مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

video

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

sound

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

نسخه انگلیسی

مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

بازدید:

2,044
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

دانلود:

977
مرکز اطلاعات علمی Scientific Information Database (SID) - Trusted Source for Research and Academic Resources

استناد:

1

اطلاعات مقاله نشریه

عنوان

کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفا 2bی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی

صفحات

 صفحه شروع 325 | صفحه پایان 334

کلیدواژه

PET-26b (+)Q2

چکیده

 زمینه و هدف: اینترفرون ها وسیله دفاعی بدن علیه ویروس ها هستند که به سرعت در بدن تولید شده, سلول های اطراف را به تولید پروتئین هایی که تکثیر ویروس را مهار, یا پاسخ ایمنی و رشد سلولی را کنترل می کنند, تحریک می کنند. با توجه به اهمیت دارویی اینترفرون آلفا 2b انسانی در ایران و جهان, تولید این دارو در داخل کشور و از طریق بیوشیمیایی امکان پذیر اما بسیار مشکل می باشد. زیرا تولید این پروتئین توسط سلول های سالم بسیار کم انجام می شود. هدف از این تحقیق, همسانه سازی (Cloning) و بیان ژن اینترفرون آلفا 2b انسانی در باکتری اشرشیاکلی در یک سیستم بیانی مناسب جهت امکان هدایت پروتئین تولید شده به فضای پریپلاسمی باکتری است. بیان در پریپلاسم, فضای عالی برای تشکیل پیوندهای صحیح و پیچش صحیح ایجاد می کند. ناخالصی پروتئین و فعالیت پروتئازها در پریپلاسم کمتر از سیتوپلاسم است و تخریب و تجزیه پروتئین ها در پریپلاسم کمتر اتفاق می افتد.روش بررسی: ژن اینترفرون آلفا 2b پس از تکثیر با آغازگرهای اختصاصی در ناقل بیانی pET-26b(+) تحت کنترل پروموتور T7 و پپتید نشانه پریپلاسمی pelB و با استفاده از آنزیم های برشی NcoI و XhoI کلون گردید و به باکتری اشرشیاکلی سویه BL21 (DE3) منتقل گردید. همسانه سازی ژن اینترفرون آلفا در ناقل بیانی (+) pET-26b با استفاده از Colony PCR, هضم آنزیمی و تعیین توالی, تایید شد. سپس بیان ژن اینترفرون آلفا با استفاده از آنالیز بلات نقطه ای در فضای پریپلاسمی و به صورت پروتئین کل در زمان های مختلف پس از القاء با IPTG مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: با استفاده از آنالیز بلات نقطه ای تایید شد که پروتئین نوترکیب اینترفرون آلفا 2b در سیستم بیانی اشرشیاکلی تولید و وارد فضای پریپلاسمی باکتری شده است.نتیجه گیری: این تحقیق می تواند امکان تولید پروتئین مهم اینترفرون آلفا 2b انسانی نوترکیب را در شکل صحیح خود و با صرف هزینه های بسیار پائین تر فراهم آورد.

استنادها

ارجاعات

  • ثبت نشده است.
  • استناددهی

    APA: کپی

    عبدالرسولی، نهضت، رجبی معماری، حمید، رعایایی اردکانی، محمد، ابراهیمی، محمدعلی، و ابراهیمی، نازنین. (1392). کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفا 2bی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی. مجله علمی پزشکی جندی شاپور، 12(3 (مسلسل 84))، 325-334. SID. https://sid.ir/paper/12759/fa

    Vancouver: کپی

    عبدالرسولی نهضت، رجبی معماری حمید، رعایایی اردکانی محمد، ابراهیمی محمدعلی، ابراهیمی نازنین. کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفا 2bی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی. مجله علمی پزشکی جندی شاپور[Internet]. 1392؛12(3 (مسلسل 84)):325-334. Available from: https://sid.ir/paper/12759/fa

    IEEE: کپی

    نهضت عبدالرسولی، حمید رجبی معماری، محمد رعایایی اردکانی، محمدعلی ابراهیمی، و نازنین ابراهیمی، “کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفا 2bی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی،” مجله علمی پزشکی جندی شاپور، vol. 12، no. 3 (مسلسل 84)، pp. 325–334، 1392، [Online]. Available: https://sid.ir/paper/12759/fa

    مقالات مرتبط نشریه ای

    مقالات مرتبط همایشی

  • ثبت نشده است.
  • طرح های مرتبط

  • ثبت نشده است.
  • کارگاه های پیشنهادی






    بازگشت به بالا
    telegram sharing button
    whatsapp sharing button
    linkedin sharing button
    twitter sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    email sharing button
    sharethis sharing button