مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,282
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

597
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

1

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ، بیان و تخلیص ژن بخش انتقال دهنده سم بوتولینوم تیپ A

صفحات

 صفحه شروع 81 | صفحه پایان 92

چکیده

 هدف: سم بوتولینوم تیپ A به لحاظ ساختاری از یک زنجیره سبک به وزن KD 50 و یک زنجیره سنگین به وزن KD 100 تشکیل شده است که به وسیله یک باند دی سولفید به هم متصل شده اند. این پروتئین شامل سه بخش عملکردی است. بخش آنزیمی با فعالیت کاتالیتیک که همان زنجیره سبک می باشد. بخش انتقال دهنده که نیمه انتهایی آمینی زنجیره سنگین است و بخش اتصال دهنده که نیمه انتهایی کربوکسیل زنجیره سنگین را تشکیل می دهد. در این پژوهش هدف از تولید نوترکیب بخش انتقال دهنده سم بوتولینوم تیپ A, مطالعه کارایی این بخش از سم به طور مستقل یا همراه با بخش اتصال دهنده توکسین به منظور دستیابی به یک پروتئین ایمنی زا در تحقیقات بعدی بوده است. از طرف دیگر تولید انبوه این بخش از سم, مطالعه ساختار و مکانیزم دقیق بخش انتقال دهنده را هموار خواهد ساخت.مواد و روشها: باکتری در شرایط بی هوازی رشد داده شد سپس DNA کروموزومی به روش قلیایی استخراج گردید. پس از بررسی ترادف ژن مربوطه و طراحی پرایمر, قطعه مورد نظر از طریق واکنشهای زنجیره ای پلیمرازی (PCR) به وسیله آنالیز آنزیمی ارزیابی شد و بر روی سه ناقل مختلف بیانی pET28a, pRSET A و pET32a همسانه سازی گردید. پروتئین تولید شده به وسیله SDS-PAGE بررسی شد و صحت محصول با روش وسترن بلاتینگ و واکنش الیزا مورد تایید نهایی قرار گرفت و سپس به وسیله کروماتوگرافی میل ترکیبی خالص سازی شد.بحث و نتیجه: در این تحقیق بالاترین بیان در شرایط غلظت 0.5 میلی مولار IPTG, جذب نوری 0.6 و زمان القا 15 ساعت در دمای 30˚c به دست آمد. هر چند بیان ژنهایی که درصد بالایی از AT را برخوردارند در سیستم E.coli ضعیف است اما با این حال بیان مناسبی از این ژن به دست آمد. تخلیص پروتئین نوترکیب در مراحل اولیه به دلیل اتصال ضعیف نشان هیستیدین به ستون دشوار بود که ما با تغییر در روشها توانستیم این پروتئین را تا 90% خالص سازی کنیم.

استنادها

ارجاعات

استناددهی

APA: کپی

موسوی، میرلطیف، امانی، جعفر، تولایی، محمود، و کمالی، مهدی. (1383). کلونینگ, بیان و تخلیص ژن بخش انتقال دهنده سم بوتولینوم تیپ A . پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، 7(2)، 81-92. SID. https://sid.ir/paper/81161/fa

Vancouver: کپی

موسوی میرلطیف، امانی جعفر، تولایی محمود، کمالی مهدی. کلونینگ, بیان و تخلیص ژن بخش انتقال دهنده سم بوتولینوم تیپ A . پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)[Internet]. 1383؛7(2):81-92. Available from: https://sid.ir/paper/81161/fa

IEEE: کپی

میرلطیف موسوی، جعفر امانی، محمود تولایی، و مهدی کمالی، “کلونینگ, بیان و تخلیص ژن بخش انتقال دهنده سم بوتولینوم تیپ A ،” پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، vol. 7، no. 2، pp. 81–92، 1383، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/81161/fa

مقالات مرتبط نشریه ای

مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button