مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,088
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

736
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت

صفحات

 صفحه شروع 185 | صفحه پایان 196

چکیده

 هدف: هدف از این مطالعه طراحی SiRNA مناسب بر علیه ژن Bcr/Abl و به کار گیری وکتور بیان کننده مناسب(pRNA-H1.1/Neo) , به منظور بیان آن در رده سلولی سرطان لوکمی K562 و بررسی میزان تاثیر آن از طریق بررسی القا آپوپتوزیز پس از انتقال وکتور به داخل سلول می باشد.روش بررسی: بر اساس توالی mRNA مولکول کایمرای ,Bcr-Abl توالی مناسب انتخاب و پس از طراحی آن به صورت ,ShRNA به DNA بیان کننده ShRNA تبدیل و بداخل وکتور بیان pRNA-H1.1/Neo منتقل شد. سپس صحت عمل کلونینگ, با استفاده ازPCR  و تعیین سکانس مورد ارزیابی قرار گرفت. پس از تکثیر وکتور کلون شده با استفاده از لیپوفکتامین بداخل سلول K562 منتقل گردید و کارآیی روش انتقال با استفاده وکتور بیان کننده GFP مورد ارزیابی قرار گرفت. از وکتور اولیه کلون نشده وSiRNA  با توالی غیر اختصاصی نیز به عنوان کنترل منفی استفاده شد. پس از انتقال وکتور بداخل سلول بررسی القا آپوپتوزیز و وابستگی آپوپتوزیز به زمان از طریق سنجش میزان آپوپتوزیز در زمان های مختلف با کمک کیت تشخیص آپوپتوزیز و با استفاده از روش الایزا مورد مطالعه قرار گرفت.یافته ها: با استفاده از نتایج حاصل از PCR و هم چنین تعیین سکانس صحت عمل کلونینگ مورد تایید قرار گرفت. با بیان پروتئین GFP و ظهور رنگ سبز فلورسانس در سلولهای حاوی وکتور, عمل انتقال وکتور میزان کارآیی روش انتقال و بیان وکتور در سلول مورد تایید قرار گرفت کارآیی روش لیپوفکتامین معادل 44% بود. میزان القا آپوپتوزیز در سلولهای K562 آلوده به وکتور کلون شده در مقایسه با سلول های کنترل به میزان قابل توجهی در 24, 48 و 72 ساعت پس از انتقال وکتور افزایش یافت. این افزایش وابسته به زمان بود بطوری که میزان آپوپتوزیز حاصل از غلظت 0.8 میکرومولار در سلولهای حاوی وکتور کلون شده پس از 72 ساعت معادل (P<0.0) %(36±2.3) بود در حالیکه این میزان در سلولهای حاوی وکتور کنترل, سلول های حاوی کنترل منفی و سلول های نرمال به ترتیب معادل %(05.5±0.23) و %(2.5±0.86) ,%(8.4±0.6) بود. در میزان آپوپتوزیز در سلولهای کنترل با گذشت زمان تغییری مشاهده نشد. در حالیکه در سلول های آلوده با وکتور کلون شده متناسب با زمان میزان آپوپتوزیز نیز بطور معنی داری افزایش نشان می دهد. افزایش آپوپتوز با کاهش میزان mRNA ژن Bcr/Abl همراه بود که بیانگر تخریب mRNA توسط SiRNA داخل سلولی و ارتباط آن با آپوپتوزیز است.نتیجه گیری: وکتور بیان کننده SiRNA بر علیه Bcr/Abl بطور موفقیت آمیز کلون شده و نتایج حاصل از مطالعه نشان دهنده بیان داخل سلولی SiRNA توسط این وکتور بود که از طریق کاهش میزان mRNA ژن Bcr/Abl به طور موثری آپوپتوزیز را در سلولهای K562 القا نمود. لذا استفاده از وکتور بیان کننده SiRNA می تواند بعنوان یک روش مولکولی جدید به منظور خاموش کردن ژن در درمان سرطان های مختلف بویژه CML مورد توجه قرار گیرد. 

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    جوادی، حمیدرضا، زارعی محمودآبادی، علی، کمالی، مهدی، حجتی، زهرا، و نجفی، علی. (1387). بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت. مجله پزشکی کوثر، 13(3)، 185-196. SID. https://sid.ir/paper/32764/fa

    Vancouver: کپی

    جوادی حمیدرضا، زارعی محمودآبادی علی، کمالی مهدی، حجتی زهرا، نجفی علی. بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت. مجله پزشکی کوثر[Internet]. 1387؛13(3):185-196. Available from: https://sid.ir/paper/32764/fa

    IEEE: کپی

    حمیدرضا جوادی، علی زارعی محمودآبادی، مهدی کمالی، زهرا حجتی، و علی نجفی، “بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت،” مجله پزشکی کوثر، vol. 13، no. 3، pp. 185–196، 1387، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/32764/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button