مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,862
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

604
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B

صفحات

 صفحه شروع 1392 | صفحه پایان 1404

چکیده

 مقدمه: DNA پلیمرازها آنزیم هایی هستند که سنتز مولکول DNA را از دئوکسی ریبونوکئوتیدها بر عهده دارند. این آنزیم ها ابزارهای ضروری در زیست شناسی مولکولی به حساب می آیند. DNA پلیمراز Pfu از یک آرکئوباکتری گرمادوست که در رسوبات دریایی با دمای 100-90 درجه سلسیوس زندگی می کند, جدا گردیده است. این آنزیم, خصوصیت اگزونوکلئازی 3 به 5 را دارد که باعث اصلاح خطاهای ناشی از همانندسازی DNA می شود.روش ها: در این مطالعه, قطعه کد کننده ژن DNA پلیمراز Pfu در ناقل بیانی pET-b15 کلون گردید. سپس با تغییر شرایط بیان مانند غلظت IPTG (Isopropyl b-D-1-thiogalactopyranoside), زمان و دمای القا, بیان این آنزیم بهینه شد. در نهایت در شرایط بهینه, پروتئین در مقیاس بالا تهیه و به روشی ساده تخلیص گردید. سپس آنزیم تخلیص شده, جهت بررسی فعالیت در واکنش PCR (Polymerase chain reaction) به کارگرفته شد.یافته ها: کلونی هایی بعد از ترانسفورماسیون پلاسمید نوترکیب ایجاد شد که اکثر آن ها حاوی پلاسمید بودند. بیان آنزیم Pfu باندی را در حدود KD 90 در ژل الکتروفورز SDS-PAGE (Sodium do decyl sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis) نتیجه داد. بیشترین میزان تولید پروتئین با غلظت %75 میلی مولار ماده القا کننده IPTG, دمای 37 درجه سلسیوس و 3 ساعت پس از القا مشاهده شد.نتیجه گیری: تخلیص پروتئین با به کارگیری روشی جدید بر مبنای پروتکل Desai منجر به ایجاد محصولی شد که در واکنش PCR فعالیتی مشابه با نمونه تجاری داشت.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    خلیلی بروجنی، زهرا، عابدی، داریوش، عباسیان، مهدی، و مفید، محمدرضا. (1392). بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B. مجله دانشکده پزشکی اصفهان، 31(251)، 1392-1404. SID. https://sid.ir/paper/50579/fa

    Vancouver: کپی

    خلیلی بروجنی زهرا، عابدی داریوش، عباسیان مهدی، مفید محمدرضا. بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B. مجله دانشکده پزشکی اصفهان[Internet]. 1392؛31(251):1392-1404. Available from: https://sid.ir/paper/50579/fa

    IEEE: کپی

    زهرا خلیلی بروجنی، داریوش عابدی، مهدی عباسیان، و محمدرضا مفید، “بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B،” مجله دانشکده پزشکی اصفهان، vol. 31، no. 251، pp. 1392–1404، 1392، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/50579/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button