مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,053
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

0
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

استرپتوکیناز: استخراج، کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال با رویکرد تسهیل در فرآیند خالص سازی

صفحات

 صفحه شروع 245 | صفحه پایان 252

چکیده

 سابقه و هدف: استرپتوکیناز به عنوان شناخته شده ترین داروی فیبرینولیتیک, مدت مدیدی است که در درمان سکته قلبی استفاده می شود. ویژگیهای ساختاری ساده این پروتئین زمینه لازم برای دستیابی به انواع نوترکیب آن را فراهم ساخته است. هدف از این تحقیق تهیه سوش استرپتوکوک equisimilis H46A (پربازده از نظر تولید استرپتوکیناز) برای اولین بار در ایران بود تا پس از استخراج DNA, ژن استرپتوکیناز بگونه ای تکثیر شود که امکان کلون سازی آن در حاملهای متعدد بوجود آید.روش بررسی: پس استخراج DNA ژنومی ژن استرپتوکیناز از دو ناحیه با استفاده از دو پرایمر بالادست و یک پرایمر پایین دست ضمن در نظر گرفتن یک جایگاه آنزیم برش دهنده معمول برای دو سر محصولات (کل ORF, 1323bp و قسمت مربوط به پروتئین بالغ, 1245bp) تکثیر شد و در حامل pGEX-4T-2 تحت پروموتور قوی tac و قابلیت بیان بالا کلون شد. پلاسمید نوترکیب حاصل بوسیله عملیات هضم دو طرفه و تعیین توالی, تایید و در اشریشیاکلی سویه BL21(DE3)plysS ترانسفورم شد. میزان بیان و فعالیت استرپتوکیناز نوترکیب مربوط به کلون واجد قطعه 1245bp با استفاده از دانسیتومتر لیزری و تست اختصاصی با سوبسترای S2251 در مقایسه با یک نمونه استرپتوکیناز خارجی مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته ها: استفاده از یک آنزیم برش دهنده برای دو سر قطعه ژن, کلون شدن آن را در تعداد زیادی از حاملهای بیانی امکان پذیر ساخت. میزان بیان پروتئین نوترکیب به بیش از 45% کل پروتئینهای میزبان, موفقیت در کلون سازی را تایید کرد. وجود دم اتصالی گلوتاتیون S ترانسفراز (GST) مانع فعالیت استرپتوکیناز نشد و مقدار آن بدون بهینه سازی و تخلیص شرایط کشت بیش از 15000u/ml از کشت ثبت شد.نتیجه گیری: استفاده از حامل pGEX-4T-2 ضمن تولید استرپتوکیناز نوترکیب فعال و با بازدهی فراوان, دم GST را نیز به ابتدای آمینی آن اضافه می کند که می توان از آن برای تخلیص یک مرحله ای و آسان با استفاده از لیگاند گلوتاتیون سود برد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    نژادمقدم، محمدرضا، مدرسی، سیدمحمدحسین، باباشمسی، محمد، و چمن خواه، محمود. (1385). استرپتوکیناز: استخراج, کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال با رویکرد تسهیل در فرآیند خالص سازی. پژوهش در پزشکی، 30(3)، 245-252. SID. https://sid.ir/paper/41746/fa

    Vancouver: کپی

    نژادمقدم محمدرضا، مدرسی سیدمحمدحسین، باباشمسی محمد، چمن خواه محمود. استرپتوکیناز: استخراج, کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال با رویکرد تسهیل در فرآیند خالص سازی. پژوهش در پزشکی[Internet]. 1385؛30(3):245-252. Available from: https://sid.ir/paper/41746/fa

    IEEE: کپی

    محمدرضا نژادمقدم، سیدمحمدحسین مدرسی، محمد باباشمسی، و محمود چمن خواه، “استرپتوکیناز: استخراج, کلون سازی و بیان بالای پروتئین نوترکیب فعال با رویکرد تسهیل در فرآیند خالص سازی،” پژوهش در پزشکی، vol. 30، no. 3، pp. 245–252، 1385، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/41746/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources
    فایل موجود نیست.
    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button