مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

826
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

702
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلون، بیان، تخلیص و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم کربوکسی پپتیداز G2

صفحات

 صفحه شروع 8 | صفحه پایان 18

چکیده

 زمینه و هدف: متوتروکسات یکی از داروهای پرمصرف در شیمی درمانی است که نارسایی کلیوی یکی از عوارض جانبی آن است. آنزیم کربوکسی پپتیدازG2 (گلوکارپیداز تحت نام تجاری وراکساز) آنزیمی باکتریایی است که میتواند متوتروکسات را به متابولیت های غیرفعال خود تبدیل کند و پس از درمان با دز بالای متوتروکسات, منجر به حذف آن از مسیر غیرکلیوی می شود. روش کار: در این پروژه ابتدا ژن کربوکسی پپتیداز G2 به دست آمده از سایتNCBI (Accession number: ACY05517) در داخل وکتور pUC57 توسط شرکتGene Cust سنتز شد, سپس برای ادامه روند, وکتور pUC57 که حاوی ژن کربوکسی پپتیداز G2 بود از باکتری استخراج شد و به عنوان الگو در واکنش PCR به همراه پرایمرهای دارای سایت برشNdeI و XhoIمورد استفاده قرار گرفت. پس از آن بر روی محصولPCR هضم آنزیمی صورت گرفت و در بین سایت های مورد نظر در وکتور بیانی pET28a کلون گردید. در نهایت پلاسمید نوترکیب به داخل سویه بیانی E. coli BL21 ترنسفورم شد و تعدادی از پلاسمیدهای تایید شده از طریق Colony PCR برای تعیین توالی با پرایمر T7 promotor و T7 terminator, ارسال شدند. نتایج تعیین توالی نیز حضور ژن را تایید کردند, پس از آن بیان تحت شرایط بیانی مختلف بهینه گردید. یافته ها: بیشترین سطح بیان در غلظت 5/0 میلی مولار IPTG دمای 25 درجه سانتیگراد و مدت زمان انکوباسیون 6 ساعت تعیین شد. در انتها پروتئین مورد نظر از طریق کروماتوگرافی تمایلی نیکل آگارز تخلیص و ویژگی های سینتیکی آن بررسی شد. pH و دمای بهینه فعالیت آنزیم به ترتیب 7 و ˚ C25 به دست آمد. برای سوبسترای متوتروکسات μ M 24Km= و μ mol/min 005431/0 Vmax = محاسبه شد. نتیجه گیری: این مطالعه به منظور تولید و فرآوری آنزیم کربوکسی پپتیداز G2 بوده و در آینده این آنزیم می تواند کاندیدای بالقوه ای برای کاهش اثرات جانبی شیمی درمانی باشد.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    عالی زاده، رضا، کاردانی، نسرین، خداکرمی، عاطفه، خواجه، خسرو، و دبیرمنش، بهاره. (1398). کلون, بیان, تخلیص و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم کربوکسی پپتیداز G2. علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)، 26(10 )، 8-18. SID. https://sid.ir/paper/406222/fa

    Vancouver: کپی

    عالی زاده رضا، کاردانی نسرین، خداکرمی عاطفه، خواجه خسرو، دبیرمنش بهاره. کلون, بیان, تخلیص و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم کربوکسی پپتیداز G2. علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)[Internet]. 1398؛26(10 ):8-18. Available from: https://sid.ir/paper/406222/fa

    IEEE: کپی

    رضا عالی زاده، نسرین کاردانی، عاطفه خداکرمی، خسرو خواجه، و بهاره دبیرمنش، “کلون, بیان, تخلیص و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم کربوکسی پپتیداز G2،” علوم پزشکی رازی (مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران)، vol. 26، no. 10 ، pp. 8–18، 1398، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/406222/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button