مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

150
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

70
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

بهینه سازی بیان پروتئین اینترلوکین-5 در باکتری Escherichia Coli سویه ی BL21

صفحات

 صفحه شروع 694 | صفحه پایان 700

چکیده

 مقدمه: در آسم, رابطه ی بین تعداد ایوزینوفیل ها و شدت بیماری, این فرضیه را تقویت می کند که ایوزینوفیل, سلول موثر اصلی در التهاب راه های هوایی است. تکامل ایوزینوفیل به طور عمده با اینترلوکین-5 تنظیم می شود. بنابراین, با ممانعت از عملکرد اینترلوکین-5 (IL-5), می توان حداقل یکی از دلایل ایجاد آسم را سرکوب کرد. برای تولید آنتاگونیست هایی مثل آپتامر ضد اینترلوکین-5, لازم است این پروتیین به مقدار زیاد و با خلوص بالا بیان گردد. مطالعه ی حاضر با هدف تهیه ی اپتامر ضد IL-5 به جای آنتی بادی جهت استفاده در درمان بیماری های ایوزینوفیلیک و بیان این پروتیین در یک سیستم پروکاریوتی انجام شد. روش ها ابتدا سازه ی حاوی complementary DNA (cDNA) ژن پروتیین اینترلوکین-5 طراحی و سفارش ساخت در وکتور pET28a داده شد. وکتور بیانی به باکتری های مستعد شده ی Escherichia coli BL21 (DE3) تبدیل شد. سپس, بیان پروتیین با تغییر شرایط دما و زمان انکوباسیون و میزان Isopropyl β-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG) بهینه گردید. ارزیابی بیان پروتیین با به کار گیری روش های Western blot و Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) و در مراحل مختلف صورت گرفت. یافته ها شرایط بهینه برای بیان پروتیین اینترلوکین-5, غلظتی از باکتری که در طول موج 600 نانومتر جذب بین 8/0-6/0 داشت, غلظت نهایی 1 میلی مولار برای IPTG, 18 ساعت انکوباسیون در دمای 29 درجه ی سانتی گراد و شتاب 150 دور/دقیقه بود. باند 13 کیلودالتونی روی ژل پلی آکریل آمید در SDS-PAGE و غشای نیتروسلولزی در روش Western blot تایید کننده ی بیان پروتیین اینترلوکین-5 بود. نتیجه گیری از این پروتیین, در فرایندهایی چون تهیه ی آپتامر بر علیه IL-5 و کیت های Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)ی مخصوص اندازه گیری IL-5 می توان استفاده نمود. در این فرایندها, به آنتی ژن با فولدینگ بسیار صحیح نیاز نمی باشد. بنابراین, بیان در سیستم پروکایوتی به علت بازده بالا انجام شد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    جمالوندی، مینا، خان احمد، حسین، ایرانی، شیوا، و بسطامی نژاد، صیاد. (1399). بهینه سازی بیان پروتئین اینترلوکین-5 در باکتری Escherichia Coli سویه ی BL21. مجله دانشکده پزشکی اصفهان، 38(592 )، 694-700. SID. https://sid.ir/paper/954086/fa

    Vancouver: کپی

    جمالوندی مینا، خان احمد حسین، ایرانی شیوا، بسطامی نژاد صیاد. بهینه سازی بیان پروتئین اینترلوکین-5 در باکتری Escherichia Coli سویه ی BL21. مجله دانشکده پزشکی اصفهان[Internet]. 1399؛38(592 ):694-700. Available from: https://sid.ir/paper/954086/fa

    IEEE: کپی

    مینا جمالوندی، حسین خان احمد، شیوا ایرانی، و صیاد بسطامی نژاد، “بهینه سازی بیان پروتئین اینترلوکین-5 در باکتری Escherichia Coli سویه ی BL21،” مجله دانشکده پزشکی اصفهان، vol. 38، no. 592 ، pp. 694–700، 1399، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/954086/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

  • ثبت نشده است.
  • مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button