مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

14
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ و بهینه سازی بیان ژن آنزیم فورمات دهیدروژناز در اشرشیا کلی

صفحات

 صفحه شروع 8705 | صفحه پایان 8717

چکیده

 مقدمه: افزایش گازهای گلخانه ای و گرم شدن زمین باعث توجه جهانی در اصلاح این پدیده گردیده است. آنزیم فورمات دهیدروژناز قادر به کاهش CO2 در تبدیل آن به فورمات بوده که توسط آنزیم الکل دهیدروژناز به متانول تبدیل می شود. هم چنین این آنزیم در فرایند تولید دارو ساکساگلیپتین می تواند مورد استفاده قرار گیرد. هدف این تحقیق ارزیابی اثر غلظت های مختلف القا کننده (Isopropyl ß-D-1-thiogalactopyranoside) IPGT, زمان القا و محیط کشت بر تولید آنزیم فورمات دهیدروژناز می باشد. روش بررسی: این مطالعه یک مطالعه آزمایشگاهی است. در ابتدا پرایمرهای اختصاصی به منظور تکثیر قطعه ژنی طراحی گردید. قطعه ژنی توط پرایمرهای اختصاصی و روش PCR تکثیر گردید. ژن آنزیم فورمات دهیدروژناز داخل  وکتور pET28b وارد و به داخل باکتریE. coli  انتقال یافت. به منظور بهینه سازی بیان پروتئین طراحی آزمایش با روش تاکوچی انجام و تاثیر دما, غلظت القاکننده و نوع محیط کشت بر میزان بیان پروتئین در دو سطح متفاوت, بررسی شد. نتایج: نتایج Colony-PCR تکثیر ژن آنزیم فورمات دهیدروژناز در باکتری E. coli را تایید کرد. بررسی اثر زمان القا کننده و غلظت  IPTG نشان داد زمان وغلظت القاگر اثر منفی بر تولید دارند. بیشترین میزان تولید پروتئین نوترکیب در 24 ساعت بعد از القا⸲ دمای 25 درجه سانتی گراد, غلظت 0/1 IPTG و حضور سوربیتول می باشد. در بررسی اثر محیط کشت بر بیان پروتئین محیط کشت LB بهترین محیط بود. نتیجه گیری: افزایش غلظت IPTG تاثیری در افزایش بیان آنزیم نداشت, در نتیجه می توان با غلظت های کم IPTG پروتئین را تولید کرد که مقرون به صرفه می باشد هم چنین کاهش زمان موجب افزایش بیان پروتئین شود. محیط کشت (Luriabroth) LB همراه سوربیتول مناسب ترین محیط القای بیان آنزیم فورمات دهیدروژناز است.

چندرسانه ای

  • ثبت نشده است.

    • استنادها

  • ثبت نشده است.

    • ارجاعات

  • ثبت نشده است.

    • استناددهی

    مقالات مرتبط نشریه ای

  • ثبت نشده است.

    • مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.

    • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.

    • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button