مقدمه: نعناع فلفلی با نام علمی L. Mentha piperita از خانواده Lamiaceae از جمله گیاهان دارویی و معطری است که اسانس آن مصارف دارویی، غذایی، آرایشی و بهداشتی فراوانی دارد. در این پژوهش برای اولین بار اسانس نعناع فلفلی با استفاده از روش SFME تولید می شود و مشخصات شیمیایی و خواص ضد میکروبی آن بررسی می گردد.مواد و روش ها: اسانس گیری از گیاه خشک، به وسیله دو روش تقطیر با آب و مایکروویو بدون مصرف حلال، انجام شد. ترکیبات اسانس های حاصله، با دستگاه GC/MS شناسایی گردید. فعالیت ضد میکروبی هر یک از اسانس های فوق بر روی باکتری های ,E.coli (PTCC 1330) (PTCC 1254) Salmonella typhimurium (PTCC 1622) وBacillus subtilis مورد آزمون قرار گرفته و برای هر یک از اسانس ها میزان حداقل غلظت ممانعت کننده (MIC) مشخص گردید.یافته ها: در اسانس L. Mentha piperita حاصل از روش HD، 31 ترکیب و در اسانس حاصل از روش SFME، 33 ترکیب از اجزای متشکله این روغن اسانسی، شناسایی گردیدند. همچنین نتایج آزمایش میکروبی نشان داد که MIC هر دو نمونه اسانس برای سه میکروب مذکور یکسان و برابر با ppm 1000 می باشد.نتیجه گیری: استفاده از روش SFME مزایای زیادی از جمله کاهش زمان استخراج، افزایش بازده، کاهش مصرف انرژی و هزینه، کاهش آب مصرفی و تولید درصد بالاتری از ترکیبات فعال، را دارا می باشد.