Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,714
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

469
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت

صفحات

 صفحه شروع 534 | صفحه پایان 543

چکیده

 مقدمه: فن اوری تهیه انتی بادی بر پایه تک سلول B روشی نوین در تهیه انتی بادی مونوکلونال انسانی محسوب می گردد. مهم ترین بخش این فن اوری, کشت طولانی مدت پلاسماسل جدا شده از خون جهت ترشح انتی بادی است. با توجه به این که دلیل زنده ماندن طولانی مدت پلاسماسل ها در مغز استخوان حضور سیگنال های اطراف ان ها است, جهت کشت پلاسماسل درشرایط In vitro لازم است این سیگنال ها به واسطه حضور یک لایه سلول تغذیه کننده تامین شوند. به نظر می رسد که از میان انواع مختلف این سلول ها, سلول های استرومای مغز استخوان (BMSCs یا Bone marrow stromal cells) گزینه مناسب تری جهت هم کشتی با پلاسماسل محسوب می گردند. هدف از این پژوهش, جداسازی پلاسماسل های ترشح کننده انتی بادی از خون محیطی و زنده نگهداشتن ان ها در شرایط In vitro می باشد.روش ها: پس از تزریق واکسن کزاز, تیتر انتی بادی در سرم خون افراد داوطلب با روش (Enzyme-linked immunosorbent assay) ELISA اندازه گیری شد PBMCs ((Peripheral blood mononuclear cells جدا شده از خون فرد ایمن با آنتی بادی های رنگی اختصاصی سه نشانگر سطحی 45CD, 19CD و 38CD رنگ امیزی شدند. پس از ان پلاسماسل ها به روش FACS ((Fluorescence-activated cell sorting از سایر جمعیت های سلولی موجود, جدا و در پلیت 96 خانه ای Sort شدند. سپس همراه با یک لایه BMSCs کشت داده شدند. پس از گذشت 10 روز, از پلاسماسل ها RNA استخراج شد و واکنش RT-PCR ( (Reverse transcription polymerase chain reactionبا استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن انتی بادی انجام شد.یافته ها: روز ششم پس از واکسیناسیون, تیتر انتی بادی سرم, IU/ml 16به دست امد که نشان از پاسخ ایمنی بسیار مناسب در مقابل واکسن کزاز بود. همچنین, آنالیز فلوسایتومتری نمونه خون محیطی فرد ایمن شده در روز هفتم, درصد پلاسماسل موجود در PBMCs را حدود 0.3 درصد نشان داد. در نتیجه انجام واکنش RT-PCR با پرایمرهای اختصاصی ژن انتی بادی, قطعه VH ((Variable heavy chain به طولbp 400  تکثیر شد. این نتیجه, زنده بودن پلاسماسل ها و همچنین بیان ژن انتی بادی را در روز دهم در شرایط هم کشتی با BMSCs تایید نمود.نتیجه گیری: حاصل این پژوهش, فراهم اوردن شرایط مناسب به منظور کشت پلاسماسل برای مدت 10 روز در محیط In vitro بود. بنابراین بخشی از فن اوری نوین تهیه انتی بادی بر پایه تک سلول B نیز پایه گذاری شد. نتایج به دست امده در این پژوهش شامل درصد پلاسماسل موجود در PBMCs و اندازه قطعه ژنی VH تکثیر شده, با سایر مطالعات انجام شده در این زمینه مطابقت داشت.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    بزاز، معصومه، فلاح مهرآبادی، جلیل، مهدوی، مهدی، و زین الدینی، مهدی. (1393). جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت. مجله دانشکده پزشکی اصفهان، 32(282)، 534-543. SID. https://sid.ir/paper/51211/fa

    Vancouver: کپی

    بزاز معصومه، فلاح مهرآبادی جلیل، مهدوی مهدی، زین الدینی مهدی. جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت. مجله دانشکده پزشکی اصفهان[Internet]. 1393؛32(282):534-543. Available from: https://sid.ir/paper/51211/fa

    IEEE: کپی

    معصومه بزاز، جلیل فلاح مهرآبادی، مهدی مهدوی، و مهدی زین الدینی، “جداسازی پلاسماسل از خون محیطی و هم کشتی با سلول استرومای مغز استخوان به منظور کشت طولانی مدت،” مجله دانشکده پزشکی اصفهان، vol. 32، no. 282، pp. 534–543، 1393، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/51211/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا