مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

901
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

697
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

تخلیص یوبی کوییتین و تولید آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین

صفحات

 صفحه شروع 251 | صفحه پایان 263

چکیده

 روشهای ایمونوشیمی مانند الایزا, رادیو ایمونواسی و ایمونوفلورسانس, روشهایی حساس و سریع جهت آنالیز یوبی کوییتین و سایر مولکولهای زیستی, بر پایه استفاده از آنتی بادی اختصاصی بعنوان شناساگر می باشند. لذا تهیه آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین همواره یکی از ابزارهای مهم در بررسی و ردیابی این پروتیین است. هدف از این تحقیق تخلیص یوبی کوییتین از گلبولهای قرمز انسان و تولید آنتی بادی اختصاصی علیه آن وکونژوگاسیون آنتی بادی به منظور استفاده در مطالعات ایمونوشیمی می باشد. در این تحقیق ابتدا یوبی کوییتین از گلبولهای قرمز خونی با دناتوراسیون حرارتی و یا  بوسیله سولفات آمونیوم جدا و نهایتا با کروماتوگرافی بر روی ژل DEAE-Sephadex تخلیص گردید. این پروتیین بکمک گلوتارآلدیید به پلی یوبی کوییتین تبدیل و بعنوان ایمونوژن در دوزهای مناسب به خرگوش تزریق گردید. پس از تعیین تیتر آنتی بادی در سرم خرگوشی با روش الایزا و خونگیری در حجم مناسب, جداسازی آنتی بادیهای سرم خرگوشی, از روش ایمونوافینیتی بر روی ستون کروماتوگرافی جذبی فعال شده با پروتیین A, انجام شد. سپس با اتصال یوبی کوییتین به عنوان لیگاند به ژل  CNBr activated sepharose-4Bو عبور آنتی بادیهای خرگوشی مرحله قبل از ستون کروماتوگرافی جذبی متصل به یوبی کوییتین, آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین خالص شد. سپس آنتی بادیهای اختصاصی, با ماده فلورسانس فلورسیین ایزوتیوسیانات کونژوگه و در پایان جهت تائید قابلیت آنتی بادیهای مذکور در شناسایی و اتصال به اپی توپهای پروتیین یوبی کوییتین, تستی به روش ایمونوفلورسانس طراحی شد. نتایج انجام SDS-PAGE برروی یوبی کوییتین تخلیص شده از ستون تعویض یونی و آنتی بادیهای سرمی تهیه شده از ستون جذبی, به صورت تک باند بر روی ژل ظاهر گردید.همچنین بکمک تست الایزا, ویژگی آنتی بادیهای اختصاصی تخلیص شده به پروتیین یوبی کوییتین تائید گردید . در هر بار تخلیص1 mg  یوبی کوییتین به ازای 100 ml گلبول قرمز و 0.6 mg آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین, به ازای 8 ml سرم ایمن شده خرگوش حاصل گردید. در بررسی ایمونوفلورسانس اسپرمهای پوشیده از یوبی کوییتین با توجه به اینکه یوبی کوییتین محور بسیاری از تحقیقات زیستی است به کمک آنتی بادیهای کونژوگه با فلورسیین ایزوتیوسیانات, فلورسانس قابل توجهی در مقایسه با کنترل منفی آزمایش مشاهده گردید لذا تهیه این ماده و آنتی بادی علیه آن, و همچنین کونژوگه کردن این آنتی بادی با ملکولهای فلورکروم امکان بررسی بیشتر عملکرد آن را فراهم می سازد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

    استناددهی

    APA: کپی

    حجت، مهشید، شبانی، اشرف، طالبیان، اصغر، آخوندی، محمدمهدی، قدس، رویا، و صادقی، محمدرضا. (1385). تخلیص یوبی کوییتین و تولید آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین. زیست شناسی ایران، 19(3)، 251-263. SID. https://sid.ir/paper/21377/fa

    Vancouver: کپی

    حجت مهشید، شبانی اشرف، طالبیان اصغر، آخوندی محمدمهدی، قدس رویا، صادقی محمدرضا. تخلیص یوبی کوییتین و تولید آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین. زیست شناسی ایران[Internet]. 1385؛19(3):251-263. Available from: https://sid.ir/paper/21377/fa

    IEEE: کپی

    مهشید حجت، اشرف شبانی، اصغر طالبیان، محمدمهدی آخوندی، رویا قدس، و محمدرضا صادقی، “تخلیص یوبی کوییتین و تولید آنتی بادی اختصاصی علیه یوبی کوییتین،” زیست شناسی ایران، vol. 19، no. 3، pp. 251–263، 1385، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/21377/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button