نانوذرات هوشمند PNIPAM، در محیط دوبعدی با حضور سلول های بنیادی مزانشیمی با دانسیته سلولی 104×3 و محیط کشت تمایز استخوانی، پس از 7 روز، منجر به تمایز به اندوتلیال، تشکیل حلقه های شبه مویرگی و بیان 20درصدی مارکر اندوتلیالی vWF شد.: نتیجه گیری نانوذرات تهیه شده، قابلیت بارگذاری و رهایش فاکتور رشد برای القای پدیده رگ زایی در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان در محیط کشت تمایز استخوانی را دارند.

اهداف: واکسیناسیون با آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت B در ادجوانت آلوم پیشگیری از عفونت هپاتیت B را به دنبال دارد. مشتق پروتئینی خالص (PPD)، آنتی ژن مایکوباکتریایی است که موجب بلوغ سلول های دندریتیک می شود. با توجه به نقش سلول های دندریتیک در القای پاسخ های ایمنی، هدف مطالعه حاضر بررسی امکان استفاده از PPD در فرمولاسیون واکسن تجاری هپاتیت B به منظور تقویت پاسخ های ایمنی سلولی و همورال بود.: مواد و روش ها در مطالعه تجربی حاضر، 63 سر موش بالب/سی ماده اینبرد، به 7 گروه 9تایی تقسیم شدند. واکسن هپاتیت B با دوزهای 1 و 10میکروگرم PPD در سه نوبت به فاصله دو هفته به صورت زیرجلدی به گروه های HBS-ALUM، ALUM+PPD1μ g HBS-و HBS-ALUM+PPD10μ g و کنترل متناظر تزریق شد. میزان IgG کلی سرمی و سایتوکاین های اینترلوکین 4 (IL-4)، اینترفرون گاما (IFN-γ ) و نسبت IFN-γ /IL-4 در کشت سلول های طحالی با الایزا بررسی شد. آنالیز آماری با آزمون تحلیل واریانس یک طرفه و نرم افزارGraf pad prism 6. 1 انجام شد.: یافته ها به کارگیری PPD در واکسن HBs تاثیری بر سایتوکاین IFN-γ نداشت اما موجب کاهش IL-4 و افزایش نسبت IFN-γ /IL-4 در مقایسه با واکسن تجاری شد. همچنین به کارگیری PPD در واکسن HBs بعد از تزریق اول موجب تقویت پاسخ ایمنی همورال شد اما پس از تزریق دوم بی اثر بود، به طوری که پس از تزریق سوم، پاسخ آنتی بادی نسبت به واکسن تجاری را کاهش داد.: نتیجه گیری وجود PPD در فرمولاسیون واکسن هپاتیت B می تواند پاسخ ایمنی را به سمت سلول های T کمکی 1 (Th1) سوق دهد. تزریق اول موجب تقویت پاسخ آنتی بادی می شود اما پس از سه تزریق، سیستم ایمنی همورال را سرکوب می کند

اهداف: واکسیناسیون با آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت B در ادجوانت آلوم پیشگیری از عفونت هپاتیت B را به دنبال دارد. مشتق پروتئینی خالص (PPD)، آنتی ژن مایکوباکتریایی است که موجب بلوغ سلول های دندریتیک می شود. با توجه به نقش سلول های دندریتیک در القای پاسخ های ایمنی، هدف مطالعه حاضر بررسی امکان استفاده از PPD در فرمولاسیون واکسن تجاری هپاتیت B به منظور تقویت پاسخ های ایمنی سلولی و همورال بود.: مواد و روش ها در مطالعه تجربی حاضر، 63 سر موش بالب/سی ماده اینبرد، به 7 گروه 9تایی تقسیم شدند. واکسن هپاتیت B با دوزهای 1 و 10میکروگرم PPD در سه نوبت به فاصله دو هفته به صورت زیرجلدی به گروه های HBS-ALUM، ALUM+PPD1μ g HBS-و HBS-ALUM+PPD10μ g و کنترل متناظر تزریق شد. میزان IgG کلی سرمی و سایتوکاین های اینترلوکین 4 (IL-4)، اینترفرون گاما (IFN-γ ) و نسبت IFN-γ /IL-4 در کشت سلول های طحالی با الایزا بررسی شد. آنالیز آماری با آزمون تحلیل واریانس یک طرفه و نرم افزارGraf pad prism 6. 1 انجام شد.: یافته ها به کارگیری PPD در واکسن HBs تاثیری بر سایتوکاین IFN-γ نداشت اما موجب کاهش IL-4 و افزایش نسبت IFN-γ /IL-4 در مقایسه با واکسن تجاری شد. همچنین به کارگیری PPD در واکسن HBs بعد از تزریق اول موجب تقویت پاسخ ایمنی همورال شد اما پس از تزریق دوم بی اثر بود، به طوری که پس از تزریق سوم، پاسخ آنتی بادی نسبت به واکسن تجاری را کاهش داد.: نتیجه گیری وجود PPD در فرمولاسیون واکسن هپاتیت B می تواند پاسخ ایمنی را به سمت سلول های T کمکی 1 (Th1) سوق دهد. تزریق اول موجب تقویت پاسخ آنتی بادی می شود اما پس از سه تزریق، سیستم ایمنی همورال را سرکوب می کند.

اهداف: سرطان سینه شایع ترین سرطان میان زنان در ایران و دنیا است و 22% کل سرطان های زنان را شامل می شود. حدود 30% موارد سرطان های سینه به علت تکثیر یا بیان بیش از حد پروتئین HER-2 است. کیتوزان پلیمری سازگار با محیط زیست بوده که به دلیل حداقل مسمومیت سیستمیک برای تحویل پپتید یا دارو، در برنامه های کاربردی مطرح است. هدف مطالعه حاضر تهیه نانوذرات کیتوزان دربردارنده پروتئین نوترکیب HER-2، ارزیابی ویژگی ها و تاثیر ایمنی زایی خوراکی و تزریقی آن در لنفوسیت های طحال بود.: مواد و روش ها در مطالعه تجربی حاضر، وکتور pET-28a حاوی ژن نوترکیب HER-2 با روش PCR و پرایمرهای عمومی تایید شد. بیان پروتئین با ایزوپروپیل تیوگالاکتوزیداز (IPTG) القا و با استفاده از ستون رزین کروماتوگرافی نیکل-نیتریلو تری استیک اسید (Ni-NTA) تخلیص و پروتئین با وسترن بلاتینگ تایید شد. نانوذرات کیتوزان واجد پروتئین نوترکیب به روش ژلاسیون یونی تهیه و اندازه ذرات با DLS و ایمنی زایی نانوذرات در موش و ارزیابی پاسخ لنفوسیت ها با تست MTT صورت گرفت. برای تحلیل داده ها از آزمون های آنالیز واریانس یک طرفه، آزمون دانکن و نرم افزار 22 SPSS استفاده شد.: یافته ها پروتئین نوترکیب HER-2 با اندازه مولکولی 18کیلودالتون تایید شد. میزان پروتئین تخلیص شده 12میلی گرم در لیتر بود. ظرفیت بارگذاری پروتئین در نانوذرات، 70% و متوسط اندازه نانوذرات 205/2نانومتر مشاهده شد. ایمن سازی موش ها پاسخ ایمنی همورال و مخاطی را القا کرد.: نتیجه گیری ظرفیت بارگذاری پروتئین HER-2 در نانوذرات کیتوزان، 70% و متوسط اندازه نانوذرات 205/2نانومتر است و ایمن سازی موش ها پاسخ ایمنی همورال و مخاطی را القا و تجویز خوراکی تزریقی بیشترین میزان پاسخ را ایجاد می کند.

اهداف: توسعه یک واکسن موثر علیه عفونت HIV امری ضروری محسوب می شود. هدف مطالعه حاضر، بررسی ایمنی زایی ذرات شبه ویروسی در مدل موشی BALB/c به منظور القای پاسخ ایمنی هومورال و دست یابی به آنتی بادی های خنثی کننده بود.: مواد و روش ها در پژوهش تجربی حاضر، به منظور ایمنی زایی به واسطه VLP MPER-V3 از 40 سر موش ماده 8-6هفته ای استفاده شد. موش ها به 8 گروه مختلف تقسیم شدند و در هر گروه 5 سر موش در نظر گرفته شد و تزریق ها سه بار با فاصله سه هفته و به صورت زیرجلدی و در حجم 100میکرولیتر به ازای هر موش صورت گرفت. دو هفته پس از آخرین تزریق، خون گیری از سینوس چشمی موش ها انجام شد و پاسخ های ایمنی در سرم برای تعیین سطح Total IgG و سلول های طحال موشی به منظور سنجش سایتوکاین، با استفاده از روش الایزا مورد ارزیابی قرار گرفتند. تحلیل داده ها با استفاده از آزمون های من ویتنی و تحلیل واریانس یک طرفه صورت گرفت.: یافته ها سطح تولید آنتی بادی توتال در تمامی گروه هایی که VLP به تنهایی یا به همراه ادجوانت ایمن شده بودند بسیار بالا بود و اختلاف معنی داری با گروه کنترل داشت (0/05p<). ایزوتایپ غالب در گروه هایی که تزریق VLP به تنهایی یا با ادجوانت داشتند از نوع IgG1 (شاخص تحریک پاسخ Th2) بود.: نتیجه گیری ذرات شبه ویروسی تولیدشده می توانند سیستم ایمنی هومورال را در موش های ایمن شده با این ذرات به تنهایی یا فرموله شده با ادجوانت تحریک کنند. همچنین سطح تولید IL-5 در حضور کاندید واکسن به صورت VLP، بسیار افزایش یافت.

اهداف: تالاسمی بتا، یک بیماری خونی و ژنتیکی است، شیوع ناقلین این بیماری در جمعیت ایران بالاست. بررسی غربالگری قبل از ازدواج برای تعیین ناقلین تالاسمی بتا، به تشخیص سریع و قابل اعتماد نیاز دارد. هدف پژوهش حاضر طراحی روش غربالگری سریع چهار جهش شایع ژن بتا گلوبین جمعیت ایران با استفاده از روش ذوب با تفکیک بالا (HRM) بود.: مواد و روش ها در مطالعه تجربی حاضر هشت نمونه از افراد مبتلا و ناقل تالاسمی بتا با ژنوتیپ های (G>A) IVSI-110، A) IVSII-I (G>، (IVSI-5 (G>C و CD36/37 (-T) در شرایط هموزیگوت و هتروزیگوت و یک نمونه کنترل (فرد سالم) انتخاب شدند. بعد از گرفتن خون، استخراج DNA با روش نمکی انجام شد. برای اطمینان، نمونه ها به صورت دوتایی ران شدند و دو نمونه کنترل بدون DNA نیز به کار رفت. آغازگرها، با کمک نرم افزارهای Gene Runner 6. 0. 28، Primer Express v 3. 0. 1 3/1) و Primer3 v. 0. 4. 0 طراحی شدند و روش HRM برای تعیین جهش های فوق به کار رفت.: یافته ها بهترین غلظت مناسب DNA، 5نانوگرم بر میکرولیتر به دست آمد. در مرحله تفاوت نمودار به وضوح تفاوت منحنی ها در شرایط هتروزیگوت، نرمال و هموزیگوت مشاهده شد. در جهش IVSII-IG>A در منحنی ذوب برخلاف انتظار دو قله در نمونه ها دیده شد، علت آن حضور یک پلی مورفیسم در نزدیکی جهش بود.: نتیجه گیری روش HRM قابلیت تشخیص چهار جهش شایع ژن بتاگلوبین را دارد و می تواند بین فرد هتروزیگوت و هموزیگوت و فرد سالم نیز در یک جهش واحد افتراق ایجاد کند. HRM توان بالایی داشته و می تواند 96 نمونه DNA را در مدت دو ساعت آنالیز کند.

مقدمه: ماهیچه قلبی از لحاظ الکتریکی یک بافت فعال است که قادر به جابه جایی و انتقال پیام الکتریکی است و به قلب اجازه ضربان می دهد. در بافت طبیعی قلب پیام های الکتریکی از گره سینوسی-دهلیزی منشا می گیرند و به داخل ماهیچه قلبی منتقل می شوند و انقباض مکانیکی سلول های قلب را القا می کنند. بیماری های قلبی-عروقی که اصلی ترین علت مرگ ومیر در جهان شناخته می شوند غالبا با بی نظمی در ضربان قلب و انقطاع یکپارچگی الکتریکی بافت قلب همراه هستند. در این آریتمی ها، عدم هدایت جریان الکتریکی و هدایت غیرجهت دار موجب عدم جفت شدن های الکتریکی بین سلولی در سطح اتصالات بین سلولی می شود. به دلیل محدودیت های پیوند قلبی به عنوان بهترین درمان رایج برای این بیماری ها، آسیب شناسی و درمان اختلالات بافت الکترواکتیو قلب در سالیان گذشته اهمیت زیادی داشته است. در این مطالعه مروری، ضمن توضیح مختصری در مورد سیستم الکتریکی قلب و نحوه اختلال آن، آخرین مطالعات انجام شده همراه با نتایج به دست آمده و آینده پیش روی روش درمانی مهندسی بافت قلب بر پایه زیست مواد رسانا مورد بررسی قرار گرفت.: نتیجه گیری یکپارچگی الکتریکی، امری ضروری برای عملکرد طبیعی قلب سالم است. از میان روش های نوین درمان نارسایی های قلبی و بهبود یکپارچگی الکتریکی مختل شده ناشی از این نارسایی ها، مهندسی بافت با استفاده از زیست مواد رسانای جریان الکتریکی، در کنار دیگر روش ها بسیار مورد توجه قرارگرفته است. سه ماده اصلی استفاده شده برای مهندسی بافت قلب در مطالعات انجام شده عبارت از: 1-مواد بر پایه طلا، 2-مواد بر پایه کربن و 3-پلیمرهای رسانا هستند...