مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

611
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

554
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3)

صفحات

 صفحه شروع 27 | صفحه پایان 32

کلیدواژه

اشریشیاکلی سویه Rosetta (DE3)Q1

چکیده

 اینترلوکین15 (IL-15), سایتوکاینی است که به واسطه فعالیت های فیزیولوژیکی آن می تواند در درمان های ضدسرطان نقش ایفا کند. IL-15 باعث تمایز, تکثیر, فعال شدن و بقای سلول های کشنده طبیعی می شود و بقای لنفوسیت های T خاطره ای را بهبود می بخشد. از آنجایی که راندمان تولید و تخلیص این سایتوکاین عمدتا پایین است, علی رغم پیشرفت های اخیر, همچنان بهینه کردن شرایط تولید, ارزشمند است. بنابراین در مطالعه حاضر, اقدام به کلون و بیان ژن IL-15 انسانی در باکتری متفاوت با سویه های قبلی شد و به جای بیان در باکتری E. coli سویه رایج BL21, از سویه Rosetta (DE3) استفاده شد که قادر است با استفاده از کدون های نادری که در باکتری کمتر مورد استفاده قرار می گیرند, بیان ژن های یوکاریوتی را بهتر از سویه های دیگر انجام دهد, به طوری که پروتیین بیان شده شباهت بیشتری به پروتیین انسانی داشته باشد. پس از سنتز ژن IL-15, توالی مورد نظر در وکتور بیانی باکتریال pET28a کلون شد و پس از تایید با کلنیPCR, هضم آنزیمی با آنزیم های BamHI و XhoI و مشاهده باند 391 بازی روی ژل آگارز و تعیین توالی, در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE) ترانسفورم شد. القای بیان در جذب نوری 6/0 در OD600 و در حضور 1میلی مولار ایزوپروپیل-بتا-دی-تیوگالاکتوپیرانوزید (IPTG) انجام شد. مشاهده باند 15کیلودالتونی روی ژل SDS-PAGE و سپس انجام وسترن بلات به کمک آنتی بادی اختصاصی تجاری علیه IL-15, نشان از درستی فرآیند بیان داشت. راندمان بیان به کمک دانسیتومتری با نرم افزار Fiji حدود 37% تخمین زده شد. با توجه به اینکه بیان ژن انسانی IL-15 در سویه باکتریایی E. coli Rosetta (DE3) انجام شده است, انتظار می رود که در مطالعات بعدی, عملکرد مناسبی از خود نشان دهد. . .

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    بحرالعلومی شاپورآبادی، مینا، آرش کیا، آرش، محجل، نصیر، روحوند، فرزین، و آزادمنش، کیهان. (1398). کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، 23(1 )، 27-32. SID. https://sid.ir/paper/373592/fa

    Vancouver: کپی

    بحرالعلومی شاپورآبادی مینا، آرش کیا آرش، محجل نصیر، روحوند فرزین، آزادمنش کیهان. کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3). پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)[Internet]. 1398؛23(1 ):27-32. Available from: https://sid.ir/paper/373592/fa

    IEEE: کپی

    مینا بحرالعلومی شاپورآبادی، آرش آرش کیا، نصیر محجل، فرزین روحوند، و کیهان آزادمنش، “کلونینگ و بیان ژن اینترلوکین15 در باکتری E. coli سویه Rosetta (DE3)،” پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، vol. 23، no. 1 ، pp. 27–32، 1398، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/373592/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button