زیست فناوری میکروبی
سال:1390 | دوره:3 | شماره:9 |تعداد مقالات:8

زمینه و هدف: سرم جنین گاو یکی از پرمصرف ترین مکمل ها در کشت سلولی به منظور تحریک تکثیر سلول ها و محصولات زیستی می باشد. از آنجایی که احتمال آلودگی سرم حیوانات مثل سرم جنین گاو با عوامل ویروسی، باکتریایی، قارچی و ایمونوگلوبولین ها وجود دارد، استفاده از یک روش مناسب برای سترون نمودن این مواد ضروری می باشد. در چند سال اخیر به استفاده از اشعه گاما به عنوان یکی از روش های سترون سازی دارو و مواد بیولوژیک توجه زیادی شده است. در مطالعه حاضر تاثیر دزهای مختلف اشعه گاما را در سترون سازی سرم جنین گاو و مقایسه آن با روش فیلتراسیون مورد بررسی قرار گرفته است.روش بررسی: بدین منظور ابتدا نمونه های سرم خام جنین گاو در سه سری تهیه شد. هر سری به هشت تیمار مختلف تقسیم گردید که شامل گروه های زیر بود: سرم خام، سرم فیلترشده و دریافت کنندگان 5، 10، 15، 20، 25 و 35 کیلوگری اشعه گاما (با نرخ دز 5.6 گری در ثانیه). پس از تابش اشعه، نمونه های مختلف در هر سری از نظر سترون بودن بررسی شدند و نتایج در تیمارهای مختلف مورد مقایسه قرار گرفتند.یافته ها: نتایج بدست آمده نشان داد که در تیمارهای دریافت کننده دز 10 کیلوگری و بالاتر هیچ نوع آلودگی باکتریایی، قارچی، مایکوپلاسمایی و ویروسی قابل رشد در شرایط آزمایش، باقی نماند. در حالی که روش فیلتراسیون توانایی حذف کامل آلودگی های ویروسی را نداشت.نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده در این آزمایش، می توان از اشعه گاما به عنوان روشی مطمئن در سترون کردن سرم جنین گاو استفاده نمود و میزان دز مورد استفاده در سترون کردن محصولات، به شرایط تهیه محصول و موارد مصرف بستگی دارد.

زمینه و هدف: پلیمرهای سنتتیک که از مواد نفتی ساخته می شوند به علت تجزیه ناپذیربودن مدت طولانی در خاک باقیمانده و موجب آلودگی خاکها می شوند، به این دلیل تولید پلی بتاهیدروکسی بوتیرات که از جمله پلیمرهای قابل تجزیه زیستی است اهمیت زیادی دارد. این پلیمر در بیش از 20 جنس باکتریایی از جمله: باسیلوس، ازتوباکتر، آلکالی ژنز، سودوموناس، ریزوبیوم و رودوسپیریلیوم به عنوان منبع ذخیره کربن و انرژی تولید می شوند. در این راستا هدف از انجام این تحقیق تولید این پلیمر در جدایه باسیلوس می باشد.روش بررسی: در این مطالعه 11 سویه از جنسهای مزوفیل باسیلوس که در دمای 30 درجه سانتی گراد و 7 سویه از جنسهای ترموفیل باسیلوس که در 50 درجه سانتی گراد رشد می کردند از خاک جنگل گلستان به روش پورپلیت جداسازی شدند. تولید پلیمر در این سویه ها ابتدا با روشهای اسپکتروفوتومتری بررسی شد و سپس با روشهای گازکروماتوگرافی جرمی و FT-IR تایید شد.یافته ها: محدوده تولید پلیمر در مزوفیلها 48.7-6.72% و در ترموفیلها 39.21-3.84 درصد وزن خشک سلولی بود. بیشترین میزان تولید در مزوفیلها در سویه B11 با %48.70 و در ترموفیلها در سویه B4 با %39.21 بود. بهترین دور شیکر و دما برای سویه منتخب مزوفیل دور 200 و 32 درجه سانتی گراد و برای ترموفیل B4 دور 200 و دمای 45 درجه بود.نتیجه گیری: با توجه به نیازهای غذایی ساده و وفور اعضای جنس باسیلوس در خاک، می توان در آینده و با استفاده از فرمانتور از این دو سویه به عنوان یکی از تولیدکننده های این پلیمر استفاده کرد.

زمینه و هدف: مایکوتوکسینها سمومی هستند که توسط قارچهای کپکی خاکزی تولید شده و به فراوانی در محیط و مواد غذایی وجود دارند. مهمترین گروه این سموم آفلاتوکسینها هستند که توسط چند گونه کپک از جنس Aspergellus تولید می شوند که قوی ترین و خطرناکترین نوع آنها آفلاتوکسین B1 است که عوارض سمی مختلفی دارد که شایع ترین این عوارض در انسان ایجاد سرطان کبد است. تحقیقات نشان داده است که گروهی از باکتریهای غیربیماریزا به نام باکتریهای اسید لاکتیک توانایی اتصال به آفلاتوکسین B1 و سایر آفلاتوکسینها و جداسازی آنها ازمحیط و مواد غذایی را دارند. هدف از انجام این تحقیق به دست آوردن باکتریهای اسید لاکتیکی است که به کمک توانایی آنها در اتصال و جداسازی آفلاتوکسین B1 از آنها به عنوان مکمل غذایی ویا پروبایوتیک برای جلوگیری از جذب آفلاتوکسین B1 در بدن انسان و دام استفاده نمود.روش بررسی: در این تحقیق باکتریها از 5 گروه منابع مختلف جداسازی شدند. برای بررسی توانایی این باکتریها در جداسازی آفلاتوکسین B1 از آزمون الایزا استفاده شد و برای شناسایی سویه های به دست آمده از روش تعیین توالی S rRNA16 با استفاده از پرایمرهای یونیورسال استفاده شد.یافته ها: در میان سویه های جدا شده دو سویه Lactobacillus pentosus و Lactobacillus berevis توانایی جذب و جداسازی آفلاتوکسین B1را داشتند که به ترتیب %17.4 و %34.7 از آفلاتوکسین B1 موجود در نمونه مورد آزمایش را جذب کرده و از محلول خارج کرده بودند.نتیجه گیری: باکتری L.pentosus از مدفوع انسان و باکتری L.berevis از نمونه شیر محلی جداسازی شده بودند. برای بررسی معنی دار بودن نتایج به دست آمده از نرم افزار SPSS 16 استفاده شد.

زمینه و هدف: تولید رنگدانه توسط میکروارگانیسم ها نسبت به منابع دیگر بسیار اهمیت دارد، زیرا میکروارگانیسم ها با رشد سریع، بازدهی بالاتر و استخراج راحت تر مزایای بیشتری دارند. هدف از این مطالعه جداسازی و شناسایی میکروارگانیسمهای تولیدکننده رنگدانه از خاکهای مناطق غرب استان مازندران در نیمه دوم سال 1389 و بررسی اثرات سمی رنگدانه ها می باشد.روش بررسی: 70 نمونه خاک از کوههای غرب استان مازندران جمع آوری و پس از تهیه رقت، هر نمونه بر روی محیط نوترینت آگار و سابورود دکستروز آگار کشت داده شد. سپس کلنی هایی با تولید رنگدانه انتخاب شدند. استخراج رنگدانه از طریق عصاره گیری رسوب بوسیله متانول انجام شد. تعداد ترکیبات عصاره رنگی بوسیله TLC شناسایی گردید. شناسایی مولکولی میکروارگانیسم ها از طریق rDNA PCR Sequencing انجام شد. همچنین سمیت حاد خوراکی رنگدانه ها بر موش های سوری ارزیابی گردید.یافته ها: 7 میکروارگانیسم شاملAspergillus sp ،viridans Aerococcus ،Methylobacterium sp ،Bacillus sp ، Eurotium rubrum، Microbacterium testaceum و Acinetobacter johnsonii شناسایی شدند. بررسی سمیت رنگدانه میکروارگانیسم ها بر روی موش در حداکثر دوز فاقد مرگ ومیر بود. بررسی آنزیم های کبدی و هیستوپاتولوژی نشان دهنده اثرات سمی اما قابل برگشت در حداکثر دوز بر بافت کبد بوده است.نتیجه گیری: با توجه به اینکه رنگدانه های طبیعی در دوز مناسب سالم تر از نوع شیمیایی هستند، استفاده آنها در صنایع مختلف مفید می باشد. همچنین با تعیین ساختار رنگدانه ها و حذف گروههای سمی رنگدانه ها می شود در صنایع مختلف استفاده نمود.

زمینه و هدف: درمان با واسطه میکروبی امری در حال توسعه است، که در آن پروبیوتیک ها به خصوص باکتری های لاکتیک اسید نقش اساسی دارند. در این مطالعه سعی شده تا خواص ضد میکروبی پروبیوتیک ها بر روی تعدادی از پاتوژن های شایع دستگاه گوارش بررسی شود.روش بررسی: در این مطالعه دو سویه لاکتوباسیلوس، متعلق به گونه های استاندارد لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس (ATCC 4356) و لاکتوباسیلوس روتری (ATCC 23272) برای بررسی اثرات ضد میکروبی علیه سه سویه پاتوژن دستگاه گوارش، شامل شیگلا سونئی (ATCC 9290)، سالمونلا انتریکا (BAA-708) و اشریشیاکلی (ATCC 25922) استفاده شد و تست Agar Spot برای تشخیص فعالیت ضد میکروبی پروبیوتیک هابه کار رفت. در این روش 2 میکرو لیتر از سویه پروبیوتیک مورد نظر بر روی کشت پور پلیت سویه پاتوژن قرار داده شده و پس از 24 ساعت هاله عدم رشد اندازه گیری شد. به منظور کاهش خطا هر آزمون 3 بار تکرار شده و میانگین قطر هاله عدم رشد، توسط دو پروبیوتیک مقایسه گردید.یافته ها: نتایج توصیف کننده اثرات ضد میکروبی لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس و لاکتوباسیلوس روتری بود. در هر دو سویه پروبیوتیک بیشترین اثر مهاری علیه شیگلا سونئی ثبت شد و اثر مهاری آن ها علیه باکتری های سالمونلا انتریکا و اشریشیاکلی به ترتیب در ردیف دوم و سوم بودند.نتیجه گیری: بررسی ها نشان می دهند که استفاده از لاکتوباسیلوس روتری و لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس جهت پیشگیری و درمان عفونت های دستگاه گوارش به عنوان راه کاری مهم و عملی، منطقی و قابل قبول است.

زمینه و هدف: استفاده وسیع از آنتی بیوتیکها منجر به پیدایش سویه های میکروبی مقاوم به آنتی بیوتیکها شده است. به منظور یافتن آنتی بیوتیکی جدید برای مقابله با میکروارگانیسمهای بیماری زا و مقاوم به آنتی بیوتیکهای رایج، یک باکتری تولیدکننده ماده ضدمیکروبی، از پوست قورباغه Rana ridibunda جداسازی شد.روش بررسی: شناسایی باکتری بر اساس توالی یابی 16SrDNA، خصوصیات مورفولوژیکی و بیوشیمیایی انجام گرفت. آزمایشهای تعیین حساسیت میکروبی به دو روش انتشار از دیسک و تعیین کمترین غلظت مهارکننده رشد (MIC) بر روی باکتریهای استاندارد صورت گرفت. به منظور تعیین هویت ماده ضد میکروبی، مایع کشت باکتری، سانتریفیوژ و سپس استخراج توسط حلال های آلی کلروفرم و متانول انجام گرفت. جهت بررسی فعالیت ضدمیکروبی باندهای ایجاد شده روی صفحات TLC از روش Bioautography استفاده شد.یافته ها: باکتری جداسازی شده به عنوان سویه ای از Bacillus atrophaeus شناسایی شد. ماده ضدمیکروبی تولید شده توسط این باکتری در طیف دمایی از 25 تا 100 درجه سانتی گراد به مدت 2 ساعت و همچنین در pH بین 2 تا 11 پایدار است. در سنجش به روش Bioauotography مشخص شد فراکشن متانولی حلال مناسب تری برای استخراج ماده ضدمیکروبی است. تست ضدمیکروبی از شیلنگ دیالیز نشان داد که وزن ماده ضد میکروبی مورد نظر کمتر ازKD 1 می باشد.نتیجه گیری: نتایج حاصله نشان داد که بعضی از خصوصیات ماده ضد میکروبی تولید شده توسط این باکتری با آنتی بیوتیک های پپتیدی تولیدی توسط جنس Bacillus نظیر باسیتراسین تفاوت هایی دارد و احتمال اینکه این ماده ضد میکروبی ترکیبی جدید باشد را افزایش می دهد.

زمینه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهم ترین عوامل عفونت کسب شده از اجتماع است که می تواند عامل عفونت های مهمی هم چون باکتریمی، اندوکاردیت، استئومیلیت، سندرم شوک توکسیک و عفونت های پوستی باشد. با توجه به وجود گزارش های متفاوت در مورد حساسیت این باکتری نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف این تحقیق با هدف تعیین الگوی مقاومتی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس انجام گرفت.روش بررسی: این مطالعه توصیفی در شش ماهه نخست سال1390 انجام گرفت، 100 سویه استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های بالینی دو بیمارستان امام رضا و شهدا شهر تبریز جدا و تست حساسیت آنها با روش کربی- بائر نسبت به آنتی بیوتیک های کلیندامایسین، سیپروفلوکساسین، تتراسایکلین، سفازولین، جنتامایسین، کوتریموکسازول، سفالکسین، کربنی سیلین، متی سیلین و اگزاسیلین انجام و سویه ATCC25923 به عنوان کنترل کیفی جهت تست آنتی بیوگرام در نظر گرفته شد.یافته ها: بیشترین میزان حساسیت به ترتیب به کوتریموکسازول، کربنی سیلین، جنتامایسین، سیپروفلوکساسین، کلیندامایسین، سفالکسین، سفازولین، تتراسایکلین، متی سیلین و اگزاسیلین به ترتیب 74%، 73%، 69%، 67%، 63%، 61%، 59%، 42%، 4% و 0%، همچنین بیشترین میزان مقاومت به ترتیب به اگزاسیلین 100%، متی سیلین 91%، تتراسایکلین 44%، سفالکسین 30%، سفازولین 29%، جنتامایسین و کربنی سیلین 20%، کوتریموکسازول 16%، کلیندامایسین 15% و سیپروفلوکساسین 12% مشاهده شد.نتیجه گیری: با توجه به افزایش شیوع مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک ها تشخیص سریع و به موقع سویه های مقاوم به منظور انتخاب گزینه های درمانی مناسب و جلوگیری از گسترش مقاومت امری ضروری به نظر می رسد.

زمینه و هدف: با توجه به پایداری فلز سرب در محیط زیست، انتقال آن از طریق زنجیره غذایی و اثبات تاثیرات مخرب آن بر سلول های زنده، هدف از انجام این تحقیق، استفاده از باکتریهای موثر در حذف و یا کاهش این فلز در قالب تولید فلوکه میکروبی بوده است.روش بررسی: به منظور جداسازی نمونه های باکتریایی مقاوم به فلز سرب، نمونه لجن فعال فاضلاب شهری بر روی محیط کشت BHI-agar واجد ppm 1000 فلز با شرایط دمای 30oC به مدت 24 کشت داده شد. مقاومت و کاهش میزان فلز به روش دستگاهی Atomic Absorption ارزیابی، MIC و MBC نمونه ها تعیین گردید و مقاوم ترین سویه گزینش شد. توانایی سویه منتخب در تولید فلوکه میکروبی و کاهش سرب توسط غذایی ماهی Fish-color به عنوان منبع غذایی و بستر فلوکه میکروبی مورد بررسی قرار گرفت. شناسایی و تایید سویه منتخب به روش 16S rRNA انجام پذیرفت.یافته ها: از میان 25 سویه جدا شده، گونه منتخب باکتریایی با بیشترین مقاومت به سرب با MIC و MBC به ترتیب 8280 ppm و 12420 ppm، ارزیابی گردید. آنالیز دستگاهی Atomic Absorption نشان داد که سویه فوق توانایی کاهش 98% سرب موجود در محیط را داشته است. توانایی باکتری در تولید فولکه میکروبی و کاهش سرب محیط به ترتیب 120 g/L و 84% ارزیابی گردید. بررسی های بیوشیمیایی و شناسایی مولکولی سویه منتخب را با 99% تشابه، Bacillus subtilis تایید نمود.نتیجه گیری: باکتری Bacillus subtilis جدا شده در این تحقیق کاندید مناسبی جهت تولید لجن زیستی و استفاده در تصفیه فاضلابها و استخرهای پرورش ماهی و میگو آلوده به این فلز می باشد.