مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,053
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

464
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

بهینه سازی وکتور بیانی pET جهت فیوژن کردن پروتئین نوترکیب و بیوپلیمر پلی پپتید شبه الاستین

صفحات

 صفحه شروع 44 | صفحه پایان 55

چکیده

 زمینه و هدف تکنیک DNA نوترکیب, یک روش قدرتمند و مناسب برای تولید بیوپلیمرهای پروتئینی با اختصاصیت در توالی آمینواسید و شیمی فضایی است. پلی پپتید شبه الاستین بیوپلیمری زیست سازگار, زیست تخریب پذیر و غیرایمونولوژیک است که در مطالعات گوناگون بیوتکنولوژی مورد استفاده قرار می گیرد. تگ ELP یک تکنیک ارزان, سریع و غیرکروماتوگرافی برای تخلیص پروتئین های هدف است. در این مطالعه وکتور بیانی pET-MOD جهت کنار هم قرارگیری توالی ژن های ELP و پروتئین نوترکیب هدف, به منظور تولید پروتئین فیوژن نوترکیب به همراه تگ ELP طراحی و ساخته شدند. مواد و روش ها ژن MOD پس از طراحی و سنتز در بین سایت برش XbaI و XhoI موجود در وکتور pET-32a (+) کلون, و به سلول های (E. coli-BL21(DE3 ترانسفرم شد. سپس, کلنی ها بر اساس اندازه پلاسمید جداسازی و به وسیله برش توسط آنزیم های با اثر محدود, بررسی شد. تایید نهایی کلنی های نوترکیبب با استفاده از PCR و توالی یابی (DNA (DNA sequencing انجام گرفت. ملاحظات اخلاقی این مطالعه در کمیته اخلاق دانشگاه علوم پزشکی اراک با کد 11-146-92 تصویب شد. یافته ها جایگزینی توالی MOD در وکتور pET-32a (+) باعث حذف قطعات بیان کننده تگ های فیوژن (Thioredoxin: TRX Histidine: HIS, S-tag), سایت شناسایی هضم آنزیمی پروتئاز (TEV) و جایگاه کلونینگ چندگانه و اضافه کردن توالی های شناسایی آنزیم با اثر محدود اختصاصی ژن ELP و ژن هدف شد. درنتیجه در وکتور بهینه شده pET-MOD کاهش 466 نوکلئوتید در سایز و بهبود ساختار ثانویه حاصل شد. نتیجه گیری با توجه به بهبود ساختار فضایی و کاهش اندازه وکتور pET-MOD, و نیز امکان فیوژن کردن پروتئین نوترکیب با تگ ELP, امکان استفاده اختصاصی از این وکتور به منظور ELPyation پروتئین هدف وجود دارد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

    استناددهی

    APA: کپی

    سلیمان، محمدرضا، خلیلی، مصطفی، سلیمان میگونی، علیرضا، و باعزم، مریم. (1398). بهینه سازی وکتور بیانی pET جهت فیوژن کردن پروتئین نوترکیب و بیوپلیمر پلی پپتید شبه الاستین. مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک (ره‌ آورد دانش)، 22(5 )، 44-55. SID. https://sid.ir/paper/69170/fa

    Vancouver: کپی

    سلیمان محمدرضا، خلیلی مصطفی، سلیمان میگونی علیرضا، باعزم مریم. بهینه سازی وکتور بیانی pET جهت فیوژن کردن پروتئین نوترکیب و بیوپلیمر پلی پپتید شبه الاستین. مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک (ره‌ آورد دانش)[Internet]. 1398؛22(5 ):44-55. Available from: https://sid.ir/paper/69170/fa

    IEEE: کپی

    محمدرضا سلیمان، مصطفی خلیلی، علیرضا سلیمان میگونی، و مریم باعزم، “بهینه سازی وکتور بیانی pET جهت فیوژن کردن پروتئین نوترکیب و بیوپلیمر پلی پپتید شبه الاستین،” مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک (ره‌ آورد دانش)، vol. 22، no. 5 ، pp. 44–55، 1398، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/69170/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا