Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

897
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

539
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

1

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ cDNA پروتئین پراکسیزومی موش و بررسی جای گیری درون سلولی آن

صفحات

 صفحه شروع 196 | صفحه پایان 203

چکیده

 هدف: کلون نمودن cDNA پروتئین پراکسیزومی در پلاسمید یوکاریوتی بیانی EGFP-C1 و بررسی الگوی بیان ژن (Peroxisomal Protein) PEP متصل به مارکر پروتئین سبز فلورسانس در سلول تخمدان خوکچه هندی.مواد و روش ها: پس از استخراج RNA کل سلول از قلب موش بالغ, cDNA مربوطه تهیه شد و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تکثیر PEP cDNA صورت گرفت PEP cDNA .تکثیر شده پس از هضم آنزیمی در پلاسمید EGFP-C1 قرار گرفت. باکتری های  One Shot TOP 10 با محصول اتصال پلاسمید و PEP cDNA ترانس فورم گردید و پس از کشت کلونی های مثبت دارای پلاسمید نو ترکیب با آزمون PCR انتخاب و تکثیر گردیدند و بر روی پلاسمید خالص شده از آنها تست های هضم آنزیمی و تعیین توالی انجام شد. برای بررسی الگوی بیان PEP درون سلول های CHO, این سلول ها با 4 میگروگرم پلاسمید و 10 میکرولیتر لیپوفکتامین 2000 ترانس فکت شدند.یافته ها: نتایج هضم آنزیمی و تعیین توالی ثابت کرد که قطعه تکثیر و کلون شده همان PEP cDNA می باشد. این 630 cDNA جفت بازی کد کننده 209 اسیدآمینه است که بررسی های بیوانفورماتیکی نشان دهنده وجود یک دامنه فیبرونکتین نوع 3 از اسیدآمینه 31 تا 114 و با احتمال بسیار زیاد دو دامنه آلفا هلیکس درون غشایی آب گریز از اسید آمینه 12 تا 32 و 152 تا 169 در آن می باشد. نتایج ترانس فکشن سلولی به همراه رنگ آمیزی اختصاصی کاتالاز ثابت می کند که این پروتئین با سیگنال انتهای کربوکسیل خود, (Serine Lysine Lucine; SKL), به درون اندامک پراکسیزوم منتقل می شود.نتیجه گیری: مطالعات اثبات می کند که PEP یک پروتئین پراکسیزومی است؛ هر چند این پروتئین یک دامنه فیبرونکتین نوع 3 و دو دامنه آب گریز دارد که نقش آنها هنوز نامشخص است.

استنادها

ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    تنهایی، سمیه، قائدی، کامران، کربلایی، خدیجه، استادشریف، مریم، رضوی، شهناز، نظری جهان تیغ، ملیحه، ربیعی، فرزانه، نعمت الهی، مرضیه، بهاروند، حسین، و نصراصفهانی، محمدحسین. (1388). کلونینگ cDNA پروتئین پراکسیزومی موش و بررسی جای گیری درون سلولی آن. یاخته، 11(2 (42))، 196-203. SID. https://sid.ir/paper/16416/fa

    Vancouver: کپی

    تنهایی سمیه، قائدی کامران، کربلایی خدیجه، استادشریف مریم، رضوی شهناز، نظری جهان تیغ ملیحه، ربیعی فرزانه، نعمت الهی مرضیه، بهاروند حسین، نصراصفهانی محمدحسین. کلونینگ cDNA پروتئین پراکسیزومی موش و بررسی جای گیری درون سلولی آن. یاخته[Internet]. 1388؛11(2 (42)):196-203. Available from: https://sid.ir/paper/16416/fa

    IEEE: کپی

    سمیه تنهایی، کامران قائدی، خدیجه کربلایی، مریم استادشریف، شهناز رضوی، ملیحه نظری جهان تیغ، فرزانه ربیعی، مرضیه نعمت الهی، حسین بهاروند، و محمدحسین نصراصفهانی، “کلونینگ cDNA پروتئین پراکسیزومی موش و بررسی جای گیری درون سلولی آن،” یاخته، vol. 11، no. 2 (42)، pp. 196–203، 1388، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/16416/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا