مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

1,117
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

571
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ ژن بیان کننده آنتی ژن سطحی 1(SAG1) توکسوپلاسما گوندی و ترانسفورماسیون آن در دو سویه DH5a و TG1 اشرشیاکلی

صفحات

 صفحه شروع 73 | صفحه پایان 81

کلیدواژه

آنتی ژن سطحی اصلی (SAG1)Q3

چکیده

 زمینه و هدف: بیماری توکسوپلاسموزیس توسط تک یاخته انگلی به نام توکسوپلاسماگوندی (Toxoplasma gondii) ایجاد می شود.SAG1 Surface Antigen 1)), آنتی ژن اختصاصی ـ مرحله ای است که فقط در مرحله تاکی زوئیت وجود دارد و در مراحل اسپوروزئیت و برادی زوئیت وجود ندارد و به مقدار فراوان و به طور یکنواخت بر روی سطح داخل و خارج سلولی تاکی زوییت ها توزیع شده است. این آنتی ژن دارای دو گلیکوفرم است و آنتی ژن, کاملا conformational است. ژن کد کننده SAG1, به صورت Single copy بوده و هیچ اینترونی ندارد. SAG1, ایمونوژنیک ترین ساختار تاکی زوئیت T.gondii است و به همین خاطر در چندین روش تشخیصی و برای تهیه واکسن نوترکیب و زیر واحدی علیه بیماری توکسوپلاسموزیس, استفاده شده و مورد توجه بوده است. هدف از این مطالعه, کلون کردن قطعه SAG1 در پلاسمید PTZ57R و ترانسفورم کردن پلاسمید نوترکیب در سویه های DH5α و TG1 باکتری های E.coli می باشد. روش بررسی: این تحقیق یک مطالعه تجربی می باشد. برای این کار, ابتدا انگل توکسوپلاسما در صفاق موش سوری تکثیر داده و آنگاه انگل با PBS(Phosphate buffered saline) شستشو داده شد. جهت تهیه و نگهداری انگل, از موش سوری ماده استفاده شد.  DNA( (Deoxyribonucleic acid ژنومی توکسوپلاسما, با روش فنل ـ کلر فرم, استخراج شده, سپس با کمک پرایمرهای اختصاصی ویژه ژن SAG1, ژن مورد نظر با روش PCR ( (Polymrase chain reaction تکثیر شد و با استفاده از ژل آگاروز, محصول PCR, الکتروفورز شده و اندازه ژن تکثیر شده با استفاده از مارکر تعیین شد. محصول PCR با استفاده از کیت تجارتی, خالص شده و سپس به کمک آنزیم T4DNA Ligase, محصول PCR به داخل یک کلونینگ وکتور کلون شد. در نهایت پلاسمید نوترکیب به داخل سلولهای مستعد E.coli دو سوش TG1 و DH5α ترانسفورم شد. یافته ها: نمونه DNA خالص سازی شده با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن SAG1, PCR گردید. محصول PCR به صورت یک باند bp960 (960جفت باز) در ژل آگاروز 1% مشاهده گردید. محصول PCR درون پلاسمید PTZ57R, کلون گردید, سپس پلاسمید نوترکیب درون باکتری اشرشیاکلی سوش های TG1, DH5α ترانسفورم گردید. برای شناسایی پلاسمید نوترکیب, ابتدا به کمک ژن مقاومت به آنتی بیوتیک, کلونی های حاوی پلاسمید نوترکیب روی محیط LB جامد حاوی (5- bromo-4 chloro-3 indolyl beta diGalactopyranosid) XGAL , IPTG(Isopropyl-beta-dithio Galactopyranosid) و آمپی سیلین جداسازی گردیدند, سپس پلاسمید نوترکیب استخراج شد و با روش PCR, ژن مورد نظر تایید گردید. پلاسمید نوترکیب حاوی ژن SAG1 تحت تاثیر برش آنزیمی قرار گرفت که قطعات bp2982 و bp864 بدست آمده نیز نشانه تایید کار می باشد. کلونی های TG1 و DH5α که در محیط LB رشد کرده بودند, شمارش گردیدند و میانگین و انحراف معیار برای این دو سویه در هر پلیت براساس آزمون آماری Mannwhitny مقایسه گردید. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پلاسمید PTZ57R و استرین TG1 اشرشیاکلی بکار رفته در این تحقیق, برای نگهداری ژن SAG1 مناسب می باشند.

استنادها

  • ثبت نشده است.

    • ارجاعات

  • ثبت نشده است.

    • استناددهی

    APA: کپی

    حسینیان خسروشاهی، کامی، غفاری فر، فاطمه، شریفی، زهره، دیلمی اصل، عبدالحسین، و صلح جو، کاووس. (1385). کلونینگ ژن بیان کننده آنتی ‌ژن سطحی 1(SAG1) توکسوپلاسما گوندی و ترانسفورماسیون آن در دو سویه DH5a و TG1 اشرشیاکلی. علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)، 13(53)، 73-81. SID. https://sid.ir/paper/10365/fa

    Vancouver: کپی

    حسینیان خسروشاهی کامی، غفاری فر فاطمه، شریفی زهره، دیلمی اصل عبدالحسین، صلح جو کاووس. کلونینگ ژن بیان کننده آنتی ‌ژن سطحی 1(SAG1) توکسوپلاسما گوندی و ترانسفورماسیون آن در دو سویه DH5a و TG1 اشرشیاکلی. علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)[Internet]. 1385؛13(53):73-81. Available from: https://sid.ir/paper/10365/fa

    IEEE: کپی

    کامی حسینیان خسروشاهی، فاطمه غفاری فر، زهره شریفی، عبدالحسین دیلمی اصل، و کاووس صلح جو، “کلونینگ ژن بیان کننده آنتی ‌ژن سطحی 1(SAG1) توکسوپلاسما گوندی و ترانسفورماسیون آن در دو سویه DH5a و TG1 اشرشیاکلی،” علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)، vol. 13، no. 53، pp. 73–81، 1385، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/10365/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.

    • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.

    • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button