Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

مقاله مقاله نشریه

مشخصات مقاله

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

895
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

487
Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

طراحی، همسانه سازی و بررسی بیان ژن NP در ناقل دوسیسترونی واجد ژن اینترلوکین 18 موشی با هدف استفاده در مطالعات واکسن آنفلوانزا

صفحات

 صفحه شروع 45 | صفحه پایان 58

چکیده

 مقدمه: در حال حاضر واکسیناسیون مهم ترین استراتژی در کاهش آمار مبتلایان و مرگ و میر سالیانه ناشی از آنفلوانزا فصلی تلقی می شود. بر خلاف آنتی ژن های سطحی مورد استفاده در ترکیب واکسن های موجود, پروتئین های داخلی ساختاری و غیر ساختاری ویروس آنفلوانزا به خوبی حفاظت شده هستند. با توجه به سطح حفاظت شدگی نسبتا بالای نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا و قابلیت ادجوانتی اینترلوکین 18 در تحریک پاسخ های ایمنی و شیفت به Th1, این مطالعه در صدد ساخت یک پلاسمید دوسیسترونی با قابلیت بیان ژن های NP و اینترلوکین 18 موشی بود تا در صورت نیل به این هدف به عنوان یک کاندید واکسن قابلیت ایمنی زایی آن در مطالعات بعدی مورد ارزیابی شود. مواد و روش ها: در مرحله اول RNA ژنومی ویروس آنفلوانزا تیپ A سویه H1N1/ PR8 استخراج شد و پس از تولید cDNA, توالی ژن کد کننده NP با استفاده از آغازگر اختصاصی ژن و با روش PCR تکثیر شد. در مرحله بعد ژن NP در ناقل همسانه سازی pJET1.2/blunt همسانه سازی شد. پس از تایید درستی همسانه سازی ژن در ناقل pJET1.2/blunt از طریق تعیین توالی, هضم آنزیمی و PCR, قطعه مزبور توسط هضم آنزیمی دو گانه خارج شد. پلاسمید pIRES-Igk/mIL18/Fc با استفاده از آنزیم های BstXI/NotI هضم دوگانه شد و قطعه مربوط به eGFP خارج شد. سپس فرآیند الحاق ژن NP در وکتور دوسیسترونی pIRES-Igk/mIL18/Fc هضم شده با استفاده از آنزیمT4 لیگاز صورت پذیرفت. محصول لیگاسیون به سویه استاندارد DH5a ترانسفورم شد و انتخاب کلونی های مثبت با استفاده از کلونیPCR صورت پذیرفت. به منظور بررسی درستی همسانه سازی از آزمون PCR, هضم آنزیمی و تعیین توالی استفاده شد. در نهایت بیان ژن NP و اینترلوکین 18 از سازه ژنی mIL-18-pIRES2-NP در رده سلولی BHK-21 و RAW264.7 ترانسفکت شده با پلاسمید به وسیله رنگ آمیزی ایمنوفلورسنت غیر مستقیم و الایزا ارزیابی شد. نتایج: نتایج PCR, هضم آنزیمی و تعیین توالی با استفاده از آغازگرهای اختصاصی به صورت دو جهته نشان داد که ژن NP ویروس آنفلوانزا در ناقل pIRES-Igk/mIL18/Fc به صورت موفق و در راستای درست کلون شده است. ترانسفکشن و بررسی قابلیت بیان سازه ژنی mIL-18-pIRES2-NP با استفاده از رنگ آمیزی ایمنوفلوئورسانس و الایزا بیان موفق آمیز ژن های NP و اینترلوکین 18 از mIL-18-pIRES2-NP در سلول یوکاریوتی را اثبات کرد. بحث و نتیجه گیری: نتایج بدست آمده در این تحقیق بیان موفقیت آمیز ژن NP و اینترلوکین 18 از سازه mIL-18-pIRES2-NP را نشان داد. با توجه به آثار ادجوانتی سایتوکاین اینترلوکین 18, پلاسمید ساخته شده می تواند به عنوان یک کاندید مناسب واکسن ژنی برای پیش گیری از عفونت ناشی از ویروس آنفلوانزا در مطالعات ارزیابی ایمنولوژیک آتی مطرح شود.

استنادها

  • ثبت نشده است.
  • ارجاعات

    استناددهی

    APA: کپی

    طاهری، مجتبی، شناگری، محمد، نیکوکار، ایرج، خسروی، محمود، و نعمت طلب، مهران. (1395). طراحی, همسانه سازی و بررسی بیان ژن NP در ناقل دوسیسترونی واجد ژن اینترلوکین 18 موشی با هدف استفاده در مطالعات واکسن آنفلوانزا. پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، 19(2)، 45-58. SID. https://sid.ir/paper/81036/fa

    Vancouver: کپی

    طاهری مجتبی، شناگری محمد، نیکوکار ایرج، خسروی محمود، نعمت طلب مهران. طراحی, همسانه سازی و بررسی بیان ژن NP در ناقل دوسیسترونی واجد ژن اینترلوکین 18 موشی با هدف استفاده در مطالعات واکسن آنفلوانزا. پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)[Internet]. 1395؛19(2):45-58. Available from: https://sid.ir/paper/81036/fa

    IEEE: کپی

    مجتبی طاهری، محمد شناگری، ایرج نیکوکار، محمود خسروی، و مهران نعمت طلب، “طراحی, همسانه سازی و بررسی بیان ژن NP در ناقل دوسیسترونی واجد ژن اینترلوکین 18 موشی با هدف استفاده در مطالعات واکسن آنفلوانزا،” پژوهش های آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)، vol. 19، no. 2، pp. 45–58، 1395، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/81036/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا