سلول و بافت
سال:1396 | دوره:8 | شماره:1 |تعداد مقالات:10

هدف: هدف از این مطالعه بررسی اثرات ازدیاد بیان ژن فولیستاتین بر چرخه سلولی، بیان ژن های میوژنیک و فاکتور رشد سلول های میوبلاست جنینی گوسفند در محیط آزمایشگاه بود که با استفاده از ویروس AAV سروتیپ 2 حمل کننده فولستاتین انجام شد.مواد و روش ها: سلول های میوبلاست جنینی به دست آمده از جنین های 60 روزه گوسفند در محیط رشد و تمایز، کشت داده شدند. میزان جذب نوری در طول موج 450 نانومتر، به عنوان شاخص تکثیردر سلول های ترانسفکت شده با ویروس AAV2 حمل کننده فولیستاتین، بررسی شد. در نهایت بیان ژن های میوژنین، Myo D، CDK2، Myf 5،p57 و p21 با استفاده از تکنیک ریل تایم qPCR اندازه گیری شد.نتایج: میزان جذب نور (در 450 نانومتر) در سلول های آلوده شده با ویروس به طور معنی داری افزایش یافت که این موضوع نشان می دهد که فولیستاتین می تواند تکثیر را افزایش دهد. ازدیاد فولیستاتین سبب افزایش معنی دار بیان ژن های Akt 1 و CDK2 و کاهش بیان ژن p21 در شرایط تکثیر شد. نتایج ریل تایم نشان داد که بیان ژن های میوژنین، Myo D، Myf 5،p57 و p21 تحت شرایط تمایز با ازدیاد فولیستاتین افزایش یافت.نتیجه گیری: نتایج نشان داد که ازدیاد فولیستاتین سبب افزایش تکثیر سلول میوبلاست از طریق بیان ژن p21 و افزایش تمایز سلول های میوبلاست از طریق افزایش بیان ژن های میوژنیک می شود.

هدف: هدف تحقیق، بررسی دقیق اثرات وابسته به زمان کوپریزون بر پروتئین های MAG، MOG،MBP و PLP و روند تخریب میلین می باشد.مواد و روش ها: مدل تخریب میلین با مصرف پنج هفته غذای حاوی 0.2 درصد کوپریزون ایجاد شد. ناحیه کورپوس کالوزوم مغز موش ها در هفته های 3، 4 و 5 مورد ارزیابی بافتی و مولکولی قرار گرفت و در انتهای هفته پنجم مطالعات رفتاری توسط تست میدان باز انجام شد.نتایج: نتایج نشان داد بیان پروتئین های غلاف میلین در مقایسه با گروه کنترل به صورت وابسته به زمان کاهش یافته است. علی رغم کاهش کلی این پروتئین ها در هفته سوم، در این هفته تنها پروتئین PLP کاهش معنی داری با گروه کنترل نشان داد (p<0.01) همچنین سایر پروتئین ها از هفته چهارم به بعد کاهش بیان معنی داری را نشان دادند. مطالعات میکروسکوپ الکترونی تغییرات معنی دار در کاهش قطر میلین در مقایسه با گروه کنترل را تنها پس از 4 هفته نشان داد (p<0.01) مطالعات رفتاری نیز نشان داد کوپریزون قادر به ایجاد اختلالات رفتاری معنی داری در حیوانات مورد مطالعه در مقایسه با گروه کنترل بود و این تغییرات از هفته سوم به بعد قابل مشاهده بودند.نتیجه گیری: این تحقیق برای اولین بار به بررسی هم زمان پروتئین های اصلی میلین پرداخته و نتایج نشان می دهد بهترین زمان جهت بررسی های دقیق مولکولی، بافتی و رفتاری هفته های چهارم و پنجم می باشند.

هدف: پژوهش حاضر به منظور بررسی اثر داربست کیتوسان/پلی وینیل الکل آمیخته با عصاره مغز نوزاد رت (NRBE) بر تمایز عصبی سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P19 طراحی شد.مواد و روش ها: به منظور القای فنوتیپ عصبی، سلول های بنیادی کارسینومای جنینی رده P19 روی داربست کیتوسان/پلی وینیل الکل آمیخته با عصاره ی مغز نوزاد موش صحرایی کشت شدند. برای ارزیابی توان بقا، مهاجرت و تمایز سلول های کشت سه بعدی، این سلول ها به دستگاه عصبی مرکزی در حال تکوین جنین جوجه پیوند شدند. سرانجام سلول-های پیوندی با استفاده از رو ش های رنگ آمیزی اختصاصی و ایمنوفلورسانس ردیابی شدند.نتایج: رنگ آمیزی اختصاصی کرزیل ویوله، فنوتیپ عصبی سلول های پیوندی را تایید نمود. همچنین بیان پروتئین اختصاصی عصبی، سیناپتوفیزین با استفاده از فرآیند ایمنوفلورسانس نشان داده شد.نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سلول های بنیادی کارسینومای جنینی P19 را می توان به عنوان منبع عظیمی از سلول های پرتوان در مطالعات پیوندی به منظور بررسی جنبه های سلولی و مولکولی تکوین و تمایز سلولی مورد استفاده قرار داد.

هدف: هدف مطالعه حاضر بررسی بیان بهینه Hsp70 نوترکیب کبد ماهی Rutilus Frissi Kutum در باکتری E. coli می باشد.مواد و روش ها: به منظور بررسی میزان بیان پروتئین Hsp70 نوترکیب، باکتری E. coli ترانسفورم شده در محیط LB در زمان های 2، 4، 8، 12، 24، 36 و 48 ساعت، دماهای 20، 25، 30، 37، 45 و 50 درجه سانتی گراد، شرایط pH افراطی (5 و 9) و نیز در حضور فلزات سنگین همانند نقره، کبالت، آهن، کروم، جیوه، سرب، روی، کادمیوم، منگنز و نیکل کشت داده شد سپس با تهیه ی عصاره ی سلولی، میزان بیان Hsp70 با استفاده از SDS-PAGE 12 درصد مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و رنگ آمیزی با کوماسی بلو صورت گرفت.نتایج: بیان بهینه پروتئین Hsp70 نوترکیب در زمان 4 و 8 ساعت، دمای 37 درجه سانتی گراد وpH برابر 5 صورت گرفت. به علاوه در حضور نمک های فلزات منگنز و کبالت، به ترتیب بیشترین و کمترین میزان بیان پروتئین نوترکیب مشاهده شد. همچنین E. coli دارای Hsp70 در مقایسه با باکتری کنترل، نسبت به NaCl تحمل و رشد بیشتری دارد.نتیجه گیری: همه نتایج حاصل از مطالعه نشان می دهد باکتری ترانسفورم شده در مقایسه با باکتری کنترل به دلیل دارا بودنHsp70 نوترکیب در برابر شرایط حاد محیطی قادر به بقا بوده است. پروتئین Hsp70 نوترکیب با خاصیت چاپرونی خود از واسرشت شدن پروتئین های حیاتی جلوگیری کرد است. بنابراین شرایط رشد توصیف شده در این مطالعه می تواند برای تولید بهینه پروتئین Hsp70 نوترکیب در میزبان E. coliاستفاده گردد.

هدف: محصول ژن اورنیتین دکربوکسیلاز-1 (ODC1)آنزیم کلیدی دخیل در سنتز پلی آمین ها است که در انواع سرطان میزان آن ها افزایش می یابد. در این پژوهش اثر عصاره ریشه گیاه شیرین بیان بر بیان ژن ODC1 و درصد زنده مانی در دو رده سلولی سرطانی (MCF-7, MDA-MB-231) و رده نرمال (MCF-10A) سلول های پستانی انسان بررسی می شود.مواد و روش ها: رده های سلولی تحت تاثیر غلظت های افزایشی عصاره از صفر تا 200 میکروگرم در میلی لیتر قرار گرفتند. فعالیت سایتوتوکسیک عصاره با استفاده از سنجش MTT بررسی شد. بررسی کمی بیان ژن ODC1 با استفاده از تکنیک Real-time PCR انجام شد.نتایج: با افزایش غلظت عصاره میزان مرگ و میر سلول ها به ویژه در دو رده سرطانی به طور معنی داری افزایش یافت. همچنین با افزایش غلظت عصاره بیان ژنODC1 در رده های سرطانی کاهش قابل توجهی پیدا کرد و در مقایسه دو رده سرطانی رده MDA-MB-231 بیشتر تحت تاثیر عصاره گیاه شیرین بیان قرار گرفت.نتیجه گیری: نتایج این تحقیق حاکی از اثر بالقوه عصاره گیاه شیرین بیان بر بیان ژن ODC1 در سلول های سرطانی پستان انسان و ارتباط آن با مهار رشد سلول های سرطانی است.

هدف: هدف از این پژوهش، پارامترهای اسپرمی (غلظت، تحرک و مورفولوژی) و وضعیت سلامت DNA اسپرم را در مردان ناباروری که در معرض مواجهات شغلی مختلف می باشند، است.مواد و روش ها: 152 مردی که برای اهداف تشخیصی به مرکز باروری و ناباروری مراجعه کرده بودند،( بهار 1393 تا پاییز 1395) وارد این مطالعه شدند. با همه شرکت کنندگان مصاحبه شد و نمونه مایع منی آن ها برای بررسی پارامترهای اسپرمی و سلامت کروماتین اسپرم به ترتیب بر اساس پروتکل سازمان بهداشت جهانی و روش TUNEL جمع آوری شد.نتایج: نتایج نشان می دهند که در مردانی که در معرض مواد شیمیایی، نشستن طولانی مدت و با فعالیت فیزیولوژیکی بالا می باشند، درصد تحرک اسپرم کمتر و درصد آسیب DNA اسپرم بیشتر از معیارهای ارائه شده در مقالات قبلی می باشد. به علاوه، در مردان با آسیب DNA بیشتر از 10 درصد، کاهش معنی داری در پارامترهای اسپرمی مشاهده شد.نتیجه گیری: مواجهات شغلی دارای اثرات منفی بر روی کیفیت پارامترهای اسپرمی و سلامت کروماتین اسپرم می باشد، اما مطالعات بیشتری برای اثبات این نتایج لازم است.

هدف: در این پژوهش مواد هیبرید جامد حاصل از کمپلکس باز شیف در داخل و روی سطح زئولیت NaY، تهیه شدند و سپس خاصیت ضد باکتری آن ها در برابر باکتری های مختلف (باکتری های گرم منفی و گرم مثبت) بررسی شد.مواد و روش ها: ابتدا ترکیبات با خاصیت ضد باکتری از طریق روش سنتز پی در پی تهیه شدند. به طوری که کمپلکس های باز شیف فلزات واسطه به دو روش یک بار از طریق روش کشتی درون بطری داخل حفرات زئولیت NaY و بار دیگر از طریق عامل-دار کردن که همان اصلاح سطح ترکیبات حفره دار می باشد، بر روی سطح زئولیت NaY بارگذاری شدند. در بخش دوم، فعالیت ضد باکتری ترکیبات سنتز شده در سطح آزمایشگاهی در مقابل باکتری های گرم مثبت (باسیلوس سابتلیس و استافیلوکوکوس اورئوس) و گرم منفی (اشریشیاکلی و سودوموناس آئروژینوزا) مورد بررسی قرار گرفت.نتایج: نتایج نشان داد که مواد هیبرید جامد حاصل از کمپلکس باز شیف و زئولیت NaY فعالیت ضد باکتری بسیار خوب (در برابر باکتری های گرم منفی اشریشیاکلی و سودوموناس آئروژینوزا) و قابل مقایسه ای با آنتی بیوتیک جنتامایسین و نالیدیکسیک اسید، به عنوان نمونه های استاندارد دارند. همچنین فعالیت ضد باکتری تا 24 ساعت همچنان ادامه داشت.نتیجه گیری: مواد هیبرید جامد حاصل از کمپلکس باز شیف و زئولیت NaY فعالیت ضد باکتری بسیار خوب و قابل مقایسه ای با داروهای استاندارد دارند. خصوصا این ترکیبات قابلیت چندین بار استفاده بدون اینکه خاصیت خود را از دست داده باشند را دارند و تهیه آن ها از نظر صنعتی مقرون به صرفه می باشد.

هدف: در این تحقیق از بیش بیان فاکتورهایNurr1 وGDNF، به دلیل پتانسیل ضدالتهابی و ترمیمی آن ها و نیز نقش Nurr1در تنظیم بیان ژن گیرنده GDNF (Ret)، با هدف حفاظت سلول های دوپامین سازSH-SY5Y در مقابل التهاب عصبی و نیز مسمومیت6- OHDA استفاده شد.مواد و روش ها: ابتدا لنتی ویروس های نوترکیب حامل ژن هایNurr1 وGDNF تهیه و به ترتیب به سلول های SH-SY5Y و آستروسیتوما ترانسداکت شدند. همچنین برای تولید بهینه فاکتور GDNF، سلول های HEK-293T با ناقل پلاسمیدی مربوطه ترانسفکت و محیط مشروط آن ها و نیزسلول های آستروسیتوما، حاوی فاکتور GDNF، جمع آوری شد. بیش بیان ژن های مزبور با RT-PCR به اثبات رسید. از سوی دیگرسلول های میکروگلیا از مغز نوزاد رت جداسازی و متعاقبا با لیپوپلی ساکارید (LPS) فعال و نهایتا بیان فاکتورهایTNF-a و iNOS در آن ها با تستگریسوRT-PCR اثبات شد، محیط مشروط میکروگلیا جمع آوری و به همراه محیط مشروط سلول های آستروسیتوماHEK-293T/ به سلول های SH-SY5Yافزوده شد. رده یSH-SY5Y به صورت جداگانه نیز با محیط مشروط آستروسیتوما HEK- 293T/ و توکسین 6- OHDA تیمار شد.نتایج: آنالیز MTT نشان داد سلول های SH-SY5Y با بیان فزاینده Nurr1 و یا در حضور GDNF، مقاومت بیشتری در برابر التهاب عصبی و توکسین 6- OHDA نشان می دهند. همچنین GDNF و Nurr1 با هم اثر سینرژیک داشته و مقاومت بیشتری را به سلول های دوپامین ساز عطا می کنند.نتیجه گیری: فاکتورهایNurr1 و GDNF به تنهایی و نیز به صورت توام و سینرژیک، اثر حفاظتی بر نورون های دوپامین ساز در مقابل عوامل التهابی و توکسین 6- OHDA دارند.