مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,338
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

758
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

بیان، خالص سازی و بررسی فعالیت آنزیم آسپارتیل پروتئیناز ترشحی SAP2 کاندیدا آلبیکنس در سیستم مخمری پیکیا پاستوریس

صفحات

 صفحه شروع 71 | صفحه پایان 83

چکیده

 هدف: آنزیم آسپارتیل پروتئیناز ترشحی (SAP2) کاندیدا آلبیکنس نقش محوری در اتصال, تهاجم و بیماری زایی این مخمر فرصت طلب دارد. هدف از این مطالعه کلون نمودن, بیان و بررسی خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم SAP2 است. همچنین در این تحقیق برای اولین بار, از سیستم یوکاریوتی پیکیا پاستوریس برای بیان پروتئین نوترکیب SAP2 استفاده شد.مواد و روش ها: ژن Sap2 کاندیدا آلبیکنس با انتهاهای چسبان EcoR1 و SacII توسط PCR تکثیر و درون ناقل T/A ساب کلون شد. با استفاده از آغازگرهای عمومی توالی این ژن تعیین شد و سپس درون ناقل بیانی pGAPZaA قرار گرفت. سازه نوترکیب به درون مخمر پیکیا پاستوریس انتقال داده شد. ژن Sap2 طی پدیده نوترکیبی همولوگ درون ژنوم مخمری پیکیا پاستوریس داخل شد. پروتئین بیان شده به کمک روش وسترن بلاتینگ و با استفاده از آنتی بادی مونوکلونال بر علیه پروتئین SAP2 تایید شد. در نهایت پروتئین به دست آمده با کمک ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی Ni-NTA تخلیص و فعال بودن آنزیم تایید شد.نتایج: در این تحقیق تکثیر ژن Sap2 کاندیدا آلبیکنس و وارد نمودن آن درون ژنوم مخمر بیانی پیکیا پاستوریس با روش نوترکیبی همولوگ انجام شد. علاوه بر این, کلونی از مخمر را به دست آمد که پروتئین نوترکیب SAP2 را به محیط ترشح می کرد. بالاترین بیان پس از طی زمان 96 ساعت در دمای 30 درجه سانتی گراد به دست آمد.نتیجه گیری: القای ژن Sap2 در مخمر پیکیا پاستوریس منجر به افزایش قدرت بیان انبوه این ژن نسبت به سیستم بیانی باکتریایی می شود. همچنین نیاز به تغییرات بعد از ترجمه و فعال نمودن آنزیم, به علت استفاده از سیستم بیانی یوکاریوتی, از بین می رود. برطبق یافته های تحقیق حاضر, آسپارتیل اسید پروتئیناز تخلیص شده در این تحقیق خود فعال بوده و قادر به تجزیه BSA به عنوان یک سوبسترا است. این پروتئین نوترکیب در pH اسیدی بیشترین فعالیت را دارد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    محمودی، الهه، کلهر، حمیدرضا، یادگاری، محمدحسین، صادقی زاده، مجید، و محمدحسن، زهیر. (1388). بیان, خالص سازی و بررسی فعالیت آنزیم آسپارتیل پروتئیناز ترشحی SAP2 کاندیدا آلبیکنس در سیستم مخمری پیکیا پاستوریس. پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، 12(4)، 71-83. SID. https://sid.ir/paper/81244/fa

    Vancouver: کپی

    محمودی الهه، کلهر حمیدرضا، یادگاری محمدحسین، صادقی زاده مجید، محمدحسن زهیر. بیان, خالص سازی و بررسی فعالیت آنزیم آسپارتیل پروتئیناز ترشحی SAP2 کاندیدا آلبیکنس در سیستم مخمری پیکیا پاستوریس. پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)[Internet]. 1388؛12(4):71-83. Available from: https://sid.ir/paper/81244/fa

    IEEE: کپی

    الهه محمودی، حمیدرضا کلهر، محمدحسین یادگاری، مجید صادقی زاده، و زهیر محمدحسن، “بیان, خالص سازی و بررسی فعالیت آنزیم آسپارتیل پروتئیناز ترشحی SAP2 کاندیدا آلبیکنس در سیستم مخمری پیکیا پاستوریس،” پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، vol. 12، no. 4، pp. 71–83، 1388، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/81244/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button